TÉCNICAS DEMICROMANIPULACIÓNCÓMO MEJORAR LAS TASA DE      GESTACIÓN        ESTHER GREGORI MACHÍ          Licenciada en Bio...
HISTORIAPatrick Steptoe y Robert Edwards Primer “bebé probeta”. Louise Brown, 1978.
HISTORIA                             FIV convencionalComplejo Cumulo-Corona-Ovocito        Cultivo ovocito-espermatozoides
EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN
EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN
EL OVOCITO   Espacio Perivitelino                  Zona Pelúcida: glicoproteínasOoplasma     Oolema
Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• “Zona Drilling”: ácido Tyrodes.• “Partial Zona Dissection” PZD: incisión en la ZP.• “Subzon...
Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• ICSI “Intracytoplasmic Sperm Injection”: “Pregnancies afterintracytoplasmic injection of si...
Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• ICSI• IMSI• Assisted Hatching: Eclosión Asistida.• Eliminación de fragmentos.• Transferenci...
ICSI• Denudación ovocitaria: Hyaluronidasa + pipeteo mecánico• Caja de ICSI
Técnicas de MICROMANIPULACIÓNOvocito VG                        Ovocito MI                    Ovocito MII
ICSI – Indicaciones• Factor masculino grave: oligozoospermia, asteno, terato.• Factor inmunológico: presencia Ac-antispz.•...
ICSI - Modificaciones• Ebner y cols., 2002: presión y succión• Rienzi y cols, 2001.  Nagy y cols., 2002: ICSI por láser.• ...
IMSI: ICSI Altamente Magnificada
ASSISTED HATCHING• Cohen, 1989.• Objetivo: mejorar el potencial implantatorio.• Metodología: perforación o adelgazamiento ...
ASSISTED HATCHING• INDICACIONES recomendadas:  •   Ovocitos de pacientes mayores 37 años.  •   Ovocitos ZP engrosada, colo...
ELIMINACIONDE FRAGMENTOS
TRANSFERENCIA de CITOPLASMA• Hipótesis: efectos ooplasma interfieren endesarrollo e implantación.• Ha habido embarazos per...
CONTRACCIÓN ARTIFICIAL       CAVIDAD BLASTOCELE• Blastocele: cavidad llena de agua.• Para mejorar la vitrificación: reducc...
FUTUROCLONACION- Transferencia Nuclear de Células Somáticas(SCNT)- Clonación TERAPÉUTICA- Clonación REPRODUCTIVACÉLULAS MA...
MUCHAS GRACIAS
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Tecnicas de micromanipulacion en reproduccion asistida

  1. 1. TÉCNICAS DEMICROMANIPULACIÓNCÓMO MEJORAR LAS TASA DE GESTACIÓN ESTHER GREGORI MACHÍ Licenciada en Biología. Máster en Biología Clínica y Experimental de la Reproducción. Instituto FIVIR
  2. 2. HISTORIAPatrick Steptoe y Robert Edwards Primer “bebé probeta”. Louise Brown, 1978.
  3. 3. HISTORIA FIV convencionalComplejo Cumulo-Corona-Ovocito Cultivo ovocito-espermatozoides
  4. 4. EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN
  5. 5. EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN
  6. 6. EL OVOCITO Espacio Perivitelino Zona Pelúcida: glicoproteínasOoplasma Oolema
  7. 7. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• “Zona Drilling”: ácido Tyrodes.• “Partial Zona Dissection” PZD: incisión en la ZP.• “Subzonal Insertion” SUZI: inserción de spzs en el espacio perivitelino.• Yanagimachi, 1976.
  8. 8. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• ICSI “Intracytoplasmic Sperm Injection”: “Pregnancies afterintracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte”, Palermoy cols., 1992.
  9. 9. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• ICSI• IMSI• Assisted Hatching: Eclosión Asistida.• Eliminación de fragmentos.• Transferencia de citoplasma.• DGP: biopsia CP o blastómeras.FUTURO:• Clonación.• Células madre.• Transgénicos.
  10. 10. ICSI• Denudación ovocitaria: Hyaluronidasa + pipeteo mecánico• Caja de ICSI
  11. 11. Técnicas de MICROMANIPULACIÓNOvocito VG Ovocito MI Ovocito MII
  12. 12. ICSI – Indicaciones• Factor masculino grave: oligozoospermia, asteno, terato.• Factor inmunológico: presencia Ac-antispz.• “Sémenes valiosos”• Fallos previos de FIV.• DGP• Baja respuesta.• Mala calidad ovocitaria.• Ovocitos desvitrificados.
  13. 13. ICSI - Modificaciones• Ebner y cols., 2002: presión y succión• Rienzi y cols, 2001. Nagy y cols., 2002: ICSI por láser.• Tesarik y cols., 2002: dislocación ooplasma.• Baltaci y cols., 2009: activación piezoeléctrica.
  14. 14. IMSI: ICSI Altamente Magnificada
  15. 15. ASSISTED HATCHING• Cohen, 1989.• Objetivo: mejorar el potencial implantatorio.• Metodología: perforación o adelgazamiento ZP - Zona Drilling, - PZD - Ablación por láser - Tratamiento enzimáticoBalaban, 2002: evaluó los cuatro métodosdiferentes y concluyó que tenían similares tasasde implantación y embarazo.
  16. 16. ASSISTED HATCHING• INDICACIONES recomendadas: • Ovocitos de pacientes mayores 37 años. • Ovocitos ZP engrosada, color anormal. • Valores elevado de FSH basal sérica. • Fracaso repetido de implantación. • Embriones de baja calidad. • Embriones congelados/descongelados. Mayor incidencia gemelos monocigóticos yembarazos ectópicos.
  17. 17. ELIMINACIONDE FRAGMENTOS
  18. 18. TRANSFERENCIA de CITOPLASMA• Hipótesis: efectos ooplasma interfieren endesarrollo e implantación.• Ha habido embarazos pero faltan estudioscontrolados para verificar sus beneficios.• Futuro: implicaciones éticas.
  19. 19. CONTRACCIÓN ARTIFICIAL CAVIDAD BLASTOCELE• Blastocele: cavidad llena de agua.• Para mejorar la vitrificación: reducciónblastocele y salida del agua.• Las tasas de embarazo mejoran al compararlocon un grupo control sin micromanipular.• Mukaida: láser para contracción. Método mássimple y conveniente.
  20. 20. FUTUROCLONACION- Transferencia Nuclear de Células Somáticas(SCNT)- Clonación TERAPÉUTICA- Clonación REPRODUCTIVACÉLULAS MADRETRANSGÉNICOS
  21. 21. MUCHAS GRACIAS

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