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  • 1. Universidad de Chile Facultad de Medicina Escuela de Tecnología MédicaTinción May-Grünwald/Giemsa en frotis sanguíneo Maximiliano Martínez Ilabaca
  • 2. Frotis sanguíneo• El Frotis sanguíneo es la herramienta básica en todos los laboratorios de Hematología para analizar las características de los elementos sanguíneos del paciente, colaborando en la descripción de su estado de salud.• Para estudiar las características microscópicas de la sangre debe extenderse en un portaobjeto y luego teñirse, paso fundamental para hacer visible al microscopio las características particulares de sus elementos figurados.
  • 3. Componentes de la tinción Esta técnica combina los principios de coloracióndesarrollados por May Grunwald y Giemsa, usando 2soluciones colorantes:• Solución May Grunwald: Contiene eosina (colorante aniónico) y Azul de metileno ( colorante catiónico), disueltos en metanol.• Solución Giemsa: Contiene Eosina, Azul de metileno y productos de oxidación de este segundo compuesto.
  • 4. Principio de la tinción Los componentes celulares se clasifican por estatinción en:• Componentes aniónicos ( ácidos): Al unirse a los tintes catiónicos se tiñen en tonos azules. Son llamados “Basófilos”. Ej: DNA, RNA, proteínas, mitocondrias, ribosomas.• Componentes catiónicos (básicos): Se unen a Eosina, tiñendo en variados tonos rojos y naranja. Se les llama acidófilos o eosinófilos. Ej: Hemoglobina.
  • 5. Fases de la tinción May Grunwald- Giemsa:1° Fijación: Sumergir los frotis secos por 2 minutos ensolución de May Grunwald.2° Lavado y rehidratación: Dejar por 1 minuto en aguadestilada y escurrir el agua.3° Tinción con Giemsa: Sumergir por 15 minutos enGiemsa. Luego retirar y escurrir. Posteriormente se retiran los frotis montados yse dejan secar para su posterior lectura al microscopioóptico con aumento 100X.
  • 6. Observación al microscopio Una vez teñidos los frotis y observados con objetivo deinmersión con aceite (aumento 100X) al microscopio se puededistinguir:• Núcleos: Azul-púrpura• Citoplasma: Violeta pálido-marrón• Eritrocitos: Rosado• Gránulos de neutrófilos: Violeta-marrón• Gránulos de eosinófilos: Naranja• Gránulos de basófilos: Azul-negro• Gránulos de linfocitos: Púrpura
  • 7. Resultados Una vez teñidos y visualizados los frotis almicroscopio el Tecnólogo Médico puede informarsobre las características de los elementossanguíneos que visualiza en elpaciente, contribuyendo al diagnóstico queelaborará el clínico, y sugiriendo otros exámenes sies necesario.
  • 8. Principales cuadros identificables• Anemia: Concentración disminuida de eritrocitos en sangre. Debe ser complementado para informarse con niveles de Fierro sérico y hematocrito para conocer su causa.• Microcitosis: Disminución del tamaño normal de los eritrocitos, observable en anemia ferropénica.• Hipocromía: Eritrocitos de tonalidad pálida, con aumento de la claridad central.• Leucocitosis: Aumento de leucocitos en sangre, originada principalmente en caso de infecciones.
  • 9. Identificación de cuadros malignos en frotis sanguíneo Si el Tecnólogo identifica en el paciente alguna célulasospechosa, como en el caso de observar Blastos en sangreperiférica, y se sospecha de algún tipo de leucemia u otraenfermedad hematológica se informa al clínico para solicitarnuevamente un examen o indagar con otro tipo deprocedimientos, como mielograma o biopsia medular o linfáticasegún sea el caso. Estos datos deben ser complementados con elestado del paciente y evaluación genética. Es fundamental informar hallazgos de este tipo con lamayor precisión y rapidez posible para atender de forma oportunaal paciente.
  • 10. Parásitos identificables en frotis También se puede identificar por frotis enfermedadesparasitarias como:• Enfermedad de Chagas• Malaria• Toxoplasmosis• Dengue En este caso el Tecnólogo informainmediatamente al médico el hallazgoidentificado y se solicitan exámenesserológicos para confirmar el cuadro quepadece el paciente, para tomar medidasrápidamente para iniciar un prontotratamiento y cuidado en estos casos quepueden ser muy graves.