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  • Lesión de piel sospecha de Melanoma

Biopsia Biopsia Presentation Transcript

  • Biopsias Cátedra de Anatomía Patológica. Facultad de Medicina. U. N. T.
  • OBJETIVOS
    • Definir biopsia
    • Señalar los aspectos generales, características primordiales e importancia de una biopsia
    • Describir las principales características de los diferentes tipos de biopsias
    • Manejar el tejido bajo las normas adecuadas para su fijación, rotulación y envío.
    • Interpretar el informe anatomo patológico y su significado clínico terapéutico.
  • MÉTODOS DE LA ANATOMÍA PATOLÓGICA
    • Patología Postmortem. Autopsias
    • Patología Quirúrgica. Biopsias
    • Citopatología
    • Experimental
    • Otros
  • BIOPSIA
    • “ Método de la anatomía patológica que estudia los tejidos obtenidos de pacientes vivos con fines diagnosticos, pronósticos y de seguimiento”
  • TIPOS DE BIOPSIA
    • De órgano
      • Total
      • Parcial
      • Intraoperatoria
    • Punción Biopsia
    Incisional Excisional Dirigidas No dirigidas
  • TIPOS DE BIOPSIA
      • Dirigida
      • Endoscopica
      • Colposcópica
      • Dermatoscópica
      • Estereotaxica
    • No Dirigida
    • A ciegas
  • BIOPSIA INCISIONAL
      • Cuando toma parte de la lesión.
      • Ej: punch de en lesion extensa de piel
      • biopsia endoscópica en tumor >2cm
  • BIOPSIA ESCISIONAL
      • Cuando en la muestra se extrae la lesión en su totalidad.
      • Ej: losange de piel
      • polipectomía
  • BIOPSIA ESCISIONAL
  • BIOPSIA DE ÓRGANO
    • Consiste en el estudio de materiales obtenidos durante un acto quirúrgico, generalmente el material está representado por todo o parte de un órgano. El procesamiento se realiza en base a un protocolo pre establecido que indica pautas que van desde la apertura de la pieza hasta obtención de muestras representativas.
  • ÓRGANO TOTAL
  • ÓRGANO TOTAL
  • ÓRGANO PARCIAL
  • BIOPSIAS DIRIGIDAS
      • Biopsias endoscópicas: es un tipo de biopsia dirigida que permite la obtención del material de órganos huecos ( tubo digestivo, árbol respiratorio, vias urinarias) o cavidades (pleural, pericardica, abdominal)
  • BIOPSIAS DIRIGIDAS
      • Biopsias colposcopicas : se utilizan en lesiones precursoras de cuello uterino.
  • BIOPSIAS DIRIGIDAS
      • Biopsias estereotáxicas: con la ayuda de métodos imagenológicos se localiza tridimensionalmente la lesión y se obtiene tejido. Ej mama y SNC
  • BIOPSIA DIRIGIDA ENDOSCÓPICA
  • BIOPSIA INTRAOPERATORIA
    • Es el estudio del material obtenido durante el acto operatorio para determinar la naturaleza de la lesión y emitir un diagnóstico que permita al cirujano adoptar una conducta quirúrgica adecuada.
  • BIOPSIA INTRAOPERATORIA
    • Requiere de instrumental (criostato) y ambiente adecuados.
    • Se utiliza el tejido en fresco.
    • Fijador es el frío.
  • BIOPSIA INTRAOPERATORIA
  • BIOPSIA INTRAOPERATORIA
  • BIOPSIA INTRAOPERATORIA
  • BIOPSIA INTRAOPERATORIA: CONTROL DE MÁRGENES
  • BIOPSIA DIFERIDA CONTROL DE MÁRGENES
  • BIOPSIA POR PUNCIÓN
    • Consiste en la obtención de un cilindro de tejido del órgano afectado, utilizando agujas especiales de grueso calibre 0.2cm de diametro.
    • Se aplica para el diagnóstico de patologías que afectan a órganos parenquimatosos en forma difusa (cirrosis hepatica, glomerulopatias) o localizada solida (tumor)
    • El material obtenido se incluye totalmente y se procesa en forma seriada.
  • BIOPSIA POR PUNCIÓN
    • Puede realizarse :
    • A ciegas: sobre el sitio donde se sospecha que se encuentra la lesión.
    • Dirigida: mediante aparatos que permiten visualizar el sitio de punción (ecografía, TAC) Ej: punción biopsia de mama con mammotome .
  • BIOPSIA POR PUNCIÓN
  • BIOPSIA POR PUNCIÓN DIRIGIDA
  • BIOPSIA POR PUNCIÓN
  • BIOPSIA POR PUNCIÓN
  • PASOS A SEGUIR
    • Recepción del material : todo el material ingresado deberá ir acompañado de los datos personales del paciente, breve resumen de la Historia clínica, tipo y características, motivo del estudio solicitado y diagnóstico presuntivo.
    • Fijación : permite preservar la estructura y funcion de los tejidos e impedir la autolisis.
    • Consiste en sumergir el material en una solución de formol al 10 % en recipiente de boca ancha.
  • PASOS A SEGUIR
    • Macroscopía: consiste en la inspección del material y su descripción, lo más semejante a la realidad, indicando los siguientes aspectos:
    • ÓRGANOS PARENQUIMATOSOS
    • Tamaño, color, forma, superficie externa
    • Peso
    • Consistencia
    • Hallazgos
    • Superficie de corte
  • PASOS A SEGUIR
    • ÓRGANOS HUECOS
    • Tamaño, forma, serosa
    • Peso
    • Pared (espesor, consistencia, hallazgos)
    • Mucosa (color, pliegues, aspecto, hallazgos)
    • Luz
  • PASOS A SEGUIR
    • Existen protocolos de descripción macroscópica tipo.
    • Se complementa con la selección de muestras representativas, lo cual también está pre-establecido en los protocolos
  • PASOS A SEGUIR
    • Procesamiento histológico: Los pasos a seguir son:
      • Deshidratación: pases sucesivos en alcohol 96º, acetato (2) y Xilol (2). Permite extraer el agua de los tejidos.
      • Baño e inclusión en parafina
      • Corte
      • Coloración
  • PASOS A SEGUIR
    • Diagnóstico: en algunos casos se utilizan protocolos microscópicos o breves descripciones microscópicas seguidas por uno o más diagnósticos que incluirán datos de valor pronóstico y de orientación terapéutica.
  • INFORME ANATOMOPATOLÓGICO
    • Debe reunir las siguientes condiciones:
    • Datos del paciente
    • Descripción macro y microscópica detallada pero concreta
    • Protocolo
    • Diagnóstico jerarquizado
    • Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica.
  • BIBLIOGRAFÍA
    • Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992
    • Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989.
    • Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990
    • “ Guía de Métodos”. Sánchez Segura, M.; Nieman Y.;Cátedra de Anatomía Patológica, Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Tucumán, 2001.
  • Fin de la presentación
  • BIOPSIA ESTUDIOS COMPLEMENTARIOS Cátedra de Anatomía Patológica Facultad de Medicina U.N.T.
  • INFORME ANATOMOPATOLÓGICO
    • Debe reunir las siguientes condiciones:
    • Datos del paciente
    • Descripción macro y microscópica detallada pero concreta
    • Protocolo
    • Diagnóstico jerarquizado
    • Debe concretarse a los aspectos relacionados con el pronóstico y la terapéutica.
  • BIOPSIA
    • Técnica de rutina:
    • Hematoxilina- eosina
    • Coloraciones especiales:
    • Giemsa (Helicobacter Pylori)
    • Azul Alcian (Esófago de Barret)
    • Ziehl Nielsen (BAAR)
    • Rojo Congo (Amiloide)
    • PAS (Hongos)
  • OTROS MÉTODOS
    • Microscopía electronica
    • Inmunofluoresencia
    • Polarización
    • Inmunomarcación
    • Patología Molecular:
    • Captura híbrida
    • PCR
  • MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA
    • - Alcanza una magnificación de 500.000 aumentos.
    • -Utiliza un haz de electrones.
    • -Se enfoca por campos magnéticos sobre pantalla fluorescente o placas fotográficas.
    • -Se usa por ej. en patología glomerular para detectar cambios mínimos en podocitos,membranas basales,mesangio, etc.
  • INMUNOFLUORESCENCIA
    • En tejidos sin fijación.
    • Usa coloración fluorescente que debe registrarse microfotograficamente por que se degrada.
    • Forma un trípode diagnóstico para las enfermedades glomerulares con la ME y los cortes de rutina con H-E, PAS y Tricrómico
    •  
  • Depósitos lineales de IgG en Riñón. Sindrome de Goodpasture. X 100
  • POLARIZACIÓN
    • Identifica el carácter birrefringente de ciertos tipos de depósito fibrilar colágeno.
    • Por ejemplo: amiloide
  • INMUNOMARCACIÓN
    • Consiste en la detección de antígenos existentes en células o tejidos
    • Utiliza anticuerpos monoclonales o policlonales copulados con una enzima (peroxidasa) que se unen con dicho antígeno.
    • Se visualiza con microscopía óptica mediante coloración marrón del núcleo o citoplasma.
  • INMUNOMARCACIÓN
    • Epiteliales: citoqueratina 7 y 20.
    • Mesenquimáticos: vimentina, desmina.
    • Linfoides: antígeno común leucocitario-
    • SNC: S100, PGFA-
    • HMB 45: melanoma
  • CANCER DE MAMA Inmunomarcación Estrogénicos Progesterónicos Catepsina D C-erb B-2 (HER2-neu)
  • PATOLOGÍA MOLECULAR
    • Permite conocer el mecanismo por el cual se origina una neoplasia.
    • Aporta información de valor pronóstico.
    • Predice en algunos casos la respuesta a la terapia.
  • VALOR PRONÓSTICO
    • Cambio cromosómico primario: asociado a los mecanismos moleculares responsables de la neoplasia.
    • Cambio cromosómico secundario: la enfermedad sigue un curso más agresivo, haciéndose más resistente a la terapia y difícil de obtener una remisión completa.
    • Presencia o ausencia de células normales: La ausencia indica peor pronóstico.
    • Presencia de dobles diminutos: confiere mayor resistencia a la terapia.
  • TÉCNICA DE HIBRIDIZACIÓN IN SITU (HIS)
    • Permite detectar y localizar secuencias específicas de ADN o ARN.
    • Requiere de una desnaturalización (rotura de los enlaces) de ADN de la muestra y de la sonda utilizada.
    • Hibridación de los ADN de la muestra y la sonda por complementariedad de bases.
    • Interpretación microscópica de acuerdo a la sonda utilizada.
  • TIPOS DE SONDA
    • Centroméricas: marcan la región centromérica. Puede valorar la presencia o ausencia de alteraciones numéricas.
    • De pintado cromosómico: abarcan todo el cromosoma. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase y translocaciones complejas.
    • De secuencia única: marcan regiones cromosómicas muy concretas. Para alteraciones numéricas y estructurales en metafase e interfase.
  • NUEVAS TÉCNICAS DE HIS
    • Multicolor FISH: 24 sondas de marcado cromosómico marcados con fluorescencia sobre metafase.
    • Mulibanding FISH: alteración estructural dentro de un mismo cromosoma, utiliza células en división.
    • Hibridación Genómica comparada (HGC): detecta cambios numéricos de secuencias de ADN en tumores de índice proliferativo bajo.
  •  
  •  
  •  
  • MICROARRAYS
    • Son soportes sólidos en los que moléculas de ADN de cadena simple se fijan y permiten identificar por hibridación la expresión de una multitud de genes de una muestra biológica.
    • Aislamiento de ARN de tejido normal y de una muestra de referencia.
    • Síntesis de ADN y marcaje con dos colorantes fluorescentes (Cy3 y Cy5).
    • Hibridación sobre el array.
    • La diferencia de expresión del ARN entre ambos tejidos se puede evaluar a partir de la relación Cy3/Cy5 para cada gen.
    • El análisis nos permite definir el patrón de expresión génica para cada muestra concreta.
  • MICROARRAYS
    • Principales aplicaciones:
    • Clasificación de neoplasias morfológicamente similares pero con comportamiento biológico heterogéneo.
    • Evaluación del pronóstico.
    • Respuesta al tratamiento.
  • PCR
    • Preparación y dosaje de ácidos nucleicos (ADN-ARN) por reacción en cadena de polimerasa (PCR), técnica de amplificación in vitro de secuencias conocidas del genoma, que permite la detección de deleciones, mutaciones o rearreglos cromosómicos
  • PCR
  • NO OLVIDAR
    • Conocer datos clínicos y exámenes complementarios del paciente.
    • Seleccionar el tipo de biopsia a realizar según la patología y órgano afectado.
    • Envío del material en óptimas condiciones y con los datos pertinentes.
    • Fijación y procesamiento adecuados.
    • Descripción macroscópica.
    • Diagnósticos microscópicos.
    • Aspectos relacionados con el pronóstico y terapéutica.
  • BIBLIOGRAFÍA
    • Besuschio, S.C.. Patología general. Ed. El Ateneo. Bs As .1992
    • Cooke, R. A. Stewart, B. Atlas de Anatomía Patológica. Ed. Doyma.1989.
    • Cotran R.S.; Kumar, V.y Robbins, S.. Patología estructural y funcional. 4º Ed. 1990
    • XXII Congreso de la SEAP. Curso largo de Patología Molecular. 2005
    • XXII Congreso de la SEAP. Aplicaciones diagnósticas del FISH en Patología. 2005
    • XXII Congreso de la SEAP. Seminario del club de Inmunohistoquímica y Patología Molecular. 2005
  • Fin de la presentación