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Dosificación del sistema del complemento y su importancia en patología autoinmune
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Dosificación del sistema del complemento y su importancia en patología autoinmune

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  • 1. DOSIFICACIÓN DEL COMPLEMENTO. IMPORTANCIA EN PATOLOGÍA AUTOINMUNE Por: Sofía Jaramillo Q.
  • 2. OBJETIVOS GENERALES: ESPECÍFICOS: • Identificar la relación de las concentraciones plasmáticas de los componentes del sistema del complemento con patologías de etiología autoinmune. • Conocer los procesos de evaluación sérica del complemento. • Vincular su papel en la génesis de diversas patologías.
  • 3. CONOCIMIENTOS PREVIOS • Sistema del Complemento: concepto, constituyentes, funciones, importancia. • Concepto y variedades de inmunocomplejos. • Concepto de Patología Autoinmune.
  • 4. COMPONENTES Pp. Vía Clásica y del MAC Pp. Vía Alternativa (Factores) Pp. Reguladoras Receptores del Complemento
  • 5. UTILIDAD MÉDICA Orientación diagnóstica en procesos mediados por inmunocomplejos Valoración de la actividad de enfermedades por inmunocomplejos • ↓Inmunocomplejos=Consumo del complemento Interpretación en el contexto de la situación clínica del pcte. ÍNDICE CATABÓLICO: 2% Déficit en los componentes iniciales de la Vía Clásica (C1, C4, C2) en asociación con Enfermedades Autoinmunes
  • 6. CONSIDERACIONES SOBRE LOS RESULTADOS • Índice Catabólico: 2% • Algunas de las proteínas que conforman el sistema del complemento fungen como Reactantes de Fase Aguda. • Función diversa en los diferentes compartimentos corporales. • ↓ del nivel del complemento avala la sospecha de su participación en daño tisular, mas no lo prueba. • Nivel normal del complemento no excluye su participación en injuria tisular. • ↓ de los componentes de una vía hacen presumir que ésta se encuentra activada y media la agresión (no se requiere conocer los niveles de todos los componentes).
  • 7. MEDICIÓN DE LOS FACTORES DEL COMPLEMENTO A. Inmunoquímico (Búsqueda como Ag) RID Nefelometría Valoración Funcional Características: Altamente específicos Fáciles de realizar (suero o plasma) Vías Procedimientos: Vía Clásica Vía Alternativa Menor costo y tiempo No determinan funcionalidad No detectan niveles bajos (desde 10µg/ml) TEST CH50 (Actividad Hemolítica Total) Actividad Funcional Aislada Productos de Degradación ELISA (10-20ng/ml) Ac. Monoclonales
  • 8. NIVELES DE COMPLEMENTO MEDIANTE ENSAYOS ANTIGÉNICOS: VÍA CLÁSICA Y ALTERNATIVA • Materiales: – Muestra de suero o plasma a <(-20°C) – Suero proteico estándar (estabiliza) – Equipos de RID • Procesamiento: – RID: • Tca. Mancini (exceso de Ac., más exacto) • Tca. Fahey (no exceso de Ac.)
  • 9. VALORACIÓN FUNCIONAL: VÍA CLÁSICA (CH50) Y ACTIVIDAD AISLADA • Materiales: – – – – Eritrocitos de oveja (sensibles, Ag. Forssman para Ac. De conejo) Sol. De Alserver Buffer (barbital) Ac. Anti Forssman • Procesamiento: – – – – – – – – – – Extracción aséptica, solución de Alserver. Conservación hasta 6 semanas a 4°C. Centrifugación a 4°C, se descarta sobrenadante y capa leucocitaria. G. rojos en buffer, se lavan y sensibilizan con Ac. Disoluciones de suero del pcte. Unir muestra de EA Incubar a 37°C durante 1h. Agitando c/15’. Colocar en hielo + Barbital. Centrifugar 5’ a 800rpm, sobrenadante medir en espectrofotómetro a 540nm. Elaborar curva.
  • 10. VALORACIÓN FUNCIONAL: VÍA ALTERNATIVA (AH50) • Materiales: – Suero humano (dilución 1:5) – Eritrocitos de conejo (EDTA+iones de Mg+2) Título (CH50/AH50)= dilución final de suero humano que lisa el 50% de los eritrocitos de oveja/conejo.
  • 11. INTERPRETACIÓN CH50: Determinar ausencia de cualquiera de las partes del complemento, excepto C9. AH50 ineficiente: ↓ o ausencia de la properdina.
  • 12. PRUEBA DE FIJACIÓN DEL COMPLEMENTO Capacidad del complemento de interaccionar con los complejos Ag-Ac. • Materiales: – Suero del paciente – Antígeno (soluble o particulado) – EA (eritrocitos de oveja sensibilizados) • Procesamiento: – Incubación de suero con 3-5 unidades CH50 • Positiva: Fijación (complemento es consumido) – Agregar EA – Incubación a 37°C por 1h. O toda la noche en frío (títulos mayores) • Positiva: No lisis • Negativa: Lisis
  • 13. CONDICIONES TÉCNICAS pH Temperatura Tiempo Ionicidad Concentración de iones Ca+2 y Mg+2 Fragilidad osmótica de los eritrocitos utilizados
  • 14. VALORES REFERENCIALES VÍA PROTEÍNA µg/ml VÍA CLÁSICA C1q C1r C1s C4 C2 80 50 50 600 20 VÍA ALTERNATIVA Factor B Factor D Properdín 250 5 25 VÍA DE LAS LECTINAS MBL C4 C2 1 600 20 VÍA COMÚN C3 C5 C6 C7 C8 C9 1300 80 75 55 55 59
  • 15. VALORES REFERENCIALES • Nivel total del complemento en sangre: 41 a 90 unidades hemolíticas (CH50). • Nivel de C1: 16 a 33 mg/dL. • Niveles de C3: – hombres: 88 a 252 mg/dL. – mujeres: 88 a 206 mg/dL. • Niveles de C4: – hombres: 12 a 72 mg/dL. – mujeres: 13 a 75 mg/dL.
  • 16. ACTIVACIÓN (CONSUMO) PATOLÓGICO DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO Ac. Anormal Complejo Inmune Material Extraño Neoantígeno del Sistema del Complemento (MAC)
  • 17. DISMINUCIÓN DEL COMPLEMENTO PRIMARIA O CONGÉNITA • • • • • • LES Angioedema hereditario Fiebre mediterránea familiar Vasculitis por urticaria GMN Inmunodeficiencia combinada grave • Hipogammaglobulinemia ligada al sexo • Infecciones recurrentes SECUNDARIA O ADQUIRIDA • Enfermedades asociadas a Artritis • Enfermedades asociadas a vasculitis • Enfermedades asociadas a nefritis
  • 18. DISMINUCIÓN DEL COMPLEMENTO: PUNTUALIZACIONES ↓C1q: Aclaramiento inadecuado de células apoptósicas ↓C4 o CR1/CR2: Fallo en la selección negativa de LB ↓C3 y C4: LES (monitorización)
  • 19. PATOLOGÍAS CON VINCULACIÓN DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO ↓ Primaria o Congénita • • • • • • LES Angioedema hereditario Fiebre mediterránea familiar Vasculitis por urticaria GMN Inmunodeficiencia combinada grave • Hipogammaglobulinemia ligada al sexo • Infecciones recurrentes ↓Secundaria o Adquirida • Enfermedades asociadas a artritis • Enfermedades asociadas a vasculitis • Enfermedades asociadas a nefritis
  • 20. AVERIGUAR: • ¿Qué es el LES? • ¿Qué otros exámenes de laboratorio ayudan en su diagnóstico?
  • 21. BIBLIOGRAFÍA • Balcells, A.; Soriano, M. La Clínica y el Laboratorio. 9na. Edición. Editorial Marín. Barcelona – España. 1973. • Henry, B.; et all. Laboratorio en el Diagnóstico Clínico. Editorial Marbán Libros. Madrid – España. 2010. • Kindt, T.; Goldsby, R.; Osborne, B. Inmunología de Kuby. VI Edición. Editorial Mc Graw-Hill. México D.F.-México. 2007. • Prieto, J. Yuste, J. La Clínica y El Laboratorio Balcells. 21era. Edición. Editorial Elsevier Masson. Barcelona – España. 2010. • Regueiro J., López C., González S., Martínez E. Inmunología. IV Edición Revisada. Ed. Médica Panamericana. Madrid - España. 2012. • Rojas, W., Anaya J., Aristizábal B., Cano L., Gómez L., Lopera D. Inmunología de Rojas. XV Edición. Corporación para las Investigaciones Biológicas. Medellín – Colombia. 2010.

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