Microscopia

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Microscopia

  1. 1. Microscopia Prof(a): Nyara Marques
  2. 2. MICROSCOPIA <ul><li>Ciência que estuda os métodos e as aplicações em que se usa o Microscópio para observação de objectos, ou pormenores de objectos, com dimensões inferiores ao limite de resolução do olho humano (0,1 mm). </li></ul>
  3. 3. Classificação dos Microscópios em função do número de sistemas de lentes: <ul><li>Microscópio simples ou Lupa – apenas possui uma lente ou um sistema de lentes centradas; </li></ul><ul><li>Microscópio composto – possui dois sistemas de lentes centradas, ocular e objectiva, para produzir uma imagem ampliada </li></ul>
  4. 4. Classificação dos Microscópios compostos em função do princípio de iluminação que utiliza <ul><li>Fotónico – em que o responsável pela transmissão de imagem é um feixe de fotons (luz visível, ultravioleta ou infra-vermelho). </li></ul><ul><li>Electrónico – emprega um feixe de electrons para produzir imagens ampliadas. </li></ul>
  5. 5. A História do Microscópio
  6. 6. <ul><li>Robert Hooke, estudioso inglês, foi o primeiro (em 1665) a observar células. Para tal valeu-se de um rudimentar microscópio, idealizado anos antes por um outro estudioso, Anthony Van Leeuwenhoeck. </li></ul><ul><li>Hooke observou cortes finos de cortiça, que se apresentavam ao microscópio com um aspecto similar a pequenos favos de mel empilhados. A cada um destes favos Hooke atribuiu a designação de cellulae (células). </li></ul>
  7. 7. <ul><li>A história do microscópio óptico começa na antiguidade clássica, com a lente de aumento simples, e apresenta um “renascimento” no séc. XVII. </li></ul>
  8. 8. <ul><li>Cerca de dez anos mais tarde o próprio Leeuwenhoeck observou pequenos seres vivos, que designou por “protozoários”, aos quais mais tarde foi dada a designação de bactérias. </li></ul>
  9. 9. <ul><li>Assim, à medida que se dava a evolução do microscópio óptico, também o conhecimento da constituição dos diferentes organismos ia evoluindo. </li></ul><ul><li>A ciência atravessava uma fase de grande desenvolvimento, que viria a culminar no séc. XIX. </li></ul><ul><li>Durante todo este período a preocupação dos homens da ciência centrava-se não só no aperfeiçoamento dos sistemas ópticos, mas também na evolução das técnicas inerentes à preparação do material para observação. </li></ul>
  10. 10. <ul><li>Em meados do nosso século, o aparecimento do microscópio electrónico e, mais recentemente, do microscópio confocal laser, associados a sistemas computadorizados de análise de imagem, contribuíram para o avanço da biologia celular e molecular, continuando assim o conhecimento iniciado por Hooke. </li></ul><ul><li>Adaptado de Gonçalves et al, 2002 </li></ul>
  11. 11. MOC – Microscópio Óptico Composto MET – Microscópio Electrónico de Transmissão
  12. 12. MOC Microscópio Óptico Composto
  13. 13. Microscópio Óptico <ul><li>O Microscópio Óptico e os seus constituintes: </li></ul><ul><ul><ul><ul><ul><li>Parte Mecânica; </li></ul></ul></ul></ul></ul><ul><ul><ul><ul><ul><li>Parte Óptica. </li></ul></ul></ul></ul></ul>
  14. 14. Microscópio Óptico <ul><li>Parte Mecânica </li></ul><ul><li>Pé ou Base </li></ul><ul><li>Braço ou coluna </li></ul><ul><li>Platina </li></ul><ul><li>Tubo ou canhão </li></ul><ul><li>Revólver ou Porta-objectivas </li></ul><ul><li>Parafuso Macrométrico </li></ul><ul><li>Parafuso Micrométrico </li></ul>
  15. 15. Microscópio Óptico <ul><li>Parte Óptica </li></ul><ul><li>Sistema de iluminação: </li></ul><ul><ul><li>Espelho ou lâmpada </li></ul></ul><ul><ul><li>Condensador </li></ul></ul><ul><ul><li>Diafragma </li></ul></ul><ul><li>Sistema de ampliação : </li></ul><ul><ul><li>Ocular </li></ul></ul><ul><ul><li>Objectivas </li></ul></ul><ul><ul><li>Objectivas de imersão </li></ul></ul>
  16. 17. Oculares Ampliam a imagem fornecida pelo sistema de objectivas.
  17. 18. Canhão ou tubo Serve de suporte ao sistema ocular
  18. 19. Braço Serve de suporte à platina e ao revólver.
  19. 20. Revólver Serve de suporte às objectivas e permite a sua mudança.
  20. 21. Objectivas Amplia a imagem do objecto que está a ser observado.
  21. 22. Platina Serve de suporte à preparação a observar. Tem uma abertura na pane central (janela da platina).
  22. 23. Condensador Distribui regularmente no campo da preparação a luz que atravessa o diafragma
  23. 24. Diafragma <ul><li>Regula a intensidade da luz captada pelo espelho e que incide na preparação. </li></ul>
  24. 25. Fonte de Luz
  25. 26. Parafusos Macrométrico e Micrométrico Permite movimentos (de maior ou menor amplitude) de aproximação ou afastamento entre a preparação e as objectivas.
  26. 27. Base ou pé Constitui a base de suporte de todos os elementos do microscópio.
  27. 29. Cuidados Gerais na Utilização do MOC :
  28. 30. <ul><ul><li>Na mesa apenas deverá permanecer o material estritamente necessário; </li></ul></ul><ul><ul><li>Antes de pegar na caixa do microscópio, verifica sempre que está fechada; </li></ul></ul><ul><ul><li>Transporta sempre o microscópio com ambas as mãos, apoiando uma sobre a base e com a outra a segurar o braço; </li></ul></ul><ul><ul><li>Coloca o microscópio na mesa afastado do bordo; </li></ul></ul><ul><ul><li>Não mexer nas objectivas e ocular com os dedos; </li></ul></ul>
  29. 31. <ul><li>Cuidados Gerais na Utilização do MOC : </li></ul><ul><ul><li>As lentes devem ser limpas com pincel ou papel apropriado ou com um pano de limpeza macio; </li></ul></ul><ul><ul><li>A objectiva de imersão, quando utilizada, deve ser limpa com um pano embebido em xilol; </li></ul></ul><ul><ul><li>Evita molhar o microscópio; </li></ul></ul><ul><ul><li>Antes de arrumar, verifica que a objectiva de menor ampliação está no prolongamento do tubo. </li></ul></ul>
  30. 32. Microscópio Óptico
  31. 33. Microscópio Óptico <ul><li>Manuseamento do MOC : </li></ul><ul><ul><li>Iluminação: </li></ul></ul><ul><ul><li>Antes de iniciar qualquer observação é necessário proceder à iluminação do campo microscópico; </li></ul></ul><ul><ul><li>Verifica se a objectiva de menor poder ampliador está em posição de observação; </li></ul></ul><ul><ul><li>Verifica se o diafragma está completamente aberto e se o condensador está completamente subido; </li></ul></ul>
  32. 34. Microscópio Óptico <ul><li>Manuseamento do MOC : </li></ul><ul><ul><li>Iluminação: </li></ul></ul><ul><ul><li>Se o microscópio tiver uma fonte de iluminação própria liga-a. (se não utiliza o espelho – face côncava para a luz artificial e face lisa para luz natural. Orienta o espelho de modo a que o campo do microscópico fique completamente iluminado.) </li></ul></ul>
  33. 35. <ul><li>Ordem de utilização das objectivas: </li></ul><ul><ul><li>A observação inicia-se com a objectiva de menor ampliação ; </li></ul></ul><ul><ul><li>Vai-se aumentando gradualmente o poder de ampliação até à objectiva de maior ampliação; </li></ul></ul><ul><ul><li>Se for necessário utilizar a objectiva de 100 X, deverá colocar-se uma gota de óleo de imersão sobre a preparação. </li></ul></ul>
  34. 36. <ul><li>Focagem: </li></ul><ul><ul><li>Coloca a preparação a observar na platina e depois de a centrar, fixa-a com o auxílio das pinças; </li></ul></ul><ul><ul><li>Utiliza o parafuso macrométrico em movimentos lentos para deslocar o tubo ou a platina até que a objectiva fique muito próxima da preparação; </li></ul></ul><ul><ul><li>Observa pela ocular enquanto rodas o parafuso macrométrico lentamente até obteres uma imagem nítida; </li></ul></ul>
  35. 37. <ul><li>Focagem: </li></ul><ul><ul><li>Percorre lentamente a preparação em vários sentidos afim de encontrares a zona de maior interesse ; </li></ul></ul><ul><ul><li>Centra a zona de maior interesse; </li></ul></ul><ul><ul><li>Corrige a focagem com o auxílio do parafuso micrométrico, rodando-o em movimentos lentos. </li></ul></ul>
  36. 38. <ul><li>Técnica de substituição de objectivas: </li></ul><ul><ul><li>Para observar com ampliações maiores basta rodar o revólver no sentido da objectiva da ampliação pretendida; </li></ul></ul><ul><ul><li>Corrige-se a focagem utilizando apenas o parafuso micrométrico. </li></ul></ul>
  37. 39. O Microscópio Óptico

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