Poster 44 biochimie

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Variation des fractions de l’hémoglobine à l’électrophorèse après congélation

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Poster 44 biochimie

  1. 1. Variation des fractions de l’hémoglobine à l’électrophorèse après congélation Mtibaa Hana, Mnif.E, Turki.M, Naifar.M, Bouchekoua.N, Trigui.W, Lahyani.A, Ayedi.F Laboratoire de biochimie, CHU Habib.Bourguiba, Sfax, Tunisie 2011 Biochimie Biochemistry Poster 44
  2. 2. Introduction <ul><li>Les hémoglobinopathies :affections génétiques graves </li></ul><ul><li>diagnostic précoce et surveillance </li></ul><ul><li>L’électrophorèse capillaire de l’Hb: </li></ul><ul><li>étude semi quantitative des fractions de l’Hb </li></ul><ul><li>conditions de conservation des échantillons </li></ul><ul><li>L’objectif de notre travail est d’étudier l’effet de la congélation sur les profils éléctrophorétiques de l’Hb par méthode capillaire. </li></ul>
  3. 3. Matériels et méthodes <ul><li>32 échantillons de sang total prélevés sur EDTA </li></ul><ul><li>Trois protocoles de conservation: </li></ul><ul><li>sang total conservé 7 jours à + 4°C </li></ul><ul><li>culot globulaire lavé et congelé 7 jours et 14 jours à -20°C </li></ul><ul><li>L’électrophorèse capillaire de l’Hb sur Capillarys de SEBIA ® </li></ul><ul><li>Contrôle de qualité interne:2 niveaux: Hb A2 normal, Hb AFSC </li></ul><ul><li>Les variants de l’Hb: </li></ul><ul><li>Hb C, A2, S, F, A: respectivement dans les zones Z2, Z3, Z5, Z7et Z9 </li></ul><ul><li>Analyse statistique: logiciel SPSS 13.0. </li></ul><ul><li>probabilité p < 0,05 significative </li></ul>
  4. 4. Résultats Tableau I : les catégories des échantillons analysés à l’état frais Profils physiologiques pathologiques Catégorie de sang Sang foetal Sang adulte normal Sang beta thalassémique Sang drépanocytaire Nombre d’échantillons 6/32 18,75% 20/32 62,5% 3/32 9,37% 3/32 9,37% Caractéristique électrophorétique Hb F majoritaire Hb A majoritaire Hb A2 > 3,5 % Hb S présente
  5. 5. Résultats Figure 1 : La variation des différents variants d’ Hb en fonction du protocole de conservation
  6. 6. Tableau II  : Comparaison des moyennes des variants de l’Hb en fonction de la modalité et de la durée de conservation Echantillon Frais Congélation 7j à -20°C Congélation 15j à -20°C Moyenne ± ecart-type p Moyenne ± ecart-type p Hb A 74.7 ± 33.3 74.5±30.7 0.716 73.2±28 0.228 Hb A2 2.9±1.3 2.5±1.3 0.0001* 2.4±1.3 0.000* Hb F 22.4±34.8 22.6±33.6 0.018* 23.4±32.5 0.022* Hb S 49.5±19.7 47.7±16.5 0.560 45.8±16.7 0.228 Hb var Z11 0 2.9±2.1 - 5.5±3.3 -
  7. 7. Résultats Figure 2  : Moyennes des variations des différents variants de l’Hb en fonction de la durée de congélation
  8. 8. Discussion/Conclusion <ul><li>La congélation à -20°C 7 jours et 15 jours </li></ul><ul><li>diminution du % de fractions de l’Hb : HbA, A2 et S secondaire à un éventuel mécanisme de dénaturation de l’Hb (HbA dénaturée Z11 et HbS dénaturée Z7) </li></ul><ul><li>Diminution significative de la moyenne de HbA2 après congélation sans affecter la valeur prédictive positive de l’électrophorèse de l’Hb en terme de diagnostic des  thalassémies. </li></ul><ul><li>Augmentation significative du % HbF après la congelation à -20°C contrastant avec sa disparition pour 4 échantillons de sang = migration simultanée dans la zone Z7 des 2 variants HbF et HbS dénaturée. </li></ul><ul><li>Etude des moyennes des variations de chaque fraction de l’Hb suite à la congélation entre 7 jours et 15 jours </li></ul><ul><li>Une variation significative de l’Hb A2 et de l’Hb S </li></ul><ul><li>Recommandation </li></ul><ul><li>congélation du culot globulaire rouge lavé à -20°C au maximum 7 jours </li></ul>

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