O documento descreve uma atividade científica para jovens durante as férias realizada na Universidade de Trás-os-Montes e Alto Douro (UTAD) com o tema "Viagem da célula ao meio ambiente". O programa incluiu introdução à biomonitorização, desenvolvimento de embriões de peixe-zebra em meios com tabaco, dissecação e análise de peixes, saída de campo e histologia animal e vegetal. A atividade foi liderada por uma equipa de professores e investigadores da UTAD e contou com

1. OCUPAÇÃO CIENTÍFICA DE JOVENS NAS FÉRIASOCUPAÇÃO CIENTÍFICA DE JOVENS NAS FÉRIAS
“Viagem da célula ao meio ambiente”“Viagem da célula ao meio ambiente”
UTADUTAD
OCUPAÇÃO CIENTÍFICA DE JOVENS NAS FÉRIASOCUPAÇÃO CIENTÍFICA DE JOVENS NAS FÉRIAS
“Viagem da célula ao meio ambiente”“Viagem da célula ao meio ambiente”
UTADUTAD

2. OCUPAÇÃO CIENTÍFICA DE JOVENS NAS FÉRIASOCUPAÇÃO CIENTÍFICA DE JOVENS NAS FÉRIAS
““Viagem da célula ao meio ambiente”Viagem da célula ao meio ambiente”
João Pereira e Rafael SilveiraJoão Pereira e Rafael Silveira
UTAD - julho de 2014UTAD - julho de 2014

3. EQUIPA FORMADORA:EQUIPA FORMADORA:
» Prof. Dr. João Carrola» Prof. Dr. João Carrola
» Ana Fraga» Ana Fraga
» Prof.ª Dr.ª Mariza Monteiro» Prof.ª Dr.ª Mariza Monteiro
»» Prof.ª Dr.ªProf.ª Dr.ª Eunice BacelarEunice Bacelar
»» Prof.ª Dr.ªProf.ª Dr.ª Berta MacedoBerta Macedo
»» Dr. Luís FelixDr. Luís Felix
» Dr.ª Ana Coimbra» Dr.ª Ana Coimbra
EQUIPA FORMADORA:EQUIPA FORMADORA:
» Prof. Dr. João Carrola» Prof. Dr. João Carrola
» Ana Fraga» Ana Fraga
» Prof.ª Dr.ª Mariza Monteiro» Prof.ª Dr.ª Mariza Monteiro
»» Prof.ª Dr.ªProf.ª Dr.ª Eunice BacelarEunice Bacelar
»» Prof.ª Dr.ªProf.ª Dr.ª Berta MacedoBerta Macedo
»» Dr. Luís FelixDr. Luís Felix
» Dr.ª Ana Coimbra» Dr.ª Ana Coimbra
ESTAGIÁRIOS:ESTAGIÁRIOS:
João Pereira Rafael SilveiraJoão Pereira Rafael Silveira
ESTAGIÁRIOS:ESTAGIÁRIOS:
João Pereira Rafael SilveiraJoão Pereira Rafael Silveira
Figura 1 – Edifício de Geociências, UTAD (João Carrola)

4. HORÁRIO DA SEMANAHORÁRIO DA SEMANAHORÁRIO DA SEMANAHORÁRIO DA SEMANA

5. SEGUNDA FEIRASEGUNDA FEIRASEGUNDA FEIRASEGUNDA FEIRA
TardeTardeTardeTarde Introdução à BiomonitorizaçãoIntrodução à Biomonitorização
Compostos desreguladores endócrinos (CDE´s);Compostos desreguladores endócrinos (CDE´s);
Impactos dos CDE´s nos vários níveis das cadeias tróficas;Impactos dos CDE´s nos vários níveis das cadeias tróficas;
TEMAS ABORDADOS:TEMAS ABORDADOS:
Impactos dos CDE´s no Homem;Impactos dos CDE´s no Homem;
Impactos dos CDE´s em ambientes aquáticos;Impactos dos CDE´s em ambientes aquáticos;
Nano partículas;Nano partículas;
Nano poluição.Nano poluição.

6. TERÇA FEIRATERÇA FEIRATERÇA FEIRATERÇA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã
1. Desenvolvimento de embriões do1. Desenvolvimento de embriões do
peixe-zebra em meio com soluçãopeixe-zebra em meio com solução
diluída de tabacodiluída de tabaco
PROCEDIMENTO LABORATORIAL:PROCEDIMENTO LABORATORIAL:
Realizou-se a recolha, seleção e contagem deRealizou-se a recolha, seleção e contagem de
ovos do peixe-zebra (ovos do peixe-zebra (Danio rerioDanio rerio) que foram) que foram
colocados em recipientes com solução diluídacolocados em recipientes com solução diluída
de tabaco a concentrações diferentes e umde tabaco a concentrações diferentes e um
grupo de controlo.grupo de controlo.

7. TERÇA FEIRATERÇA FEIRATERÇA FEIRATERÇA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã 2. Dissecação do peixe2. Dissecação do peixe
PROCEDIMENTO LABORATORIAL:PROCEDIMENTO LABORATORIAL:
1.1. Realizou-se a captura de uma truta criada emRealizou-se a captura de uma truta criada em
laboratório em condições controladas que foilaboratório em condições controladas que foi
abatida segundo as normas de Bioética emabatida segundo as normas de Bioética em
vigor;vigor;
2.2. Procedeu-se a uma colheita de sangue ao nível daProcedeu-se a uma colheita de sangue ao nível da
veia caudal com o qual se preparou umveia caudal com o qual se preparou um
esfregaço;esfregaço;
3.3. Procedeu-se à recolha de arcos branquiais;Procedeu-se à recolha de arcos branquiais;
4.4. Abriu-se a truta e procedeu-se à recolha de fígado,Abriu-se a truta e procedeu-se à recolha de fígado,
bílis, rim, bexiga natatória, gonadas, estômagobílis, rim, bexiga natatória, gonadas, estômago
e músculo todos estes conservados em formol.

8. Figura 2 – Realização de um esfregaço com sangue de truta.

9. Figura 3 – Dissecação da truta para recolha de órgãos.

10. Figura 4 – Esquema da estrutura interna de um peixe ósseo fémea.

11. TERÇA FEIRATERÇA FEIRATERÇA FEIRATERÇA FEIRA
TardeTardeTardeTarde
Preparação e visualização aPreparação e visualização a
microscópio ótico de um esfregaçomicroscópio ótico de um esfregaço
de sangue de trutade sangue de truta
PROCEDIMENTO LABORATORIAL:PROCEDIMENTO LABORATORIAL:
1- Procedeu-se a fixação do sangue em1- Procedeu-se a fixação do sangue em metanolmetanol;;
2- Realizou-se uma coloração com solução E2- Realizou-se uma coloração com solução Eosina azulosina azul
de metilenode metileno;;
3- Deixou-se secar durante 15 minutos;3- Deixou-se secar durante 15 minutos;
4- Seguiu-se a montagem em4- Seguiu-se a montagem em entellan;entellan;
5- Realizou-se a visualização ao microscópio.5- Realizou-se a visualização ao microscópio.

12. Figura 5 – Coloração do esfregaço de sangue de truta.

13. TERÇA FEIRATERÇA FEIRATERÇA FEIRATERÇA FEIRA
TardeTardeTardeTarde Saída de campoSaída de campo
Saída de campo para observação do estado de saúdeSaída de campo para observação do estado de saúde
de um ecossistema fluvial, através da contagem ede um ecossistema fluvial, através da contagem e
identificação de espécies bioindicadoras.identificação de espécies bioindicadoras.

14. Figura 6 – Pesca de organismos aquáticos.

15. Figura 7 – Pesca de organismos aquáticos.

16. QUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã
1. Desenvolvimento de ovos do1. Desenvolvimento de ovos do
peixe zebra em meio com soluçãopeixe zebra em meio com solução
diluída de tabacodiluída de tabaco
Dia 1Dia 1Dia 1Dia 1Concentração em tabacoConcentração em tabaco

18. QUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã 2. Histologia animal2. Histologia animal
PROCEDIMENTO LABORATORIAL:PROCEDIMENTO LABORATORIAL:
Observou-se ao microscópio ótico preparaçõesObservou-se ao microscópio ótico preparações
definitivas de:definitivas de:
- Órgãos do peixe zebra (gónadas, brânquias)- Órgãos do peixe zebra (gónadas, brânquias)
- Um peixe zebra de pequenas dimensões cortado- Um peixe zebra de pequenas dimensões cortado
longitudinalmente.longitudinalmente.
Aquisição de conhecimentos relativos ao modo deAquisição de conhecimentos relativos ao modo de
trabalho com o microscópio ótico (fotónico) e com otrabalho com o microscópio ótico (fotónico) e com o
microscópio eletrónico.microscópio eletrónico.

19. Figura 8 – Observação de arcos branquiais.

20. QUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRA
TardeTardeTardeTarde Histologia vegetalHistologia vegetal
PROCEDIMENTO LABORATORIAL:PROCEDIMENTO LABORATORIAL:
» Recolha no campus da universidade de folhas de» Recolha no campus da universidade de folhas de
camélia (camélia (Camellia japonica););
» Elaboração de vários tipos de preparações que» Elaboração de vários tipos de preparações que
foram visualizadas a microscópio, com o objetivo deforam visualizadas a microscópio, com o objetivo de
ver e identificar diferentes tecidos e estruturasver e identificar diferentes tecidos e estruturas
presentes na folha da camélia.presentes na folha da camélia.

21. Figura 9 – Recolha de folhas da camélia

22. Camellia japonica
Espécie: Camellia japonica
Família: Theaceae
Ordem: Ericales
Sub-classe: Asteridae
Classe: Magnoliopsida
Sub-divisão: Magnoliophytina
(Angiospermae)
Divisão: Spermatophyta
Tipo Fisionómico: Microfanerófito
Distribuição Geral: E Ásia (S China,
S Japão e S Coreia); largamente
cultivada pelas flores
Época Floração: Janeiro - Março
in;:
http://jb.utad.pt/especie/camellia_japonica

23. QUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRA
TardeTardeTardeTarde Histologia vegetalHistologia vegetal
Preparação em fresco:Preparação em fresco:
1 – Procedeu-se a um corte da folha com o micrótomo1 – Procedeu-se a um corte da folha com o micrótomo
de mão;de mão;
2 – Humidificou-se a amostra e colocou-se na lâmina2 – Humidificou-se a amostra e colocou-se na lâmina
cobrindo com a lamela;cobrindo com a lamela;
3 – Observação a fresco de todos os constituintes de3 – Observação a fresco de todos os constituintes de
folha.folha.

24. Figura 10 – Corte da folha com o micrótomo de mão.

25. Figura 11 – Humidificação das amostras recolhidas.

26. QUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRA
TardeTardeTardeTarde Histologia vegetalHistologia vegetal
Coloração do corte fresco com sudão III:Coloração do corte fresco com sudão III:
1 - Corou-se com Sudão III as amostras1 - Corou-se com Sudão III as amostras
recolhidas, previamente cortadas com orecolhidas, previamente cortadas com o
micrómetro de mão.micrómetro de mão.
2 – Observou-se no microscópio a cutícula2 – Observou-se no microscópio a cutícula
da folha, agora corada de vermelho.da folha, agora corada de vermelho.
Figura 12 – Frasco de
Sudão III (corante
vermelho).

27. QUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRA
TardeTardeTardeTarde Histologia vegetalHistologia vegetal
Coloração definitiva pelo verde iodo e carmim aluminado:Coloração definitiva pelo verde iodo e carmim aluminado:
1 - Lavagem dos cortes da folha recolhidos em água de javel durante 151 - Lavagem dos cortes da folha recolhidos em água de javel durante 15
minutos;minutos;
2 – Lavou-se em água corrente;2 – Lavou-se em água corrente;
3 – Passagem em água acética;3 – Passagem em água acética;
4 – Lavou-se novamente em água corrente;4 – Lavou-se novamente em água corrente;
5 – Mergulho das amostras em verde iodo durante 5 minutos;5 – Mergulho das amostras em verde iodo durante 5 minutos;
6 – Lavou-se em água corrente;6 – Lavou-se em água corrente;
7 – Filtrou-se o carmim aluminado e mergulhou-se as amostras durante 157 – Filtrou-se o carmim aluminado e mergulhou-se as amostras durante 15
minutos;minutos;
8 – Lavou-se em água corrente;8 – Lavou-se em água corrente;
9 – Desidratou-se os fragmentos em álcool (70%, 80%, 90%, 95% e 100%);9 – Desidratou-se os fragmentos em álcool (70%, 80%, 90%, 95% e 100%);
10 – Diafanização em xilol durante 5 minutos;10 – Diafanização em xilol durante 5 minutos;
11 – Montagem em bálsamo;11 – Montagem em bálsamo;
12 – Visualização e identificação dos vasos condutores de xilema e floema12 – Visualização e identificação dos vasos condutores de xilema e floema
em microscópio.em microscópio.

28. Figura 13 – Preparação do banho em Verde Iodo.

29. Figura 14 – Banho das amostras em Carmim Aluminado.

30. Nota:Nota:
» Tecidos mortos» Tecidos mortos
(como o xilema)(como o xilema)
são corados pelosão corados pelo
verde iodo.verde iodo.
» Tecidos vivos» Tecidos vivos
(como o floema)(como o floema)
são corados pelosão corados pelo
rosa carmim.rosa carmim.
Figura 15 – Banho das amostras em Carmim Aluminado.

31. QUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRAQUARTA FEIRA
TardeTardeTardeTarde Histologia vegetalHistologia vegetal
Visualização da página superior e inferior da folha:Visualização da página superior e inferior da folha:
1- Cobriu-se a folha com verniz transparente;1- Cobriu-se a folha com verniz transparente;
2 – Depois de secar retirou-se a pelicula formada com2 – Depois de secar retirou-se a pelicula formada com
o auxilio de um bisturi;o auxilio de um bisturi;
Figura 16 – Aplicação do verniz.

32. Conclusão:Conclusão:
Não se observou estomas na páginaNão se observou estomas na página
superior da folha por oposição à páginasuperior da folha por oposição à página
inferior onde existe grande quantidade deinferior onde existe grande quantidade de
estomas.estomas.

33. QUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã
1. Desenvolvimento de ovos do1. Desenvolvimento de ovos do
peixe zebra em meio com soluçãopeixe zebra em meio com solução
diluída de tabacodiluída de tabaco
Dia 2Dia 2Dia 2Dia 2Concentração em tabacoConcentração em tabaco

35. QUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã Corte definitivo da folha de caméliaCorte definitivo da folha de camélia
» Folha bifacial (2 faces diferentes)
» Mesófilo heterogéneo (parênquima clorofilino em paliçada e parênquima clorofilino
lacunoso)
»Distribuição hipoestomática (estomas na página inferior)

36. QUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã Nervura principal da folhaNervura principal da folha
11
22
33
44

37. QUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã Limbo/LâminaLimbo/Lâmina
11 22
33
44
55 66
77

38. QUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã Cristais de oxalato de cálcioCristais de oxalato de cálcio
Cristais de oxalato de cálcioCristais de oxalato de cálcio

39. QUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRAQUINTA FEIRA
ManhãManhãManhãManhã Réplica de colódioRéplica de colódio
11
22
33

40. Bibliografia:
• http://www.utad.pt/SiteCollectionImages/Backgrounds/Campus%20da%20UTAD%20-
%20Edif%C3%ADcio%20de%20Geo-ci%C3%AAncias.jpg
Consultado em: 08/07/2014 - 23:00h
• http://trajando.pt/wp-content/uploads/2013/12/utad1.png
Consultado em: 08/07/2014 - 23:00h
• http://www.biodiversity4all.org/UserFiles/image/logo_cv.jpg
Consultado em: 08/07/2014 - 23:00h
• http://www.ciencias.seed.pr.gov.br/modules/galeria/uploads/2/normal_876anatomia_peixe
_osseo.jpg
Consultado em 09/07/2014 – 08:20h

41. Fim…

42. OCUPAÇÃO CIENTÍFICA DE JOVENS NAS FÉRIASOCUPAÇÃO CIENTÍFICA DE JOVENS NAS FÉRIAS
““Viagem da célula ao meio ambiente”Viagem da célula ao meio ambiente”
João Pereira e Rafael SilveiraJoão Pereira e Rafael Silveira
UTAD - julho de 2014UTAD - julho de 2014
Tornado público por: João Miguel Pereira