ENZIMAS DE
RESTRICCION
Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca
Katherine Ibañez Riveros
Biologia Molecular y Celular IV D
DEFINICION
• Las enzimas de restricción, también conocidas como
endonucleasas, son enzimas que cortan los enlaces
fosfodié...
CORTE ESPECÍFICO DEL
ADN
Las enzimas de restricción al cortar DNA pueden producir
dos tipos de cortes:
• Abruptos: cortan ...
• Cohesivos o pegajosos: cortan a manera escalonada en
dos puntos diferentes
• Los extremos libres que quedan se llaman ex...
Actuación de las enzimas de restricción.
Son extraídas de organismos
procarióticos (bacterias), donde
actúan como un mecan...
TIPOS
• Tipo I: Una sola enzima (multimérica que posee 3
subunidades) reconoce la secuencia específica de ADN,
métila y re...
• Tipo III: Es similar al sistema tipo I, utilizan una enzima
oligomérica que realiza todas las actividades
enzimáticas, y...
MAPA DE RESTRICCIÓN
• Un patrón de ADN generado mediante electroforesis que
se produce después de cortar con una enzima de...
Tamaño de los fragmentos de
restricción
Los fragmentos generados a través de la digestión por
enzimas de restricción puede...
NOMENCLATURA
• 1º. Tres letras que corresponden al nombre científico del
microorganismo (ej. Escherichia coli (Eco); Haemp...
Nomenclatura Ejemplo Corresponde a:
E Escherichia Género de la bacteria
co coli Especie de la bacteria
R RY13 Cepa de la b...
WEBGRAFIA
• http://www.uprm.edu/biology/cursos/biologiageneral/Enzim
• http://smcg.ccg.unam.mx/actividades/divulgacion/1er...
Upcoming SlideShare
Loading in...5
×

Enzimas de restriccion

3,097

Published on

0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total Views
3,097
On Slideshare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
0
Actions
Shares
0
Downloads
119
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

No notes for slide

Enzimas de restriccion

  1. 1. ENZIMAS DE RESTRICCION Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca Katherine Ibañez Riveros Biologia Molecular y Celular IV D
  2. 2. DEFINICION • Las enzimas de restricción, también conocidas como endonucleasas, son enzimas que cortan los enlaces fosfodiéster del material genético a partir de una secuencia que reconocen. Las mismas permiten cortar ADN de hebra doble, donde reconocen secuencias palindrómicas (secuencias que se leen igual en ambas direcciones).
  3. 3. CORTE ESPECÍFICO DEL ADN Las enzimas de restricción al cortar DNA pueden producir dos tipos de cortes: • Abruptos: cortan en un sólo punto. • Cada enzima de restricción reconoce una secuencia específica de nucleótidos y corta en ese punto cada una de las cadenas de ADN.
  4. 4. • Cohesivos o pegajosos: cortan a manera escalonada en dos puntos diferentes • Los extremos libres que quedan se llaman extremos pegajosos, porque pueden unirse a otros fragmentos de ADN que hayan sido cortados por la misma enzima de restricción.
  5. 5. Actuación de las enzimas de restricción. Son extraídas de organismos procarióticos (bacterias), donde actúan como un mecanismo de defensa, para degradar material genético extraño que entre en la célula. Las bacterias tienen la capacidad de metilar su ADN, lo cual sirve para distinguir entre el ADN extraño y el ADN propio
  6. 6. TIPOS • Tipo I: Una sola enzima (multimérica que posee 3 subunidades) reconoce la secuencia específica de ADN, métila y restringe. Pero la restricción no ocurre en el sitio de reconocimiento, sino que es al azar y en sitios distantes al de reconocimiento. • Tipo II: La restricción ocurre en el sitio de reconocimiento. Estas enzimas tipo II son las utilizadas en genética molecular puesto que permiten romper el ADN en sitios específicos, y así, recuperar secuencias conocidas.
  7. 7. • Tipo III: Es similar al sistema tipo I, utilizan una enzima oligomérica que realiza todas las actividades enzimáticas, y rompen el DNA 25-27 bp, más allá del sitio de reconocimiento. • Ejemplo:
  8. 8. MAPA DE RESTRICCIÓN • Un patrón de ADN generado mediante electroforesis que se produce después de cortar con una enzima de restricción. La representación de una molécula de ADN, ya sea circular o lineal, donde se indiquen los sitios de restricción que poseen, se denomina mapa de restricción.
  9. 9. Tamaño de los fragmentos de restricción Los fragmentos generados a través de la digestión por enzimas de restricción pueden ser analizados con la técnica de electroforesis agarosa.
  10. 10. NOMENCLATURA • 1º. Tres letras que corresponden al nombre científico del microorganismo (ej. Escherichia coli (Eco); Haempphilus influenzae (Hin) ) • 2º. La cepa o estirpe si la hubiese (ej. EcoR, aislada de la cepa RY13 de E. coli ) • 3º. En números romanos, un número para distinguir si hay más de una endonucleasa aislada de esa misma especie. No confundir con el tipo de enzima de restricción. • 4º. Todas deberían llevar delante una R de restricción o un M de metilasa según la función de la enzima, pero generalmente se omite.
  11. 11. Nomenclatura Ejemplo Corresponde a: E Escherichia Género de la bacteria co coli Especie de la bacteria R RY13 Cepa de la bacteria I La primera enzima identificada Orden de identificación de la enzima en la bacteria Enzima Origen Bacteriano Sitio de Reconocimiento Resultado del Corte EcoRI Escherichia coli 5'GAATTC 3'CTTAAG 5'---G AATTC---3' 3'--- CTTAA G---5' BamHI Bacillus amyloliquefaciens 5'GGATCC 3'CCTAGG 5'---G GATCC---3' 3'--- CCTAG G---5' DpnI* Diplococcus pneumoniae CH3 | 5'GATC 3'CTAG | CH3 CH3 | 5'---GA TC---3' 3'- --CT AG---5' | CH3
  12. 12. WEBGRAFIA • http://www.uprm.edu/biology/cursos/biologiageneral/Enzim • http://smcg.ccg.unam.mx/actividades/divulgacion/1erTDCG_eldnavaalaesc uela/doctos/2da_sesion_TDCG.pdfasDNA.htm • http://2012.igem.org/wiki/images/7/78/Enz.pdf
  1. ¿Le ha llamado la atención una diapositiva en particular?

    Recortar diapositivas es una manera útil de recopilar información importante para consultarla más tarde.

×