Práctica “Efecto de antibióticos sobre colonias de microorganismos”

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Práctica “Efecto de antibióticos sobre colonias de microorganismos”

  1. 1. Universidad Nacional Autónoma de México Escuela Nacional Preparatoria Plantel Núm. 2 “Erasmo Castellanos Quinto” Práctica“Efecto de antibióticos sobre colonias de microorganismos” Integrantes del equipo: Escorcia Márquez Heber Betsabe García Basilio Jesús Adrián Hernández Rosales Edgar Ricardo Martínez del Castillo Ashley Alejandra Grupo: 600c Profesor: Pablo González Yoval Fecha de entrega: 29-Noviembre-2011 Asignatura: Temas Selectos de Biología
  2. 2. INTRODUCCIÓN:Marco Teórico.Microorganismos.La microbiología es una rama de la biología que estudia a los seresmicroscópicos, también llamados microorganismos.Los microorganismos existen como células independientes o, en algunoscasos, formando agrupaciones o colonias. En ellos, las células, ya seanaisladas o unidas, son todas equivalentes y no presentan ningunaespecialización funcional. Cada una es capaz de llevar a cabo todos losprocesos vitales, como el crecimiento, la respiración y la reproducción, asícomo de responder a los estímulos del ambiente y de modificarlo. Losmicroorganismos tienen una extensa distribución taxonómica, incluyen ahongos y bacterias, que son los más reconocidos (García, 1995).Hongos.Los hongos son organismos eucariotas, por lo que poseen núcleos verdaderos,así como todas las estructuras internas características de estas células.Poseen, además, una pared gruesa, semejante en grosor y en composiciónquímica a la pared de las células vegetales.Estos organismos son heterótrofos: para su nutrición, requieren de compuestosorgánicos, y, como tales, obtienen su alimento de la materia orgánica, ycontribuyen, en gran medida, con la fertilidad de los suelos, pero también son lacausa del deterioro de alimentos, textiles y otros productos de importanciaeconómica. Producen, asimismo, enfermedades en el hombre, los animales yprincipalmente en las plantas (García, 1995).Bacterias.Se considera que las bacterias son los organismos más pequeños de vida libreexistentes en la Naturaleza, ya que son capaces de crecer y reproducirseutilizando nutrimentos del ambiente donde se encuentran.
  3. 3. La célula bacteriana es procariota, por lo cual es morfológicamente mássencilla que los organismos superiores. En su exterior posee una pared celularrígida que rodea la membrana citoplasmática y cuya función es proteger labacteria de daño mecánico. Internamente se encuentran el citoplasma y laregión nuclear (García, 1995).Las bacterias presentan tres tipos morfológicos típicos: las formas esféricas,llamadas cocos; las cilíndricas o bastoncitos, denominadas bacilos, y las quepresentan forma de espiral o resorte, llamados espirilos (Figura 1). Fig. 1 Esquema de las principales formas de las bacterias (García, 1995)Las células bacterianas, principalmente los cocos, presentan agrupaciones queson características de la especie, por lo que el tipo de agrupación tiene valorpráctico en la identificación (García, 1995).Los cocos forman diversas agrupaciones, debido a dos factores: el plano dedivisión celular y la tendencia de las células a permanecer unidas después dela división. Esto da origen a patrones de agrupamiento conocidos comoestreptococos, estafilococos, tetracocos o tétradas y sarcinas (Figura 2). Fig. 2 Diversas agrupaciones presentadas por las bacterias (García, 1995).
  4. 4. Antibióticos Naturales.Se le denomina antibiótico a cualquier compuesto químico utilizado paraeliminar o inhibir el crecimiento de organismos infecciosos tanto en sereshumanos como en animales. Los antibióticos son elaborados por seres vivos:plantas, animales, bacterias y hongos. Por lo que se puede decir que unantibiótico puede definirse como una sustancia derivada de un organismo vivo,generalmente un microorganismo o una modificación química de la misma, queinhibe la reproducción, crecimiento o incluso destruir otros microorganismos ycélulas anormales (Cruz, 2004).Los antibióticos naturales son aquellos que no han sufrido modificacionesdentro de un laboratorio y que se encuentran dentro de una gran variedad dealimentos como lo son las frutas y las verduras, las propiedades de estosantibióticos naturales han sido conocidas desde la antigüedad y han llegado aser una alternativa, ya que son fáciles de hacer, por lo que se pueden llevar acabo de manera casera. Otra de las ventajas de los antibióticos naturales esque no son perjudiciales en comparación con los antibióticos artificiales, esdecir, los que han sido desarrollados en un laboratorio, e inclusive ayudan areforzar nuestras defensas y por consiguiente tener una mejor salud(Cruz, 2004).Algunos ejemplos de antibióticos naturales pueden ser el ajo y la cebolla, que acontinuación se explican.Ajo.Ante el éxito comercial de la penicilina durante los años 40, los científicos sededicaron a buscar otros enemigos naturales de las bacterias que pudieranconvertir en medicamentos. De hecho, en 1858 Louis Pasteur había observadoque las bacterias morían al ser expuestas a los efectos del ajo. En 1944,Chester J. Cavallito aisló un antibiótico potente del ajo: la alicina. Pero la alicinademostró ser tan esquiva y tener un ciclo de vida tan corto que fue imposiblefabricar un fármaco con ella. Es preciso administrarla en su empaque original:el diente de ajo crudo (Carper, 1994).
  5. 5. El ajo es uno de los agentes antibacterianos más fuertes, complejos y deamplio espectro que nos ofrece la naturaleza. Los experimentos demuestranque el ajo mata o incapacita a por lo menos setenta y dos bacterias infecciosascausantes de la disentería, el botulismo, la tuberculosis y la encefalitis, entreotras enfermedades (Carper, 1994).Cebolla.También la cebolla es un antibiótico y antiséptico potente, y se utilizó paratratar las infecciones de los soldados rusos heridos durante la Segunda GuerraMundial (Carper, 1994).Esta verdura aloja en su interior un aceite esencial que contiene una sustanciavolátil llamada alilo, con propiedades bactericidas y fungicidas. Contienecomponentes minerales como calcio, magnesio, sodio, potasio y fósforo. Laspropiedades antibacterianas de la cebolla se han visto aumentadas debido a suuso anti-fúngico.Ciprofloxacino.Posee una cobertura de amplio espectro contra las bacterias grampositivas ygramnegativas. El uso oftálmico inicial estaba destinado para el tratamientocontra las infecciones de la cornea y conjuntivales; sin embargo, tambiénganaron amplia aceptación en la profilaxis de la endoftalmitis bacterianadespués de la cirugía intraocular (Ashok, 2007).JUSTIFICACIÓN:Al desarrollarse esta práctica, se pretende aplicar los conocimientos adquiridosen clase de manera teórica, se realizará una práctica sencilla para ejemplificarla elaboración de medios de cultivo con base en caldo de res y agar,posteriormente crecerán colonias de diferentes microorganismos, con el fin deidentificarlos, y ver el efecto de los antibióticos naturales (Ajo y/o cebolla) y unantibiótico artificial (Ciprofloxacino) sobre ellos.
  6. 6. OBJETIVO:Comprobar la efectividad de los antibióticos naturales sobre cultivos decolonias de microorganismos.HIPÓTESIS:Si creamos medios de cultivo para el desarrollo de micro-organismos y enunas áreas [del cultivo] colocamos antibióticos (artificial o natural), entonces nose reproducirán microorganismo en esas áreas, al menos que elmicroorganismo sea resistente al antibiótico.METODOLOGÍA: 1) Se colocan 300 mL de caldo de res en un vaso de precipitados de 500 mL. 2) Se pone el vaso de precipitados en la parrilla a una temperatura de 50ºC hasta que hierva el caldo. 3) Se pesan 9 gramos de carragenina y se van agregando poco a poco en el caldo sin retirar el vaso de precipitados de la parrilla; y sin dejar de mezclar en el caldo hasta disolver los grumos que se formen. 4) Ya que no quede ningún grumo en el caldo se cambia a un matraz erlenmeyer que deberá ser cerrado completamente con un tapón de algodón cubierto de cinta para evitar que se contamine. 5) Se introduce el matraz erlenmeyer en el autoclave aproximadamente 1 hora para eliminar los organismos que puedan estar en el caldo y poder obtener un medio de cultivo puro. 6) En el cuarto donde se encuentra la campana de flujo laminar, se lleva a cabo el proceso de colocar una capa delgada de caldo en cada caja Petri, en este caso 10, evitando abrirla por completo y cerrándola para evitar contaminarla. 7) Cuatro cajas se expondrán a un medio diferente para obtener microorganismos que formaran colonias con las que trabajaremos, mientras que otras 4 cajas Petri se dejaran en el refrigerador para evitar
  7. 7. su contaminación, posteriormente las 4 cajas que fueron contaminadas se guardaran en la estufa para mantenerlas a una temperatura estable y acelerar el crecimiento de microorganismos.8) Una semana después se sacan las cajas Petri de la estufa y se observan los microorganismos que en ellas crecieron en un microscopio estereoscópico.9) Se elige uno de los cuatro medios de cultivo contaminados para realizar la siembra de microorganismos.10) Posteriormente, en la campana de flujo laminar, se calienta el asa de siembra con una lámpara de alcohol, se introduce en una sección del medio contaminado, se raspa la colonia de microorganismos y se siembran en las cuatro cajas Petri que estaban en cultivo puro y se dejaron en el refrigerador.11) Se colocan tres círculos de papel filtro en cada una de las cajas, de los cuales el primero será mojado con el antibiótico natural, el segundo con el antibiótico artificial y el tercero será el testigo, que sólo contendrá agua, estos círculos se deberán ubicar en diferentes secciones de las cajas Petri.12) Los medios que han sido sembrados se dejaran en la estufa durante una semana para permitir el desarrollo de las colonias de microorganismos.13) Se retiran los medios de la estufa y se procede a observar e identificar las colonias que se formaron en cada medio, y posteriormente hacer el conteo de estas colonias y en qué caso de los antibióticos tanto naturales como artificiales y el testigo hubo un mayor desarrollo de microorganismos. Anotar resultados.
  8. 8. RESULTADOS:Como se muestra en la figura 3, los resultados aparentes muestran que elantibiótico Natural (ajo) retraso el crecimiento de los hongos, mientras que elantibiótico artificial aparentemente no tuvo mayor efecto sobre losmicroorganismos, tal vez debido al tipo de estos (hongos) o a la bajaconcentración del antibiótico. Aparentemente para un mejor registro deresultados deben hacerse más experimentos incluyendo más cultivos de tipobacteriológicos. Figura 3. Tabla de resultados de experimentacion Fecha 18 de noviembre de 2011 22 de noviembre de 2011 Antibiótico Natural Artificial Testigo Natural Artificial Testigo Caja 1 M M E M M Caja 2 M M B M M Caja 3 E M B M M B Caja 4 E E M M E Resultados 1 E 1 E 1 B 1 B 4 M 1 B 3 3 M 1 E 1 E 1 E 4 M 4 M 4 M Contaminado por hongos Limpio de microorganismos Contaminado un 10%-30% B Contaminado un 31%-70% E Contaminado un 71%-100% M
  9. 9. Medio de cultivo 1 Medio de cultivo 2Hongos Verdes en 40 % Hongos Verdes en 95 %Hongos Blancos en 50 %Hongos Naranjas 10 %Medio de cultivo 3 Medio de cultivo 4Hongos Blancos 45 % Hongos Blancos 30%Hongos Naranjas 55% Hongos Naranjas 70%
  10. 10. DISCUSIÓN:Al terminar la práctica y analizar los resultados pudimos corroborar el efecto quetiene los antibióticos naturales y artificiales sobre las colonias de microorganismos(bacterias y hongos principalmente).En donde se coloco el antibiótico natural se desarrollo una nula cantidad debacterias, mientras que en el antibiótico artificial se presento un crecimiento aúnmayor, con notables diferencias en los 4 medios de cultivo, al evaluar losresultados logramos deducir que el crecimiento anormal en los medios de cultivo sedebía a dos factores principalmente:Primero: Tipo de bacteria, ya que unas presentaban mayor resistencia al mismoantibiótico (natural o artificial), esto es debido a la estructura de cada bacteria, puescomo se sabe las bacterias van adquiriendo propiedades que las hace inmunes [alos antibióticos], he ahí el porque existen diversos tipos de penicilina(García,1995).Segundo: Concentración del antibiótico sobre la disolución total, este fue un factormuy importante, nuestro antibiótico natural de ajo tuvo una concentración de 50 grsobre 100 mL de agua, lo que ocasiono un antibiótico concentrado y eficaz,mientras que el antibiótico artificial al ser diluido en una cantidad excesiva de aguaperdió características inhibidoras importantes, lo que ocasiono una reacción débilfrente a los microorganismos, por lo cual en los medios de cultivo existió un clarodesarrollo de ellos, (teóricamente se suponía que al ser un antibiótico de laboratorio[artificial] tenia que ser más fuerte al natural, debido a las modificaciones que sehacen al producirse), en cuanto a nuestros resultados obtuvimos una mejorinhibición con el antibiótico natural coincidiendo con la descripción previa del ajo,pues mientras se mantuvo activo el ajo evito completamente la aparición demicroorganismo, pero como se dice claramente que los antibióticos naturales tieneun efecto de corta duración, la segunda vez que observamos los cultivos notamosla invasión de microorganismos a el disco con antibiótico natural.En general obtuvimos resultados buenos, pues en el área donde se deposito eldisco con agua existió una rápida y excesiva población de bacterias, se respeto losresultados antes previstos.
  11. 11. CONCLUSIONES:Los antibióticos han sido muy importantes (desde hace muchos años,principalmente los naturales) para contrarrestar el efecto malicioso queprovocan algunos microorganismos sobre otros organismos, ocasionandoenfermedades.De acuerdo a los resultados obtenidos en el equipo podemos concluir que: Los antibióticos naturales presentan mejores propiedades inhibidoras contra microorganismos, por lo tanto los antibióticos naturales son mejores. El efecto de un antibiótico depende de la concentración y de la cantidad que sea depositada sobre un microorganismo, de igual manera al tipo de microorganismo que sea aplicada (bacterias, hongos) Es difícil aislar a un sólo microorganismo, se necesitan las condiciones necesarias y especificas para lograrlo, ya que se contaminan los medios de cultivo fácilmente por otro microorganismo independiente al cultivo, llegando a dificultar el estudio del mismo.Es muy interesante estudiar (además de importante) a los microorganismo, sucontexto histórico, sus funciones, su estructura, los tipos, los daños queprovocan (el saber como poder contrarrestarlos) y conocer que también tienemuchos beneficios, respecto a esta práctica, que es posible comprobarmediante la experimentación los efectos de los antibióticos sobre losmicroorganismo. BIBLIOGRAFÍA:  García, V. (1995). Introducción a la microbiología. Costa Rica: Editorial Universidad Estatal a Distancia. Pp. 35-41,83-86.  Cruz, A. (2004). Antibióticos naturales. México: Fernández. Pp. 27-29.  Carper, J. (1994). Los alimentos: medicina milagrosa. Colombia: Norma. Pp. 512-514.  Ashok, G. (2007). Tratamiento antibiótico. México: Panamericana. Pp. 151-152.

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