Este documento proporciona una lista de los componentes necesarios para realizar una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para amplificar las regiones ITS del ADN de hongos utilizando cebadores universales. Incluye 1 μl de muestra de ADN, 77 μl de agua bidestilada estéril, 10 μl de buffer 10X, 6 μl de MgCl2, 4 μl de mezcla de dNTPs, 0.5 μl de cada cebador ITS1 e ITS4, 1 μl de Taq DNA polimerasa, para un volumen final de reacción

2. Muestra de ADN
Agua bidestilada estéril, o deionizada
10X buffer
MgCl2
*dNTPs
**ITS1
**ITS4
Taq DNA polymerase
Volumen final:
1 µl
77 µl
10 µl
6 µl
4 µl
0.5 µl
0.5 µl
1 µl
100 µl
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3. Cuadro 1. Primers Universales para amplificar las regiones ITS
Primer
Secuencia (5’  3’)
ITS1
ITS4
ITS5
TCCGTAGGTGAACCTGCGG
TCCTCCGCTTATTGATATGC
GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG
No. de
Nucleótidos
19
20
22
Tm C
65
58
63