Your SlideShare is downloading. ×
Molekulární genetika v reprodukční medicíně Cystická fibróza Trombofilní mutace MUDr. Marek Turnovec 21. dubna 2011 Předná...
Vztah genotyp  ×  fenotyp fenotyp genotyp prostředí
Geny  vs.  prostředí Monogenní onemocnění Multifaktoriální onemocnění Infekční onemocnění
Cystická fibróza <ul><li>závažné onemocnění, s projevy především v  respiračním  a  gastrointestinálním  systému
autosomálně recesivní dědičnost
nejčastější z „rare diseases“
příčinou jsou mutace v genu  CFTR
v současné době přes 1800 mutací a variant  (viz www.genet.sickkids.on.ca) </li></ul>
Historie I Typické příznaky popisované již ve středověku: „ Wehe dem Kind, das beim Kuß auf die Stirn salzig schmekt, er i...
Historie II <ul><li>19. století – Carl von Rokitanski – mekoniová peritonitida
1905 – Karl Landsteiner – mekoniový ileus
1936 – Guido Fanconi – vztah bronchiektázií, céliakie a cystické fibrózy pankreatu </li></ul>
Historie III <ul><li>1938 – Dorothy Andersen – „cystická fibróza pankreatu“, pankreatická substituce
1952 – Paul di Sant' Agnese – nerovnováha elektrolytů v potu
1988 – Tsui, Riordan, Collins, et al. – F508del
1989 – Tsui, Kerem, Riordan, Rommens et al. – sekvence a klonování genu  CFTR  </li></ul>
Gen  CFTR  a jeho produkt 7 chromosom, q31.2 116 907 253-117 095 955 bp ≈ 189 kb 24 exonů cystic fibrosis transmembrane co...
Protein CFTR <ul><li>iontový kanál pro chloridové anionty a thiokyanatan (=rhodanid)
buňky epitelu – především v plicích, játrech, slinivce, reprodukčním ústrojí a potních žlázách
kanál je závislý na ATP,  reguluje i další kanály (např. ENaC)
narušení rovnováhy elektrolytů (Cl – , Na + ) a vody v cytoplasmě a lumen žláz </li></ul>
Typy mutací genu  CFTR
„ Anyone who reviews the literature on CF and isn't confused, is confused.“ Efraim Racker, 1985
Incidence <ul><li>„učebnicová“ incidence v ČR –  1:2736 , tzn. každý 26. je  přenašečem
díky prenatální diagnostice se incidence v ČR v posledních letech  snižuje
v rámci Evropy nejvyšší incidence v Irsku
hispánská populace 1:9000, asijská populace 1:32000, afroameričani 1:15000 </li></ul>
Dědičnost
Mutace genu  CFTR <ul><li>F508del – nejčastější(v ČR asi 70 %)
rozdíly i v rámci Evropy
ČR: CFTRdele2,3(21kb), G551D, N1303K, G542X, 2143delT
mutace specifické pro jednotlivá etnika: </li><ul><li>„slovanské“ mutace: CFTRdele2,3(21kb), 2143delT, 4374+1 G>A
„keltská“ mutace: G551D
Anglosasové: R117H, I507del
středomoří: N1303K </li></ul></ul>
Abnormální funkce proteinu CFTR <ul><li>vazký hlen  ->  dýchací cesty, GIT, reprodukční systém
závažné infekce dýchacího systému
insuficience pankreatu  ->  neprospívání, průjmy, CF asociovaný diabetes, cysty
diagnóza: </li><ul><li>klinické příznaky, potní test
novorozenecký screening CF
molekulárně-genetické potvrzení dvou závažných mutací genu CFTR </li></ul></ul>
Upcoming SlideShare
Loading in...5
×

Cystická fibróza a trombofilní mutace

1,155

Published on

Přednáška Cystická fibróza a trombofilní mutace, kterou jsem přednesl v rámci povinně volitelného předmětu Reprodukční medicína a reprodukční genetika na 2. lékařské fakultě UK v Praze dne 21. dubna 2011.

Published in: Health & Medicine
0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total Views
1,155
On Slideshare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
0
Actions
Shares
0
Downloads
0
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

No notes for slide

Transcript of "Cystická fibróza a trombofilní mutace"

  1. 1. Molekulární genetika v reprodukční medicíně Cystická fibróza Trombofilní mutace MUDr. Marek Turnovec 21. dubna 2011 Přednáška pro povinně volitelný předmět: Reprodukční medicína a reprodukční genetika 2. lékařská fakulta Univerzity Karlovy, Praha
  2. 2. Vztah genotyp × fenotyp fenotyp genotyp prostředí
  3. 3. Geny vs. prostředí Monogenní onemocnění Multifaktoriální onemocnění Infekční onemocnění
  4. 4. Cystická fibróza <ul><li>závažné onemocnění, s projevy především v respiračním a gastrointestinálním systému
  5. 5. autosomálně recesivní dědičnost
  6. 6. nejčastější z „rare diseases“
  7. 7. příčinou jsou mutace v genu CFTR
  8. 8. v současné době přes 1800 mutací a variant (viz www.genet.sickkids.on.ca) </li></ul>
  9. 9. Historie I Typické příznaky popisované již ve středověku: „ Wehe dem Kind, das beim Kuß auf die Stirn salzig schmekt, er ist verhext und muss bald sterbe“ „ Woe is the child who tastes salty from a kiss on the brow, for he is cursed, and soon must die...“ (18. století)
  10. 10. Historie II <ul><li>19. století – Carl von Rokitanski – mekoniová peritonitida
  11. 11. 1905 – Karl Landsteiner – mekoniový ileus
  12. 12. 1936 – Guido Fanconi – vztah bronchiektázií, céliakie a cystické fibrózy pankreatu </li></ul>
  13. 13. Historie III <ul><li>1938 – Dorothy Andersen – „cystická fibróza pankreatu“, pankreatická substituce
  14. 14. 1952 – Paul di Sant' Agnese – nerovnováha elektrolytů v potu
  15. 15. 1988 – Tsui, Riordan, Collins, et al. – F508del
  16. 16. 1989 – Tsui, Kerem, Riordan, Rommens et al. – sekvence a klonování genu CFTR </li></ul>
  17. 17. Gen CFTR a jeho produkt 7 chromosom, q31.2 116 907 253-117 095 955 bp ≈ 189 kb 24 exonů cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
  18. 18. Protein CFTR <ul><li>iontový kanál pro chloridové anionty a thiokyanatan (=rhodanid)
  19. 19. buňky epitelu – především v plicích, játrech, slinivce, reprodukčním ústrojí a potních žlázách
  20. 20. kanál je závislý na ATP, reguluje i další kanály (např. ENaC)
  21. 21. narušení rovnováhy elektrolytů (Cl – , Na + ) a vody v cytoplasmě a lumen žláz </li></ul>
  22. 22. Typy mutací genu CFTR
  23. 23. „ Anyone who reviews the literature on CF and isn't confused, is confused.“ Efraim Racker, 1985
  24. 24. Incidence <ul><li>„učebnicová“ incidence v ČR – 1:2736 , tzn. každý 26. je přenašečem
  25. 25. díky prenatální diagnostice se incidence v ČR v posledních letech snižuje
  26. 26. v rámci Evropy nejvyšší incidence v Irsku
  27. 27. hispánská populace 1:9000, asijská populace 1:32000, afroameričani 1:15000 </li></ul>
  28. 28. Dědičnost
  29. 29. Mutace genu CFTR <ul><li>F508del – nejčastější(v ČR asi 70 %)
  30. 30. rozdíly i v rámci Evropy
  31. 31. ČR: CFTRdele2,3(21kb), G551D, N1303K, G542X, 2143delT
  32. 32. mutace specifické pro jednotlivá etnika: </li><ul><li>„slovanské“ mutace: CFTRdele2,3(21kb), 2143delT, 4374+1 G>A
  33. 33. „keltská“ mutace: G551D
  34. 34. Anglosasové: R117H, I507del
  35. 35. středomoří: N1303K </li></ul></ul>
  36. 36. Abnormální funkce proteinu CFTR <ul><li>vazký hlen -> dýchací cesty, GIT, reprodukční systém
  37. 37. závažné infekce dýchacího systému
  38. 38. insuficience pankreatu -> neprospívání, průjmy, CF asociovaný diabetes, cysty
  39. 39. diagnóza: </li><ul><li>klinické příznaky, potní test
  40. 40. novorozenecký screening CF
  41. 41. molekulárně-genetické potvrzení dvou závažných mutací genu CFTR </li></ul></ul>
  42. 42. Zdroj: Wikipedia
  43. 43. Fertilita u mužů s CF <ul><li>97-98 % mužů s CF je neplodných
  44. 44. congenital bilateral absence of vas deference (CBAVD) – u typických i atypických forem CF
  45. 45. diagnostika: andrologické vyšetření, spermiogram, MG vyšetření
  46. 46. řešení: metody ART (získání spermií – TESE, MESE, umělá inseminace, IVF, ICSI a embryotransfer) </li></ul>
  47. 47. Fertilita u žen s CF <ul><li>zvýšená viskozita cervikálního hlenu
  48. 48. nepravidelný menstruační cyklus, amenorrhea
  49. 49. řešení: metody ART (umělá inseminace), zlepšení stavu výživy, adekvátní terapie komplikací CF </li></ul>
  50. 50. Prekoncepční péče <ul><li>v případě nosičství mutace pro CF je nutné vyšetřit partnera
  51. 51. v případě, že jsou oba partneři nosiči -> prenatální či preimplantační diagnostika
  52. 52. obvykle se vyšetřují i další příbuzní pro odhalení přenašečství a eventuální další péči </li></ul>
  53. 53. Prenatální diagnostika <ul><li>odběr choriových klků (CVS) </li><ul><li>12.-14. týden
  54. 54. karyotyp
  55. 55. molekulárně-genetické vyšetření genu CFTR
  56. 56. riziko kontaminace mateřskými buňkami (konfirmace s kultivovanými buňkami) </li></ul><li>amniocentéza (AMC) </li><ul><li>16.-23. týden
  57. 57. karyotyp
  58. 58. molekulárně-genetické vyšetření genu CFTR </li></ul><li>riziko výkonu 0,5-1 % </li></ul>
  59. 59. Preimplantační diagnostika (PGD) <ul><li>u párů s rizikem větším než 25 %
  60. 60. IVF/ICSI
  61. 61. odběr blastoméry / polárního tělíska
  62. 62. určení genotypu </li><ul><li>haplotypová analýza
  63. 63. přímá MG diagnostika
  64. 64. WGA + NGS </li></ul><li>embryotransfer / kryoprezervace </li></ul>
  65. 65. Trombofilní mutace
  66. 66. Definice <ul><li>Trombofilie = hyperkoagulační stav </li><ul><li>sklon k vývoji trombózy
  67. 67. nerovnováha mezi koagulačními a antikoagulačními mechanizmy
  68. 68. narušená fibrinolýza
  69. 69. incidence závisí na věku: 1:1000 – 1:100 000 </li></ul><li>Trombóza </li><ul><li>vytvoření krevní sraženiny (trombu) v cévě </li></ul></ul>
  70. 70. Příčiny trombózy – Virchowova trias <ul><li>hyperkoagulace
  71. 71. hemodynamické změny (venostáza, turbulence)
  72. 72. dysfunkce endotelu </li></ul>zdroj: Wikimedia Commons
  73. 73. Typy trombózy <ul><li>Venózní trombóza </li><ul><li>venostáze
  74. 74. hyperkoagulace </li></ul><li>Arteriální trombóza </li><ul><li>dysfunkce endotelu (ateroskleróza) </li></ul></ul>
  75. 75. Rizikové faktory Získané Dědičné
  76. 76. Získané rizikové faktory <ul><li>trauma, operace, imobilizace, infekce
  77. 77. hormonální antikoncepce (HAK) a substituce (HRT)
  78. 78. kouření, věk
  79. 79. renální insuficience, srdeční choroby, maligní onemocnění
  80. 80. těhotenství, šestinedělí (puerperium)
  81. 81. antifosfolipidové protilátky (SLE, lymfomy)
  82. 82. APC (activated protein C) rezistence
  83. 83. hyperhomocysteinémie </li></ul>
  84. 84. Hereditární rizikové faktory <ul><li>Deficit antitrombinu 3
  85. 85. Rezistence aktivovaného faktoru V k APC (Leiden, Cambridge...)
  86. 86. Varianty faktoru II (protrombin)
  87. 87. Hyperhomocysteinémie (varianty MTHFR )
  88. 88. Deficit proteinu C , proteinu S či dalších antikoagulačních faktorů </li></ul>
  89. 89. Komplikace v těhotenství <ul><li>H luboká ž ilní t rombóza (HŽT) -> plicní embolie
  90. 90. Opakované těhotenské ztráty (především ve II. a III. trimestru)
  91. 91. IUGR – I ntra u terine g rowth r etardation
  92. 92. Preeklampsie/eklampsie
  93. 93. HELLP syndrom ( he molytic anemia, elevated l iver enzymes, l ow p latelet)
  94. 94. Trombóza placenty -> neadekvátní perfuze -> abrupce či infarkt placenty </li></ul>
  95. 95. Zdroj: Wikipedia
  96. 96. Faktor V <ul><li>FVa je kofaktorem FXa při přeměně protrombinu na trombin
  97. 97. Gen F5 lokalizován na chromozomu 1 (1q23)
  98. 98. Varianty (13): </li><ul><li>FV Leiden – nejznámnější
  99. 99. FV Cambridge, FV Hong Kong... </li></ul></ul>Zdroj: RCSB – Protein Databanka
  100. 100. FV Leiden <ul><li>Arg506Gln, R506Q, G1691A
  101. 101. Mutace v místě, kde je faktor V štěpen aktivovaným proteinem C -> 10 × pomalejší inaktivace FVa
  102. 102. Zvýšená aPC rezistence (v 90-95 %)
  103. 103. Prevalence: asi 5 % kavkazská populace, nižší v hispánské a vzácná v asijské populaci
  104. 104. U 20 % pacientů s HŽT
  105. 105. Poprvé popsáno: Bertina et al. 1994, Nizozemí </li></ul>
  106. 106. FV Leiden - důsledky <ul><li>heterozygoti: 5-10 × vyšší riziko HŽT
  107. 107. homozygoti: 50-100 × vyšší riziko HŽT
  108. 108. nižší krevní ztráty při porodu (Lindqvist et al. 1998) či poranění </li></ul>
  109. 109. Factor II - protrombin <ul><li>protrombin -> trombin
  110. 110. 11p11-11p12, G20210A
  111. 111. zvýšená syntéza trombinu (>130 %)
  112. 112. incidence: 2 % kavkazské populace (etnické rozdíly)
  113. 113. 6 % pacientů s HŽT
  114. 114. 2-3 × riziko HŽT </li></ul>
  115. 115. MTHFR <ul><li>m etylene t etra h ydro f olát r eduktáza
  116. 116. gen lokalizován na 11p36.3-11p36.4
  117. 117. více mutací/polymorfismů (>10)
  118. 118. nejčastější: C677T, A1298C
  119. 119. C677T -> termolabilní forma enzymu -> nižší aktivita enzymu (homozygoti 30 %, heterozygoti 65 %) -> zvýšená hladina homocysteinu
  120. 120. prevalence C677T v české populaci: </li><ul><li>heterozygoti: 40 %, homozygoti: 15 % (jinde v Evropě asi 7.5 %) </li></ul></ul>
  121. 121. Hyperhomocysteinémie <ul><li>koncentrace homocysteinu nad 18,5 mmol/L
  122. 122. poškození endotelu
  123. 123. zvýšené riziko HŽT </li><ul><li>18,5-20 mmol/L -> 2.5 ×
  124. 124. >20 mmol/L -> 4 × </li></ul><li>zvýšené riziko aterosklerózy (koronární arterie, CNS)
  125. 125. karcinogeneze
  126. 126. NTD </li></ul>
  127. 127. <ul>Deficit proteinu C </ul><ul><li>Venózní trombózy, habituální potrácení
  128. 128. Hereditární </li><ul><li>vzácný (1:5000 ?)
  129. 129. v homozygotní formě: purpura fulminans u novorozenců – krvácení, sepse, nekróza, DIC (disseminated intravascular coagulation) </li></ul><li>Získaný </li><ul><li>autoimunitní – protilátky proti proteinu C </li></ul></ul>
  130. 130. Doporučení v graviditě <ul><li>Důkladná osobní anamnéza (HŽT, tromboembolismus)
  131. 131. Důkladná gynekologicko-porodnícká anamnéza – důraz na průběh předchozích těhotenství a jejich komplikace
  132. 132. Rodinná anamnéza
  133. 133. Zvýšená hodnota PAPP-A
  134. 134. Ověření všech rizikových faktorů (ale ne testování všech žen)
  135. 135. Dle výsledků: observace , profylaxe </li></ul>
  136. 136. Indikace genetického testování <ul><li>Osobní anamnéza </li><ul><li>opakované těhotenské ztráty (habituální potrácení)
  137. 137. hluboká žilní trombóza
  138. 138. tromboembolismus </li></ul><li>Rodinná anamnéza </li><ul><li>opakované těhotenské ztráty
  139. 139. záchyt trombofilních mutací </li></ul></ul>
  140. 140. Profylaxe <ul><li>FV, FII </li><ul><li>prevence HŽT v rizikových situacích (operace, imobilizace)
  141. 141. kontraindikace HAK či HRT
  142. 142. acidum acetylsalycilicum před plánovaným otěhotněním a v I. trimestru (max. 70 mg/den), LMWH od 20. týdne, po porodu PAK
  143. 143. u symptomatických pacientů celoživotní antikoagulační terapie </li></ul><li>MTHFR </li><ul><li>Acidum folicum, vitamíny B (hlavně B12) – alespoň v I. trimestru – také prevence NTD </li></ul></ul>
  144. 144. Ne za vším je genetika...

×