Karina Bulak - “Biotecnología al alcance del productor” - Boas Práticas Agropecuárias e Produção Integrada - De 11 a 14 de novembro de 2014, em Foz do Iguaçu/PR.

1. Proyecto:
Técnica en Biotecnología Vegetal Karina Bulak

2. Biotecnología al alcance del productor

3. A qué nos dedicamos?

4. Surge en respuesta a problemática actual
Aumento de plagas
Aumento de producción agrícola
Producción en monocultivos
Uso desmedido de agroquímicos

5. Búsqueda de una solución??
Aumento de plagas
Agroquímicos
Disminución espectacular de población de la plaga
Graves daños a salud y medio ambiente
Generación de resistencia
Eliminación enemigos naturales

6. Mayor preocupación por el medio ambiente
Necesidad de disminuir contaminación
Deseo de consumir alimentos sin residuos de agroquímicos- Agricultura orgánica
Demanda en incremento
La demanda de productos biológicos para el sector agro- forestal se ha incrementado en los últimos años.
Cambio socio-cultural

7. Interacción
Organismos antagonistas
Organismos plagas
Control Biológico

8. Control Biológico de Enfermedades
Encontrado naturalmente en suelo
Alta capacidad reproductiva
Rápido crecimiento
Capacidad de sobrevivir en condiciones desfavorables
Promotor del crecimiento vegetal
Promotor de mecanismos de defensa vegetal
Alta agresividad contra fitopatógenos
TRICHODERMA SP

9. Trichoderma sp.-Mecanismos de acción
Competencia: por espacio y nutrientes
Parasitismo
Antibiosis:
-Producción de antibióticos
- Producción de enzimas que degradan pared celular de patógenos
- Desactivación de enzimas de patógenos

10. Control Biológico de Insectos
•Inducen enfermedad al huésped
Microorganismos
•Cazan y consumen diferentes tipos de presas
Depredadores
•Necesitan de un organismo particular para completar su desarrollo
Parasitoides
Entomopatógenos
Entomófagos

11. Hongos
Actúan por contacto
Beauveria sp.
Metarrhizium sp.
Lecanicillium sp.
Isaria sp.
Hirsutella sp.
otros
Bacterias
Actúan por ingestión
Bacillus thuringiensis
B. sphaericus
Otros
Virus
Nemátodos
Protozoos
Control Biológico de Insectos: Entomopatógenos

12. Desarrollo de un hongo entompatógeno
Adhesión
Germinación
Penetración
Multiplicación
Producción de toxinas
Muerte del insecto
Colonización total
Emergencia del hongo, esporulación y diseminación

13. Uso de agentes de control biológico
Ventajas
Sin efectos colaterales hacia el hombre y al medio ambiente
Evita plagas secundarias
El fenómeno de resistencia es muy raro
Relación costo/beneficio favorable
Desventajas
Supresión de la plaga no inmediata

14. Solución a un problema
Producción rural basado en pequeñas unidades productivas
Sustentado en trabajo familiar
Uso descontrolado de agroquímicos
Desconocimiento de riesgos
Exposición a temprana edad
Contaminación ambiental
Falta de capacitación
Misiones
Disminución de rendimiento
Aumento de costos
NO
SI

15. Mapa de procesos: Proyecto Bioinsumos
Relevamiento problemática de cultivos prioritarios de la región
•Caña de azucar
•Stevia
•Forestales
•Banano
•Tabaco
•Ananá
•Hortalizas
•Citrus
•Yerba mate y té
•Mandioca
Problemas de sanidad
Fertilidad baja de suelos

16. Relevamiento problemática de cultivos prioritarios de la región
Definición de productos a desarrollar
Manejo de enfermedades
Manejo de plagas
Silaje
Promotores crecimiento
BIOFUNGICIDA
BIOINSECTICIDA
BIOFERTILIZANTE
INOCULANTE
Trichoderma
Cebo biológico
Beauveria-Metarhizium-Isaria Lactobacillus
Bacterias PGPR
Mapa de procesos: Proyecto Bioinsumos

17. Relevamiento problemática de cultivos prioritarios de la región
Definición de productos a desarrollar
Aislamiento microorganismos- Formación cepario
Pruebas de efectividad in vitro
Selección de cepas
Formulación, escalado y producción
Pruebas de efectividad a campo
Transferencia al sector productivo
Mapa de procesos: Proyecto Bioinsumos

18. Aislamiento microorganismos
Suelo
Órganos vegetales para aislamiento de fitopatógenos
Insectos parasitados
Método de dilución en placa
Siembra directa en medio de cultivo
Cámara húmeda
Cámara húmeda
Siembra directa en medio de cultivo
HONGOS

19. •73
Trichoderma
•17
•12 reactivadas
Beauveria
•3
•1 reactivada
Metarhizium
•3
Lecanicillium
•5
Isaria
•159
Otros

20. Relevamiento problemática de cultivos prioritarios de la región
Definición de productos a desarrollar
Aislamiento microorganismos- Formación cepario
Pruebas de efectividad in vitro
Selección de cepas
Formulación, escalado y producción
Pruebas de efectividad a campo
Transferencia al sector productivo
Mapa de procesos: Proyecto Bioinsumos

21. Pruebas efectividad in vitro
Evaluación actividad biofungicida
Ensayos de antagonismo
Botrytis
Alternaria
Fusarium
Phytium
Phytophtora
Cylindrocladium
Pestalotia
Evaluación capacidad infectiva sobre insectos
Ensayos de mortalidad
Atta sp.
Acromyrmex sp.

22. Ejemplo Ensayo de Antagonismo contra Alternaria sp.
Cepa de Tricho
PICR (dia 3)
Bell
04-02
40
1
03-01
44
1
20-04
48
1
31-01
56
1
Prof-4
48
1
control

23. Relevamiento problemática de cultivos prioritarios de la región
Definición de productos a desarrollar
Aislamiento microorganismos- Formación cepario
Pruebas de efectividad in vitro
Selección de cepas
Formulación, escalado y producción
Pruebas de efectividad a campo
Transferencia al sector productivo
Mapa de procesos: Proyecto Bioinsumos

24. Selección de cepas
•16-02
•146-01
•172-01
•171-21
•171-19
Trichoderma
•10-01 G3
•158-01 H1
•84-01 H2
Beauveria
•100-01 H1
Metarhizium
•59-01
Isaria
•80-01
•195-01
Lecanicillium

25. Relevamiento problemática de cultivos prioritarios de la región
Definición de productos a desarrollar
Aislamiento microorganismos- Formación cepario
Pruebas de efectividad in vitro
Selección de cepas
Formulación, escalado y producción
Pruebas de efectividad a campo
Transferencia al sector productivo
Mapa de procesos: Proyecto Bioinsumos

26. Multiplicación: Cultivo bifásico de hongos
Multiplicación en cultivo líquido
Multiplicación en sustrato sólido
Micelio
Esporas

27. Multiplicación de Cepas Seleccionadas
Cultivo líquido
•Medio de cultivo
•Tiempo de incubación
•Fomato de inóculo inicial: suspensión de esporas o tacos
•Volumen inicial de inóculo y de medio
Multiplicación sólida
•Tipo de sustrato y preparación del mismo
•Tipo de bolsa
•Formato de cierre de bolsa
•Colocación de bolsa en estante
Secado de bolsa
•Tiempo de secado
•Temperatura
•Capacidad efectiva de la secadora
Puesta a punto de:

28. Relevamiento problemática de cultivos prioritarios de la región
Definición de productos a desarrollar
Aislamiento microorganismos- Formación cepario
Pruebas de efectividad in vitro
Selección de cepas
Formulación, escalado y producción
Pruebas de efectividad a campo
Transferencia al sector productivo
Mapa de procesos: Proyecto Bioinsumos

29. PRUEBAS EFECTIVIDAD A CAMPO
Bioestimulante de cultivos: Trichoderma sp (cepas 16- 02; 146-02 y 172-01).
Ensayo con productoras del SACRA
3 productoras: P1, P2 y P3
Cultivos: lechuga y acelga
Tratamientos: 1) Aplicación de un mix de esporas de Trichoderma spp. (Cepas 16-02, 171-21 y 146-01) a una concentración de 10E+6 esporas/cm3 de sustrato y 2) Control. Tres repeticiones por tratamiento, estando conformada la unidad experimental por 40 semillas.
Parámetros analizados: -longitud raíz principal en centímetros (LRP) -número de hojas (NH), -peso seco aéreo en gramos (PSA) -peso seco radicular en gramos (PSR)

30. Ensayo Parámetro crecimiento Sustrato con Trichoderma Control % incremento p-valor
P1
LRP
6,74
6,36
NS
0,95…
NH
4,77
4,71
NS
0,79…
PSA
0,0904
a
0,0591
b
52,96
0,0027
PSR
0,0284
0,0201
NS
0,15…
P2
LRP
4,12
3,88
NS
0,54…
NH
2,66
2,46
NS
0,14…
PSA
0,0546
0,0471
NS
0,28…
PSR
0,0433
a
0,0224
b
93,30
0,0036
P3
LRP
4,04
3,51
NS
0,27…
NH
6,41
a
3,73
b
71,84
0,0000…
PSA
0,1539
a
0,0945
b
62,85
0,0024
PSR
0,0382
a
0,0257
b
48,63
0,0192
Valores medios de longitud de raíz principal (LRP), número de hojas (NH), peso seco aéreo (PSA) y peso seco radicular (PSR) de los plantines de acelga para cada tratamiento en los tres lotes hortícolas ensayados (P1, P2, P3). NS= no significativo. Letras diferentes por fila indica presencia de diferencias significativas (LSD, p  0,05).
Ensayo con productoras del SACRA
Almácigo: Resultados en acelga

31. Ensayo Parámetro crecimiento Sustrato con Trichoderma Control % incremento p-valor
P1
LRP
4,73
4,64
NS
0,64…
NH
4,13
4,46
NS
0,21…
PSA
0,0704
0,0803
NS
0,39…
PSR
0,0326
0,0355
NS
0,53…
P2
LRP
4,82
4,48
NS
0,088..
NH
3,6
3,46
NS
0,60…
PSA
0,0416
0,0500
NS
0,12…
PSR
0,0202
a
0,0126
b
60,31
0,0139
Valores medios de longitud de raíz principal (LRP), número de hojas (NH), peso seco aéreo (PSA) y peso seco radicular (PSR) de los plantines de lechuga para cada tratamiento en los lotes hortícolas ensayados (P1 y P2). NS= no significativo. Letras diferentes por fila indica presencia de diferencias significativas (LSD, p  0,05).
Ensayo con productoras del SACRA
Almácigo: Resultados en lechuga

32. Pruebas de germinación
Evaluación efecto sobre germinación de semillas en instalaciones de BIOMISA
Bioestimulante de cultivos: Trichoderma sp (cepas 16- 02; 146-02 y 172-01).
Cultivos: lechuga var. Brisa; lechuga var. Gran rapids; achicoria, coliflor, perejil
Tratamientos: 1) Aplicación de un mix de esporas de Trichoderma spp. (Cepas 16-02, 171-21 y 146-01) a una concentración de 10E+6 esporas/cm3 de sustrato 7 dias previo a la siembra; 2) Reinoculación del mix de Trichoderma durante el momento de la siembra; 3) Control. Tres repeticiones por tratamiento, estando conformada la unidad experimental por 16 semillas.
Parámetros analizados: -Índice de velocidad de germinación (Índice de Maguire- IVG) -Porcentaje de germinación a los 7 días -Porcentaje de germinación a los 15 días

33. Evaluación efecto sobre germinación de semillas en instalaciones de BIOMISA
Achicoria
IVG
%G dia 7
%G dia 15
Control
5,14
b
41,67
b
75
T1
7,82
a
89,58
a
89,58
T2
6,55
ab
72,92
a
77,08
p-valor
0,1
0,0323
0,3159 (ns)
Coliflor
IVG
%G dia 7
%G dia 15
Control
6,87
70,83
85,41
T1
7,95
89,58
91,67
T2
8,27
91,66
95,83
p-valor
0,1889 (ns)
0,1489 (ns)
0,3171 (ns)
Perejil
IVG
%G dia 7
%G dia 15
Control
0,47
b
0
37,5
T1
0,63
a
0
37,5
T2
0,71
a
0
37,5
p-valor
0,028
0,999 (ns)
0,999 (ns)
Lechuga var. Brisa
IVG
%G dia 7
%G dia 15
Control
6,26
b
43,75
b
91,66
a
T1
7,99
a
79,16
a
97,91
a
T2
0,09
c
0
c
2,08
b
p-valor
0
0,0001
0
Lechuga var. Gran Rapids
IVG
%G dia 7
%G dia 15
Control
6,2
62,5
84,37
T1
6,74
60,41
79,17
T2
7,91
85,41
93,75
p-valor
0,4043 (ns)
0,1901 (ns)
0,7104 (ns)
Se vio un incremento en la velocidad de germinación en semillas de perejil, achicoria y lechuga variedad brisa cuando fueron tratadas con la suspensión de esporas de Trichoderma.

34. PRUEBAS EFECTIVIDAD A CAMPO
Bioinsecticida: Beauveria sp. (cepa 10-01)
Control del picudo negro del banano: Ensayo con técnicos del CEDEVA Formosa
0
2
4
6
8
10
12
14
Cantidad promedio de picudos por trampa , con y sin aplicación del hongo entomopatógeno
CH
SH

35. 0
272
131
76
111
171
124
108
126
217
319
0
296
181
157
182
218
206
158
203
337
414
0
50
100
150
200
250
300
350
400
450
9
10
11
12
1
2
3
4
5
6
7
2012
2013
Con hongo
Sin hongo
Control del picudo negro del banano: Ensayo con técnicos del CEDEVA Formosa
Bioinsecticida: Beauveria sp. (cepa 10-01)

36. Conclusiones
La implementación de los productos biológicos deberá venir de la mano de una concientización masiva y de la definición de buenas practicas agrícolas necesarias para controlar íntegramente los insectos y enfermedades ms comunes en los cultivos de la región. Los bioinsumos no buscan reemplazar los productos químicos sino complementarlas. Se buscar actuar sobre la planta de una manera preventiva protegiéndola del stress biótico sin necesidad de recurrir a un agente químico.

37. Conclusiones
Se puede decir que la Biofábrica Misiones ha dado el primer paso, en busca de la disminución del uso de agroquímicos en la provincia de Misiones. Un primer paso en la búsqueda de una solución para un problema real con alcances sociales y ambientales.

38. MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIÓN.
+ 54 3764 483 244
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