1. Practica 6
OBSERVACION DE CELULAS EUCARIOTAS
OBJETIVO
Observar el núcleoencélulassanguíneasempleando la tinción de Hematoxilina-Eosina y Tinción Wright.
MATERIAL
-Microscopio - células sanguíneas - alcohol etílico absoluto
- Célula epitelial - metanol absoluto - Reactivo de Wright
- Hematoxilina - Eosina
METODOLOGIA
1-Extender una gota de sangre sobre unportaobjetos.
2- cubrir la muestra conEtanol yesperar hasta que se evapore.
3- Agregar Hematoxilina por 15 minutos, nodejandoque la muestra se seque.
4- Enjuagar ydespuésagregar Eosina por 1 minuto.
5- Enjuagar con agua de la llave.
6- Observar en10x y40x.
RESULTADOS
Fig. 1. Vista al microscopiode muestra de sangre, la
cual se fijo con etanol, después se le agrego
Hematoxilina, posteriormente se agrego Eosina yse
enjuago con agua de la llave. Se observan los
eritrocitos teñidos de rojo, enlos cuales se confirma
que no poseen núcleo. Aumentada 1000 x.
Fig. 2. Vista al microscopiode muestra de sangre, la
cual se fijo con etanol, después se le agrego
Hematoxilina, posteriormente se agrego Eosina y se
enjuago con agua de la llave. Se observan los
eritrocitos en rojo, y entre ellos se observa un
leucocito polimorfonucleadocon su núcleocolor lila.
Aumentada 1000 x.
Leucocito
polimorfonucleado
Fig. 3. Vista al microscopiode muestra de sangre, la cual se fijo
con etanol, después se le agrego Hematoxilina , posteriormente
se agregoEosina yse enjuago conagua de la llave. Eritrocitos
en rojo. En el ladoizquierdose observandos linfocitos con su
núcleo prominente teñido de morado. Aumentado 1000 x.
Linfositos
2. DISCUSION
La sangre (humor circulatorio) es un tejido fluido que tienen un color rojo característico,
debido a la presencia del pigmento hemoglobínico contenido en los eritrocitos.(1)
Tiene una fase sólida (elementos formes, que incluye a los glóbulos blancos, los glóbulos
rojos y las plaquetas) y una fase líquida, representada por el plasma sanguíneo.(1)
Esta práctica se trato de identificar el núcleo en las células sanguíneas por medio de
diferentes Tinciones.
Las células más abundantes son, con gran diferencia. (2) El eritrocito es un disco
bicóncavo de más o menos 7 a 7.5 μm de diámetro y de 80 a 100 fL de volumen. La célula
ha perdido su RNA residual y sus mitocondrias, así como algunas enzimas importantes; por
tanto es incapaz de sintetizar nuevas proteínas o lípidos. Los eritrocitos se derivan de las
células madre comprometidas denominadas hemocitoblasto. (3)
Los eritrocitos de los mamíferos no poseen núcleo cuando llegan a la madurez, es decir
que pierden su núcleo celular y por lo tanto su ADN.
Los leucocitos (también llamados glóbulos blancos) son un conjunto heterogéneo de
células sanguíneas que son los efectores celulares de la respuesta inmune, así intervienen
en la defensa del organismo contra sustancias extrañas o agentes infecciosos (antígenos).
(4) Son células con núcleo, mitocondrias y otros orgánulos celulares.
A la muestra fijada previamente con Etanol, se le aplico la Tinción de Hematoxilina-Eosina.
La hematoxilina es un colorante catiónico mientras que la eosina es un colorante aniónico
perteneciente a los xantenos. Se teñirán los núcleos de azul, citoplasmas en rosa, glóbulos
rojos en naranja o rojo y la fibrina en rosa intenso. (5)
Tal y como se observa en la Fig. 1 y 2 donde es posible observar los eritrocitos teñidos de
un color rojizo sin núcleo y a los leucocitos de un color lila con el núcleo teñido de un color
morado.
En los frotis obtenidos se pudo determinar un 98 % de eritrocitos en muestra coincidiendo
con la literatura que menciona que debe ser una valor superior al 95%. En cuanto a
leucocitos fue posible identificar por la morfología del su núcleo a linfocitos y a leucocitos
polimorfonucleados.
3. Tabla que resume las características de los componentes de la sangre.
CONCLUSION
En la extensión predominan los glóbulos rojos, hematíes o eritrocitos, teñidos de color rojo.
Son más delgados por el centro que por los bordes. Los de mamíferos no poseen núcleo
pero los del resto de los animales si lo tienen.
Los glóbulos blancos o leucocitos se identifican fácilmente por la presencia del núcleo y
estos se tiñen de color violeta.
Los eritrocitos son producidos continuamente en la médula ósea de los huesos largos, por los
tanto que no requieren una reproducción.
Los eritrocitos constituyen más del 95 % en la sangre y estos se tiñen de color rojizo.
En la sangre se pueden encontrar son las siguientes:
4. PREGUNTAS
1- ¿Que tiñen la hematoxilina y la Eusina?
Hematoxilina:Se utiliza en histología para teñir los componentes aniónicos (ácidos) delos tejidos,a
los que da una coloración violeta.Tiñeintensamente los núcleos de las células,dado que estos
contienen ácidos nucleicos ricosen radicales ácidos.
Eosina:es un coloranteácido decolor rosado oscuro usado en preparaciones histológicascuya
propiedad está basado en su polaridad negativa lo quele permite enlazarsecon constituyentes
celulares decarga positiva.Por ello colorea componentes y orgánulos citoplasmáticos mas no los
nucleares (por estar el ADN cargado negativamente). Aquellos componentes que se tiñen con
eosina son conocidos como acidófilos o eosinófilos.
2- ¿ Los eritrocitos sereproducen?
Los eritrocitos delos mamíferos no poseen núcleo cuando llegan a la madurez, es decir que pierden
su núcleo celular y por lo tanto su ADN.
Los eritrocitos son producidos continuamente en la médula ósea de los huesos largos.Asi queno
necesitan reproducirse.
BIBLIOGRAFIA
1- http://es.wikipedia.org/wiki/Circulaci%C3%B3n_sangu%C3%ADnea#Circulaci.C3.B3n_de_l
a_sangre
2- www.bioygeo.info/pdf/Frotis_sangre.pdf
3- http://es.wikipedia.org/wiki/Eritrocito
4- http://es.wikipedia.org/wiki/Leucocito
5- http://www.uam.es/departamentos/medicina/patologia/hematoxilina.htm
6- es.wikipedia.org/wiki/Linfocito