Tecnicas de histoquimica

  • 5,988 views
Uploaded on

 

  • Full Name Full Name Comment goes here.
    Are you sure you want to
    Your message goes here
    Be the first to comment
No Downloads

Views

Total Views
5,988
On Slideshare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
2

Actions

Shares
Downloads
95
Comments
0
Likes
1

Embeds 0

No embeds

Report content

Flagged as inappropriate Flag as inappropriate
Flag as inappropriate

Select your reason for flagging this presentation as inappropriate.

Cancel
    No notes for slide

Transcript

  • 1. LABORATORIO DE HISTOLOGIA
  • 2. TÉCNICA HISTOLOGICA Se denomina al conjunto de procedimientosaplicados a un material biológico (animal ovegetal) con la finalidad de prepararlo y conferirlelas condiciones óptimas para poder observar,examinar y analizar sus componentesmorfológicos a través de los microscopiosfotónicos y electrónicos.
  • 3. HISTOQUIMICA Es el estudio de los componentes tisulares y celularespor medio de colorantes especiales, reaccionesbioquímicas y reacciones inmunológicas.
  • 4. TECNICAS DE HISTOQUIMICA Es el estudio químico de los tejidos,independientemente del método de análisis empleado,con el auxilio de los microscopios ópticos (MO) yelectrónico (ME). Esta técnica permite la identificación y localización decompuestos o radicales químicos en las células ytejidos.
  • 5. B. PRINCIPALES SUSTANCIAS DE INTERÉS BIOLÓGICO DEMOSTRABLEHISTOQUÍMICAMENTE. 1. IONES IÓN HIERRO- EL ión férrico se demuestra por lareacción con la mezcla de ferro- cianuro potásico yácido clorhídrico (azul de Prusia) que forma unprecipitado azul oscuro de ferrocianuro férrico. - Sirve para localizar los macrófagos del SRE en elhígado y diagnosticar enfermedades en las cuales haydepósitos de hierro en los tejidos. Por ejemplohemocromatosis y hemosiderosis.
  • 6. 2. LÍPIDOS. Se usan colorantes que se disuelven en las grasas comoel Sudan IV y el Sudan negro. Sirven para el diagnóstico de enfermedadesmetabólicas que producen depósitos intracelulares delípidos. Por ejemplo Enf. de Gaucher, Enf. de Niemann-Pick, Enf. de Fabry, esteatosis hepática (hígado graso).
  • 7. 3. ÁCIDOS NUCLÉICOS. DNA .-Se usa la reacción de FEULGEN que consiste : - Hidrólisis del DNA con ácido clorhídrico para extraerlas bases púricas y dejar en libertad los gruposaldehídicos del azucar. - El reactivo de SCHIFF (PAS) reacciona con elaldehído y forma un precipitado rojo. RNA.-Tiene gran afinidad por los colorantes básicos(basofília) lo que hace que se tiña intensamente con elAZUL DE TOLUIDINA o de METILENO.
  • 8. 4. PROTEÍNAS Su identificación se basa en métodos de detecciónde aminoácidos. - Reacción de aminobenceno. - Reacción de Sakaguchi que detecta la arginina delas proteínas básicas como las histonas yprotaminas. Para Dx. de proteinosis pulmonar.
  • 9. 5.- POLISACARIDOS La reacción más usada es la del PAS (ácido periódico-Schiff). El ácidooxida a los azucares en posición 1-2 y deja grupos aldehídos libres quereaccionan con el reactivo de SchifF dando un compuesto de colormagenta . De este modo se demuestra la presencia de: - Glucógeno en el hígado y músculo. - Depósito intracelular de glucógeno en enfermedades congénitas. - Glucosaminoglicano o mucopolisacárido que forman parte de losproteoglicanos. - Glucoproteínas. Los azucares ácidos también reaccionan con el colorante AZUL DEALCIAN.
  • 10. 6.- ENZIMAS FOSFATASA ÁCIDA Se usa el método de GOMORI que consiste en incubarcortes de tejidos en una solución que contenganglicerol fosfato sódico y nitrato de plomo a pH 5 . Se usa para localizar lisosomas. DESHIDROGENASAS Se usan cortes no fijados junto con tetrazol paraformar un precipitado coloreado llamado formazan. Se usa para detectar mitocondrias.
  • 11. TINCION DE PAS (ácido peryódico de Schiff)Se utiliza para la detecciónde hidratos de carbono,libres o conjugados, en lostejidos cuando están encantidades relativamentegrandes. La modificaciónquímica del tejido consisteen la oxidación mediante elácido periódico de losenlaces entre los carbonospróximos que contienengrupos hidroxilos. Estoprovoca la formación gruposaldehídos que seránreconocidos por el reactivode Schiff, el cual secombinará con ellos para darun color rojizo brillante.
  • 12.  Inmunohistoquímica. Técnica de tinción que permitedemostrar una variedad de antígenos presentes en lascélulas o tejidos utilizando anticuerpos marcados.Estas técnicas se basan en la capacidad de losanticuerpos de unirse a sus antígenos.
  • 13. TINCION PARA AMILOIDELa tinción de Rojo Congoseguida de visión almicroscopio con luz normal(Fig. 4a) o polarizada (con laque se observa refringenciade color verde manzana)(Fig. 4b) es la técnica máspráctica para demostraciónde sustancia amiloide.
  • 14. TINCION DE PLATA PARA FIBRASELASTICAS
  • 15. INMUNOCITOQUIMICA (INMUNOFLUORESCENCIA) Sirve para identificar proteínas especificas. Se basa enla reacción Ag-Ac. Al Ac se le puede marcar con uncompuesto fluorescente. Es el método más usado parala detección de auto-anticuerpos en enfermedadesautoinmunes.
  • 16. DX. POR INMUNOFLUORESCENCIA
  • 17. OBTENCION DE AC MONOCLONALES
  • 18. OBTENCION DE AC MONOCLONALES
  • 19. APLICACIONES DE LOS AC MONOCLONALESEn Dx. de tumoresEn terapia:TumoralInfecciones virales,Bacterianas,DrogasToxinas
  • 20. Mastocitos teñidos con Giemsa.Los gránulos citoplásmicos dehistamina captan el colorante
  • 21. H y E PFAG VIMS-100 C. Neurofilamento Enolasa neuronal específic
  • 22. ProteínaTau