Chap. 12 serology

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Chap. 12 serology

  1. 1. Capitulo 12: SerologíaSerología- Estudio de los Fluidos del cuerpo. Sangre, Orina,Sudor, Bilis, Saliva y Semen.Sangre- Compuesta de 55% Plasma-Parte liquida de la sangre sincoagular y Suero- 45% Sólidos suspendidos {Eritrocitos,Leucocitos, Plaquetas etc.}Antígeno (Ag)- Proteína que estimula al cuerpo a produciranticuerpos, pueden estar localizados en las células rojas.Anticuerpo-(Ab)- proteína que destruye o inactiva un Agespecifico, se encuentra en el suero.Tipos de Sangre: Page | 1
  2. 2. Tipo A- Células con Antígeno A y Anticuerpo B. Tipo B- Células con Antígeno B y Anticuerpo A Tipo AB- Células con Antígeno AB y ningún Anticuerpo Tipo O- No posee ni Antígenos ni Anticuerpos. Factor Rh (+)-Personas con Antígeno D. Factor Rh (-)-Personas sin Antígeno D.Inmunoensayos:Complejo de droga y proteína, se inyecta a un animal produciendoAb policlonales.Ab policlonal- Se producen respondiendo a la variedad de sitiosdiferentes en el Ag. Produce Ab que varían en composición por lotanto varían en especificidad.Ab monoclonal- Son Ab idénticos que interactúan con un solo lugardel Ag. Inyectar el complejo del Ag. Remover el bazo y las células que producen Ac. Combinar las células del bazo con células cancerosas produciendo células hibridomas. Las células hibridomas se cultivan y se separa aquella que produce el Ab de interés. Cultivar las células hibridomas seleccionada para la producción de Ab monoclonal.Ej. EMIT- Enzyme multiplied Immunoassay Technique. Page | 2
  3. 3. Características de manchas de Sangre: Bencidina-(Cancerogénica) Fenolftaleína- Peroxidasa de la Hemoglobina (Hg) hace que se torne color rosa intenso. Materiales vegetales dan positivo. Ej. Papas, Horseradish. Poco probable que estos materiales se encuentren en la mancha de la escena. Tirilla de Hemastix- Se humedece con agua y se pone en contacto con la sangre. Cambia a verde cuando es positiva. Luminol- Se rosea sobre el área y se oscurece el lugar usando una lámpara UV, Se determina la luminiscencia. Áreas grandes pueden presentar patrones de sangre. Detecta sangre diluida 300,000 veces y no interfiere con la prueba de DNA. Microcristales- Mezclar sangre con reactivo de Takayama o reactivo de Teichmann y produce cristales. Poco sensitiva y susceptible de interferencias. Precipitin- Determina si es sangre humana. Se produce al inyectar sangre humana a un animal este produce Ab. Se conoce como antisuero humano, Una mezcla de sangre humana con suero antihumano produce un anillo o banda opaca en la interface. Se puede utilizar una gelatina de difusión donde emigran el Ag y el Ab produciendo una región opaca donde se unen. Page | 3
  4. 4. Marcadores Genéticos:Enzimas polimórficas- proteínas que catalizan reaccionesespecificas. Estas existen en diferentes formas.Izo-enzimas- Componente proteico de la enzima.La Izo-enzima PGM- Fosfoglucomutasa. Tiene tres variantes en lapoblación Variantes Tipos de sangre Factor RhPGM-1 58% Tipo O 43% Rh (D) 85%PGM-2-1 36% Tipo A 42% Rh (C) 10.5%PGM-2 6% Tipo B 12% Rh (E) 4.5% Tipo AB 3%Los marcadores genéticos ocurren independientemente uno del otro,Se utiliza el producto de su distribución en la población paradeterminar la probabilidad que estén en una mancha de sangre.Ej. Una mancha con PGM-2, Tipo B y Rh (C) la probabilidad de estaren un solo individuo es de 0.06 x 0.12= 0.105= 0.000756= 0.0756%0.0756% de la población o sea = 1 en 1323.Patrones Sanguíneos:La localización, distribución y apariencia de las manchas desangre y las salpicaduras me ayudan a interpretar y reconstruirlos eventos que pudieron ocurrir y produjeron sangrado. Puntos enla determinación de dirección, distancia, de la caída de la gotade sangre y el ángulo de impacto. Textura de la superficie- Mientras más dura y menos porosa es la superficie menor es la salpicadura. Forma de la mancha- Determina la dirección que viaja la sangre que impacta un objeto. La punta final de la mancha siempre señala la dirección en que viaja. Angulo de impacto en una superficie plana se determina midiendo el ángulo de distorsión circular de la mancha. El origen de la salpicadura se determina en dos dimensiones dibujando líneas rectas a través del eje de varias manchas. La intersección o punto de convergencia de las líneas representa un punto de donde la sangre emana. [Ver ejemplos próxima pagina]. Page | 4
  5. 5. Principios de Herencia:Cromosomas- Estructura en el núcleo de la célula donde estánlocalizados los genes. Estos están compuestos de DNA.Gen- segmento de DNA localizado en el cromosoma que es la unidadbásica de herencia.Locus- localización física de un gen en el cromosoma.Alelo- Una de las posibles alternativas de la forma de un genlocalizados en el mismo locus de un par particular de cromosomas. Homocigótico- Tiene dos genes alélicos idénticos. Heterocigótico- Tiene dos genes alélicos diferentes.La célula humana tiene 23 pares de cromosomas o sea 23 del padre y23 de la madre.Cromosoma X- sexo femenino Cromosoma Y- sexo masculino Page | 5
  6. 6. Las células reproductivas (ovulo y espermatozoide) tienen 223 =8.4millones de diferentes posibles combinaciones. 223 x 223= 246=7x1012posibilidades. Ej. Tipos de sangre A, B, O =Cromosoma 9A (Pa)+ A (Ma) AA homocigotoA (Pa)+ B (Ma) AB heterocigotoA (Pa)+ O (Ma) AO heterocigotoGenotipo- un par de genes alelos. Ej. AO, AAFenotipo-Manifestación física de un genotipo.Gen dominante- Manifiesta sus características sobre otro. Ej. A yB.Gen recesivo- Oculta sus características. Ej. Un individuoheterocigótico AO va a tener un tipo de sangre A y uno ABmanifiesta tanto A como B. Page | 6
  7. 7. Caracterización de Semen:Eyaculación entre 2.5 a 6.0 ml de fluido seminal. 100 millones deespermatozoides por mililitro.Identificación con textiles- Apariencia dura, tostada y costrosa.Prueba de fosfatasa acida- (Enzima secretada por la próstata). (1)α naftilfosfato de sodio y fast Blue B Dye cambia a violeta (2) 4-metil umbelifenil fosfato (MUP) con UV produce fluorescencia.Falsos positivos: vegetales, frutas, hongos cremas contraceptivas,secreciones vaginales. La reacción es mucho más lenta. Ej.Reacción en menos de 30 segundos indica fuertemente que es semen.Espermatozoide- presente en la mancha, es semen. Se extraen conagua de la mancha y se le añade tinte y se mira la laminilla en elmicroscopio.Razones para no encontrar un espermatozoide: Se unen bien fuerte a la tela. Son extremadamente vidriosos cuando se secan. Se desintegran si se lava la tela. Se desintegran si se estregan con otro objeto. Hombres con bajo contaje (oligoespermia) Hombres con vasectomía, no contaje (aspermia)Ag específicos de la próstata- PSA o P30. Enzimas que sonespecifica de la próstata y asociada al plasma seminal. Pruebafácil y certera en laboratorio. Anti P30 + semen + electroforesisaglutinación (+). Ab monoclonal es 100 veces más sensitivo.Colección de evidencia: (violación) Ropa-bolsas diferentes de papel Recoger evidencia suelta, Parar la victima sobre un papel sin zapatos. Ej. Desvestirse sobre el papel. Tela con manchas evitar que se mezclen con otras Pelos peinados y control Hisopos vaginales, anales y orales Muestras para DNA Raspado de uñas Muestra de orina para detectar drogas de clubEvidencia del sospechoso: Ropa Pelo púbico peinado control Hisopo del pene antes de 24 horas de los hechos. Prueba para DNA Page | 7
  8. 8. Ropa interior buscar por la parte de adentro. DNA de la victima que deja el pene al estar en contacto con la tela.Establecer tiempo de la violación: Espermatozoides vivos- 4 a 6 horas en la vagina Espermatozoides sin movimiento- de 3 a 6 días en vagina después del contacto sexual. Espermatozoides completos- de 16 a 72 horas después del contacto sexual. Fosfatasa acida- antes de 48 horas del contacto sexual. PSA- antes de 24 horas del contacto sexual Muestra para DNA de la pareja si tuvo relaciones entre las 72 horas de la agresión Espermatozoide sin movimiento- 3 a 6 horas en boca, 9 a 20 horas en ano y 17 días en cérvix. Page | 8

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