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 La glándula mamaria se identifica como una alternativa apropiada para la producción de proteínas recombinantes      con ...
 El éxito del ensayo consiste en encontrar el vector adecuado para transferir los genes de interés a las células    epite...
 Transferencia in situ Endocitosis mediada por receptor Uso de pistolas de genes Vectores adenovirales
 Los            vectores adenovirales podrían ser un punto de partida para el desarrollo de sistemas de producción de    ...
 La selección de un organismo u otro para la expresión de proteínas de interés biofarmacéuticos está relacionada con los ...
 La especie mas estudiado genética  y fisiológicamente Escherichia  coli.Las        ventajas      de     este  microorgan...
 No expresan muchas de las modificaciones  postraduccionales. No se forman puentes disulfuro entre las  cisteínas. No e...
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Ventajas: Bajo costo y capacidad de producción a  gran escala, así como a la simplicidad de la  cosecha y el almacenaje.D...
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 Principales aplicaciones   Limitaciones    de    la de los animales               expresión de proteínas transgénicos:  ...
En la leche de algunosmamíferos,       principalmenterumiantes se pueden llegar aproducir de 200 g hasta 1 kg deproteína p...
La expresión deproteínasrecombinantes enla         glándulamamaria dependede : Casete          deexpresión utilizadoMéto...
 Los promotores más utilizados son aquellos que en condiciones naturales regulan la expresión de las proteínas de la leche.
 Microinyección de ADN:Consiste en la microinyección del ADN foráneo en el pronúcleo de embriones unicelulares y la inser...
 Técnica de Transferencia nuclear de células  somáticas (TNCS)En la actualidad representa un procedimiento  alternativo p...
Desventajas: La      metodología      es  compleja     y    demanda  equipamiento Los reactivos son muy  caros En     v...
Consiste en transferir el ADN directamente a las  células que constituyen el epitelio mamario de  una hembra adulta.Ventaj...
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La glándula mamaria

  1. 1.  Conocer los hospederos que permiten la expresión de proteínas recombinantes y sus mecanismos de acción. Analizar las ventajas y desventajas de los sistemas de expresión con especial énfasis en la glándula mamaria como biofábrica.
  2. 2.  La glándula mamaria se identifica como una alternativa apropiada para la producción de proteínas recombinantes con modificaciones postraduccionales propias de eucariontes superiores.
  3. 3.  El éxito del ensayo consiste en encontrar el vector adecuado para transferir los genes de interés a las células epiteliales mamarias y que la transducción ocurra de manera masiva y eficiente.
  4. 4.  Transferencia in situ Endocitosis mediada por receptor Uso de pistolas de genes Vectores adenovirales
  5. 5.  Los vectores adenovirales podrían ser un punto de partida para el desarrollo de sistemas de producción de proteínas recombinantes en la leche de mamíferos genéticamente modificados, mediante la transducción transiente de la glándula mamaria con vectores adenovirales.
  6. 6.  La selección de un organismo u otro para la expresión de proteínas de interés biofarmacéuticos está relacionada con los eventos postraduccionales específicos, necesarios para que ocurran los plegamientos correctos que garanticen la actividad biológica de la molécula.
  7. 7.  La especie mas estudiado genética y fisiológicamente Escherichia coli.Las ventajas de este microorganismos son: La rápida generación de biomasa. La fácil manipulación genética. Que no requiere de medios de cultivo. La alta eficiencia en la incorporación del el material genético foráneo.
  8. 8.  No expresan muchas de las modificaciones postraduccionales. No se forman puentes disulfuro entre las cisteínas. No enlazan oligosacáridos a las proteínas.
  9. 9.  Se logro modificar genéticamente las rutas enzimáticas de glicosilación de la Pichia pastoris, como una alternativa novedosa para la producción de proteínas recombinantes en microorganismos eucariontes inferiores, la cual permita la obtención de la proteína de interés con un patrón de glicosilación específico y una elevada homogeneidad.
  10. 10.  Las plantas se consideran uno de los sistemas de producción mas seguros, ya que carecen de secuencias de ADN oncógenas
  11. 11. Ventajas: Bajo costo y capacidad de producción a gran escala, así como a la simplicidad de la cosecha y el almacenaje.Desventajas: Tiene la limitación de no generar perfiles de oligosacáridos de tipo complejo, limitando su utilización como agentes terapéuticos en los seres humanos.
  12. 12. La transferencia delmaterial genético para lageneración de animalestransgénicos se realizaen etapas iniciales deldesarrollo embrionario.Lo anterior favorece elpaso de la nuevainformación a la líneagerminal del individuogenéticamentemodificado.
  13. 13.  Principales aplicaciones Limitaciones de la de los animales expresión de proteínas transgénicos: en la sangre: Obtención de modelos animales  Separación de la Producción de proteínas proteína recombinante recombinantes de su homóloga en el hospedero.Las proteínas recombinantes producidas en animales  La deficiente transgénicos se estabilidad de las expresan en las células proteínas secretadas al de un tejido específico y suero sanguíneo. se secretan en un fluido corporal determinado.
  14. 14. En la leche de algunosmamíferos, principalmenterumiantes se pueden llegar aproducir de 200 g hasta 1 kg deproteína por día.Ejemplos de proteínasrecombinantes producidas enla glándula mamaria: Hormona del crecimientohumana (hGH) Factor de crecimiento neural Proteína C humanaAntitrombina humana (Ath)Lactoferrina humana.
  15. 15. La expresión deproteínasrecombinantes enla glándulamamaria dependede : Casete deexpresión utilizadoMétodo para latransferencia delmaterial genético.
  16. 16.  Los promotores más utilizados son aquellos que en condiciones naturales regulan la expresión de las proteínas de la leche.
  17. 17.  Microinyección de ADN:Consiste en la microinyección del ADN foráneo en el pronúcleo de embriones unicelulares y la inserción al azar del materia genético en el embrión microinyectado.Hasta la actualidad este método se ha utilizado como la técnica universal de transferencia horizontal de material genético.
  18. 18.  Técnica de Transferencia nuclear de células somáticas (TNCS)En la actualidad representa un procedimiento alternativo para crear animales transgénicos.Ventajas:• Permite la introducción directa de transgenes a ovocitos anucleados• Permite la selección de los embriones transformados por los métodos convencionales de biología molecular• Posibilita la selección del sexo en la línea de fundadores
  19. 19. Desventajas: La metodología es compleja y demanda equipamiento Los reactivos son muy caros En vacas los fetos generados por TNCS, se pierden entre el día 35 y el 60 de gestación Complicaciones en el embarazo, debido al síndrome de feto gigante; también se observan anomalías pulmonares y deficiencias metabólicas, tanto en fetos como en crías nacidas.
  20. 20. Consiste en transferir el ADN directamente a las células que constituyen el epitelio mamario de una hembra adulta.Ventajas:• Es aplicable a casi todas las especies de mamíferos independientemente de su fondo genético.• Permite la inserción de múltiples casetes de expresión• Reduce considerablemente el tiempo entre la aplicación del método de modificación y la obtención del producto de interés.
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