Ingeniería genética - Buscando una diana para el tratamiento de la aterosclerosis
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Protocolo de experimento que permite a los estudiantes llevar a cabo una transformación bacteriana en el laboratorio. El protocolo se centra en una línea de investigación sobre el estudio de una ...

Protocolo de experimento que permite a los estudiantes llevar a cabo una transformación bacteriana en el laboratorio. El protocolo se centra en una línea de investigación sobre el estudio de una potencial diana terapéutica que podría ser reconocida por un fármaco para la aterosclerosis. Este protocolo es una oportunidad para museos de la ciencia y escuelas de replicar un experimento que se está realizando en laboratorios reales para investigar nuevos fármacos.

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Ingeniería genética - Buscando una diana para el tratamiento de la aterosclerosis Presentation Transcript

  • 1. Ingeniería genéticaBuscando una diana para el tratamientode la aterosclerosis
  • 2. FACTORES DE RIESGOEl consumo de alimentos con un alto contenido en grasas saturadas y la vidasedentaria incrementan el riesgo de padecer enfermedades cardiovasculares comola aterosclerosis.
  • 3. ¿QUÉ ES LA ATEROSCLEROSIS?Es un trastorno vascular causado por la acumulación de grasas en las paredes delos vasos sanguíneos que puede dar lugar a manifestaciones muy diversas y degravedad variable.Arteria normalAterosclerosismediaAterosclerosis severa Formación de placas de ateroma que obstruyen el flujo sanguíneo.
  • 4. EL COLESTEROL "MALO" O LDL• El exceso de colesterol en la dieta hace que éste se almacene en forma degrasa o bien que continúe circulando por la sangre en una forma llamada LDL(low-density-lipoprotein, lipoproteína de baja densidad) o más comúnmente"colesterol malo".• Uno de los componentes de la placa de ateroma es el LDL.
  • 5. SEGÚN LA ORGANIZACIÓN MUNDIAL DE LA SALUD (OMS)•Aunque los ataques cardíacos y los accidentes cerebrovasculares son lasprincipales causas de muerte en todas partes del mundo, el 80% de las muertesprematuras debidas a estas causas se podrían evitar mediante el control de losprincipales factores de riesgo•Se estima que, cada año, 17 millones de personas mueren en todo el mundode enfermedades cardiovasculares (ECV), en particular de ataques cardíacos yaccidentes cerebrovasculares.•Las ECV afectan casi por igual a hombres y mujeres.•Son la principal causa de muerte, tanto en los países en desarrollo como en lospaíses desarrollados.
  • 6. LOS MACRÓFAGOS, UN "SISTEMA DE LIMPIEZA"• Los macrófagos actúan como un sistema de "limpieza" para evitar que elcolesterol se deposite en las paredes.• Este sistema de limpieza es eficiente si el exceso de colesterol no es muy grande. LDL Macrófago LDL oxidado Oxidación de LDL
  • 7. ¿CÓMO SE FORMA LA PLACA DE ATEROMA? ProliferaciónSi las cantidades de colesterol son muy de células endotelialesabundantes: Activación del sistema inmunitario Los macrófagos continúan recogiendo LDL Célula Pero, una vez han engullido grandes cantidades, se espumosa transforman en unas células llamadas "espumosas" LDL Macrófago Éstas inducen la inflamación y la proliferación de células de la pared arterial LDL oxidado Oxidación de LDL Formación de la placa de ateroma
  • 8. INVESTIGACIÓN EN ATEROSCLEROSISUno de los objetivos es:Entender cómo los macrófagos participan en la regulación de los niveles de colesterol y cuál es su rol en eldesarrollo de la aterosclerosis. ?
  • 9. ESTUDIO DEL RECEPTOR DE LDL Y MYLIPSabemos que los macrófagos reconocen el LDL oxidado gracias a unos receptores.Sabemos que una proteína de los macrófagos llamada MYLIP degrada el receptorde LDL. Macrófago Receptor de LDL LDL oxidado Si los macrófagos producen MYLIP en grandes cantidades, la ingestión de Oxidación de LDL colesterol disminuye.
  • 10. MYLIP, UNA POSIBLE DIANA TERAPÉUTICALos científicos están estudiando a fondo esta proteína MYLIP porque piensan queun fármaco podría regularla y evitar que los macrófagos disminuyan la ingestión deLDL. Macrófago Diana terapéutica LDL oxidado Oxidación de LDL
  • 11. ¿COMO PODEMOS ESTUDIAR LAS PROTEÍNAS?• Se necesitan grandes cantidades de unaproteína para poder estudiar su función.• Una de las herramientas de la biologíamolecular que nos permite estudiar lasproteínas es la ingeniería genética.• La ingeniería genética es la tecnología dela manipulación y transferencia de ADN deun organismo a otro.
  • 12. PRIMERO CLONAMOS EL GEN DE LA PROTEÍNADE INTERÉS: MYLIP Lo insertamos en un Célula humana ADN Gen MYLIP fragmento de ADN circular llamado plásmido
  • 13. REALIZAMOS UNA TRANSFORMACIÓN BACTERIANA CON ELGEN DE LA PROTEÍNA DE INTERÉS: MYLIP1. Transformación 2. Selección de bacterias 3. Crecimiento bacterianobacteriana transformadas
  • 14. AISLAMOS EL GEN DE LA PROTEÍNA MYLIP Y LOINTRODUCIMOS EN CÉLULAS PARA QUE LA PRODUZCAN proteína MYLIP 3.Crecimiento 4. Aislamos 5. Producción bacteriano el ADN de la proteína (introduciendo el ADN en células eucariotas)
  • 15. ¿CÓMO REALIZAMOS LA TRANSFORMACIÓN BACTERIANA? Con cambios drásticos de ? temperatura y añadiendo cationes facilitamos la entrada del ADN en forma de plásmido
  • 16. ¿CÓMO NOS ASEGURAMOS QUE CRECEN BACTERIASTRANSFORMADAS? ? Gen deEl plásmido contiene un resistencia al antibióticogen de resistencia a unantibiótico
  • 17. ¿CÓMO NOS ASEGURAMOS QUE CRECEN BACTERIASTRANSFORMADAS?
  • 18. ¿CÓMO AISLAMOS EL ADN PLASMÍDICO DEL CULTIVOBACTERIANO? ?Haciendo una Mini-prep: SOLUCIÓN 2 SOLUCIÓN 3Mediante diferentes disolventes y centrifugaciones iremos descartando losdiferentes componentes
  • 19. ¡CON EL ADN AISLADO YA PODREMOS SEGUIR LAINVESTIGACIÓN! 5. Producción de la proteína (introduciendo el ADN en células eucariotas) 6. Una vez que los científicos obtienen la proteína ya pueden: • estudiar su función en la regulación del colesterol • buscar nuevos fármacos para la aterosclerosis.
  • 20. ¡Ponte la bata! ¡¡Tú también puedes ser investigador/ a!!Investigadores que han contribuido con contenidos: Theresa León, Jonathan Matalonga,Universidad de BarcelonaAUTOR FINANCIADO POR: MIEMBROS DEL CONSORCIO: Esta obra está bajo una licencia Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Unported de Creative Commons. Para ver una copia de esta licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/