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Tecnicas de micromanipulacion en reproduccion asistida
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Tecnicas de micromanipulacion en reproduccion asistida

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  • 1. TÉCNICAS DEMICROMANIPULACIÓNCÓMO MEJORAR LAS TASA DE GESTACIÓN ESTHER GREGORI MACHÍ Licenciada en Biología. Máster en Biología Clínica y Experimental de la Reproducción. Instituto FIVIR
  • 2. HISTORIAPatrick Steptoe y Robert Edwards Primer “bebé probeta”. Louise Brown, 1978.
  • 3. HISTORIA FIV convencionalComplejo Cumulo-Corona-Ovocito Cultivo ovocito-espermatozoides
  • 4. EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN
  • 5. EQUIPO de MICROMANIPULACIÓN
  • 6. EL OVOCITO Espacio Perivitelino Zona Pelúcida: glicoproteínasOoplasma Oolema
  • 7. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• “Zona Drilling”: ácido Tyrodes.• “Partial Zona Dissection” PZD: incisión en la ZP.• “Subzonal Insertion” SUZI: inserción de spzs en el espacio perivitelino.• Yanagimachi, 1976.
  • 8. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• ICSI “Intracytoplasmic Sperm Injection”: “Pregnancies afterintracytoplasmic injection of single spermatozoon into an oocyte”, Palermoy cols., 1992.
  • 9. Técnicas de MICROMANIPULACIÓN• ICSI• IMSI• Assisted Hatching: Eclosión Asistida.• Eliminación de fragmentos.• Transferencia de citoplasma.• DGP: biopsia CP o blastómeras.FUTURO:• Clonación.• Células madre.• Transgénicos.
  • 10. ICSI• Denudación ovocitaria: Hyaluronidasa + pipeteo mecánico• Caja de ICSI
  • 11. Técnicas de MICROMANIPULACIÓNOvocito VG Ovocito MI Ovocito MII
  • 12. ICSI – Indicaciones• Factor masculino grave: oligozoospermia, asteno, terato.• Factor inmunológico: presencia Ac-antispz.• “Sémenes valiosos”• Fallos previos de FIV.• DGP• Baja respuesta.• Mala calidad ovocitaria.• Ovocitos desvitrificados.
  • 13. ICSI - Modificaciones• Ebner y cols., 2002: presión y succión• Rienzi y cols, 2001. Nagy y cols., 2002: ICSI por láser.• Tesarik y cols., 2002: dislocación ooplasma.• Baltaci y cols., 2009: activación piezoeléctrica.
  • 14. IMSI: ICSI Altamente Magnificada
  • 15. ASSISTED HATCHING• Cohen, 1989.• Objetivo: mejorar el potencial implantatorio.• Metodología: perforación o adelgazamiento ZP - Zona Drilling, - PZD - Ablación por láser - Tratamiento enzimáticoBalaban, 2002: evaluó los cuatro métodosdiferentes y concluyó que tenían similares tasasde implantación y embarazo.
  • 16. ASSISTED HATCHING• INDICACIONES recomendadas: • Ovocitos de pacientes mayores 37 años. • Ovocitos ZP engrosada, color anormal. • Valores elevado de FSH basal sérica. • Fracaso repetido de implantación. • Embriones de baja calidad. • Embriones congelados/descongelados. Mayor incidencia gemelos monocigóticos yembarazos ectópicos.
  • 17. ELIMINACIONDE FRAGMENTOS
  • 18. TRANSFERENCIA de CITOPLASMA• Hipótesis: efectos ooplasma interfieren endesarrollo e implantación.• Ha habido embarazos pero faltan estudioscontrolados para verificar sus beneficios.• Futuro: implicaciones éticas.
  • 19. CONTRACCIÓN ARTIFICIAL CAVIDAD BLASTOCELE• Blastocele: cavidad llena de agua.• Para mejorar la vitrificación: reducciónblastocele y salida del agua.• Las tasas de embarazo mejoran al compararlocon un grupo control sin micromanipular.• Mukaida: láser para contracción. Método mássimple y conveniente.
  • 20. FUTUROCLONACION- Transferencia Nuclear de Células Somáticas(SCNT)- Clonación TERAPÉUTICA- Clonación REPRODUCTIVACÉLULAS MADRETRANSGÉNICOS
  • 21. MUCHAS GRACIAS