Determinación de Grupo Sanguíneo

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Determinación de Grupo Sanguíneo

  1. 1. Práctica 9 Andrés González de Rosenzweig Erick Estrella Ortiz Equipo1 Determinación de Grupo Sanguíneo Licenciatura en Medicina General | Semestre 1ro Facultad de Medicina de la Universidad Autónoma de Querétaro | 23 Mayo de 2010 ‘Por la Vida y la Salud, educo en la Verdad y en el Honor’
  2. 2. a.Marco Teórico i.Determinación del Grupo Sanguíneo ABO. i.i. Reactivos Anti: Aglutininas. Las aglutininas son γ-inmunoglobulinas (anticuerpos) desarrollados por la sangre en respuesta a las intrusiones de tipos sanguineos adversos. Las aglutininas tendrán hasta 10 sitios activos los cuales se unirán, aglutinarán e inutilizarán a los hematíes con aglutinógenos antagónicos. La sangre desarollará aglutininas para su tipo de sangre ‘antagónico’. Es decir, la sangre A, desarollará anti-B; la sangre B, desarollará anti-A y la sangre AB no desarollará aglutininas. La sangre AB+ entonces carecerá de algutininas y podrá recibir cualquier tipo sanguíneo. La cantidad de aglutininas en la sangre se reduce con el aumento en la edad del paciente, como se puede observar el agráfica adjunta. ii. In Vitro: Las aglutininas aisladas podrán ser expuestas a muestras sanguíneas. Si la muestra se aglutina visiblemente al entrar en contacto cn la aglutinina anti, será indicador positivo de la presencia de aglutinógeno específico. Los mas utilizados son el anti-A, anti-B y anti-D, tal como utilizaremos en ésta práctica. iii.Sistema ABO y su significancia clínica. En los inicios de la práctica de la transfusión sanguínea, era común la muerte de los pacientes tras una transfusión sanguínea. Se descubrió entonces que, en ocasiones, los hematies poseen antígenos (o aglutinógenos, proteínas de membrana) distintos de una persona a otra. Al ser transfundidos, los pacientes experimentaban la aglutinación y la hemólisis de los hematíes a consecuencia de reacciones inmunes entre la sangre propia y la transfundida. Es entonces cuando se agrupó a los hematies en varios tipos generales por sus antígenos: Los sistemas ABO Rh. Los grupos sanguíneos son heredados de los padres, siendo la probabilidades de herencia fácilmente predecibles mediante un diagrama de Punett. Si se presenta sangre con Diagrama de Punnett O=i y siempre es hematíes carentes de aglutininas, es compatible con cualquier otro tipo de recesivo. sangre, es decir un ORh- o donante universal. También se dan reacciones adversas en embarazos donde el feto tiene un tipo sanguíneo incompatible con el de la madre, ésta patología se llama Erithroblastosis Fetalis. iii.i. El sistema ABO En la membrana celular de los hematies o eritrocitos pueden existir, pueden no existir o pueden coexistir los antígenos A y B. También se les llama agultinógenos pues causan la algutinación inmediata de los eritrocitos. Si se presenta antígeno A, la sangre será tipo A; si se presenta el tipo B, será B; si se presentan ambos, será AB; si no se presenta ninguno, será sangre tipo O. iii.ii.Sistema Rh Además de los antígenos contemplados en el sistema ABO, también existe otro grupo de antígenos comunes que reaccionará ente la exposición masiva a otros antígenos (Ej. transfusión sanguínea). Éstos son CDE/cde. En la población, el mas vasto es el antígeno D, que también es el mas antigénico. Si se presenta el antígeno D, la sangre será Rh+ y ante su ausencia, será Rh-. La población caucásica tiene aldededor de un 85% de personas Rh+. iv.Técnica en Placa y Tubo iv.1.Método en placa: La mezcla de aglutinina y muestra se hace en una placa de porcelana, placa microtiter, o vidrio cóncava. El aglutnamiento de hematies en las gotas dara una prueba positiva iv.2.Método en tubo: La mezcla se hará en tubos de ensayo, los cuales se centrifugarán por 10-15 minutos. La no disolución del ‘tapon’ de eritrocitos dará una prueba positiva.
  3. 3. b.Objetivo La determinación de el grupo sanguíneo de un determinado número de muestras provenientes de diversos donantes. c.Metodología Diagrama de cánula de vacío ʻVacutainerʼ. ©BD Material1 1.Cristalería 1.1. 3 Goteros 1.2. 3 Portaobjetos de Cristal 2.Reactivos 2.1.Reactivo Anti-D (Rh) Tubo de Vacío Base Cánula 2.2.Reactivo Anti-B 2.3.Reactivo Anti-A 3.Punzocortantes y Otros 3.1. 4 Piezas de kit ‘Vacutainer’ de Becton-Dickinson. 2 3.1.1. Cánula 3.1.2. Base para Cánula 3.1.3. Tubo de vacío 3.2.Ligadura 3.3.Guantes estériles de Látex. 1.Obtención de Muestras 1.1.El estudiante a tomar la muestra deberá colocarse guántes de látex. 1.2.Se coloca al paciente sentado, con el antebrazo sobre una superficie firme. 1.3.Se coloca un torniquete medial a la zona de extracción de muestra. 1.4.Se selecciona zona de venopunción mediante observación y palpación. 1.5.Se limpia la zona de venopunción: una vez limpiada la zona, no deberá palparse. 1.6.Se coloca el tubo en la cánula sin romper el diafragma de vacío del tubo. 1.7.Se introduce la cánula en un ángulo de 45 grados y se rompe el diafragma. 1.8.Al ver flujo de sangre: 1.8.1.Se redirecciona la cánula en sentido de la vena. 1.8.2.Se quita el torniquete. 1.9.Se llena el tubo. 1.10.Se retira y cierra el tubo. 1.11.Se retira la cánula. 1.11.1.Se coloca una torunda con alcohol sobre el sitio de venopunción. 1 Se requieren 3 donantes de muestras de sangre. 2 Una más de las necesarias, en caso de recolección fallida.
  4. 4. Portaobjetos con 2.Preparación de Reactivos reactivos ADB de superior a inferior 2.1.Se alínean 3 portaobjetos, en cada uno 2.1.1.Se coloca una gota de cada reactivo, de preferencia en el mismo orden en cada portaobjetos. Cada portaobjetos corresponde a una muestra de sangre. 2.1.2.Se coloca una gota de sangre de la muestra en cada gota de muestra del portaobjetos correspondiente. 3.Reacción 3.1.En cada gota se observará una de dos situaciones: 3.1.1. Una mezcla homogénea de Reactivo y Sangre. 3.1.1.1.Reacción Negativa 3.1.2. Una mezcle heterogenea de Reactivo y Sangre. 3.1.2.1.Reacción Positiva d. Resultados Rx. A Rx. B Rx.D Grupo MA + - + A+ M2 - + + B+ MD + - + A+ Resultados de la reacción entre Sangre y Reactivo. La muestra A muestra un corrimiento indebido, no afectó los resultados pués la mezcla ocurrió en el tiempo después de la reacción y la fotografía. Nótese la clara naturaleza heterogénea de las pruebas A y D en las muestras MA y M2. e. Conclusión La extracción, analisis y determinación del grupo sanguíneo de cada individuo mediante la utilización de reactivos Anti-(A,B,D) fue exitosa dando resultados claros y concretos. Además, se pudo apreciar claramente el efecto de la exposición de aglutinógenos a aglutininas antagónicas, y por ende entender la fisiología del rechazo inmunologico a transfusiones sanguíneas entre grupos antagónicos. Se podría mejorar el exámen mediante la exploración de la presencia de otros antígenos menos comunes.
  5. 5. f. Bibliografía Imágenes e Información: Arthur C. Guyton, John E. Hall.: Textbook of Medical Physiology. Editorial Elsevier-Saunders; 2005 ; Páginas 451-456 Filadelphia, EEUU; Impreso en China. ISBN 0-7216-0240-1 Becton, Dickinson & Co. : BD Vacutainer Evacuated Blood Collection System for in-vitro Diagnostic Use. Guía electrónica y en inglés para el correcto procedimiento de venopunción usando el producto ya mencionado. Formato PDF Becton, Dickinson & Co. ; Franklin Lakes, Nueva Jersey, EE.UU. 2008 ; Revisado 23/Mayo/2010 Disponible en: http://www.bd.com/vacutainer/pdfs/blood_collection_tubes_product_insert_VDP40035.pdf Dos Santos, Dr.Alisson: Serología de Grupos Sanguíneos Bitácora de consulta profesional a un médico Consultor de Inmunohematología. Formato PDF Revisado 23/Mayo/2010 Disponible en: http://marianademaio.org/consulta%20al%20experto/27.pdf University of Utah: School of Medicine : Phlebotomy Guía electrónica y en inglés para el correcto procedimiento de extracción de sangre. University of Utah ; Revisado 23/Mayo/2010 Disponible en: http://library.med.utah.edu/WebPath/TUTORIAL/PHLEB/PHLEB.html

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