1. www.miracele-medicine.com

2. ....วันนี้เราไดโปรยเมล็ดดอกไมลงบนแปลง เราคงไมรูหรอกวา ดอกที่จะขึ้นนั้นจะ
เปนสีแดง หรือสีขาว.....แตอยางนอยวันนี้ดอกไมที่โปรยนั้นก็ไดมีโอกาสที่จะงอก
ขึ้นมาในแปลงที่ครั้งหนึ่งมีแตความวางเปลา และไรความหวัง....
น.สพ. ศุภเสกข ศรจิตติ

3. Spinal Cord Injury
Facts and Figures About Spinal Cord Injury in USA
• There are an estimated 10,000 to 12,000 spinal cord injuries every year in
the United States.
• A quarter of a million Americans are currently living with spinal cord injuries.
• The cost of managing the care of spinal cord injury patients approaches $4
billion each year.
• 38.5 percent of all spinal cord injuries happen during car accidents. Almost
a quarter, 24.5 percent, are the result of injuries relating to violent
encounters, often involving guns and knifes. The rest are due to sporting
accidents, falls, and work-related accidents.
• 55 percent of spinal cord injury victims are between 16 and 30 years old.
• More than 80 percent of spinal cord injury patients are men
Source: Facts and Figures at a Glance, May 2001. National Spinal Cord
Injury Statistical Center.

4. Spinal Cord
• Cervical spinal nerves : ควบคุมสัญญานประสาทในสวนของหลัง
ของศีรษะ คอ และบริเวณไหล รวมถึงบริเวณมือ และกระบังลม
• Thoracic spinal nerves : ควบคุมสัญญาณประสาทในสวนของ
กลามเนื้อหนาอก กลามเนื้อบางสวนของหลัง และบางสวนของทอง
• Lumbar spinal nerves : ควบคุมสัญญาณประสาทที่ต่ํากวาในสวน
ของทอง หลัง เอว สะโพก บางสวนของระบบสืบพันธุภายนอก และบางสวน
ของขา
• Sacral spinal nerves : ควบคุมสัญญาณประสาทสวนของตนขา
และสวนลางของขา เทา ระบบสืบพันธุดานใน และบริเวณรอบๆของรูทวาร

5. กายา
ประวัติ และขอมูลเบื้องตน
• สุนัขพันธุลาบลาดอร สีดํา เพศผู อายุ 4 ป น้ําหนัก 41 กิโลกรัม
• CC. ตกจากชั้นสองของบาน เมื่อวันศุกรที่ 18 เมษายน 2551
สาเหตุของการตก เกิดจากเปนสุนัขขี้เลน และตามคนขึนไปเลนที่ชนสองของบาน ซึงใช
้ ั้ ่
ตนไมเปนที่กน สุนัขไดวงซิกแซกตามตนไมทปลูกกั้นไวและไดตกลงมาและไมสามารถ
ั้ ิ่ ี่
ใชขาหลังเดิน หรือทรงตัว ไมสามารถควบคุมการขับถายอุจจาระ และปสสาวะ
• Px. จากการตรวจโดยการคลํา ไมพบการหักของกระดูกขา และสะโพก มีการเจ็บมากเมื่อ
จับบริเวณสันหลัง และไมมีการตอบสนองของระบบประสาท ทังสวนของ Deep Pain
้
reflex และ Sensory Pain Reflex
• X-rays พบวา เกิดการหักของกระดูกสันหลังทังหมด 4 ตําแหนง
้

6. ผลการตรวจวินิจฉัย
• จากฟลมเอกซเรยพบกระดูกสัน
หลังหัก ในสวนของ Spine ทั้ง
ดานบนและดานขาง บริเวณ L5
และ L6
• พบภาวะ Spondylosis ที่ T13-
L3 และ L4-L7
• พบวามีภาวะเลือดจางเล็กนอย
คาตับสูงขึ้น (SGPT,ALK )

11. ผลการตรวจเลือด (25/4/2551)
• RBC 5,400,000 cell s/µL WBC 21,100 per µL
• HB 13.1 g/dL
Band-N 0 %
• Hct 39.7 %
• MCV 73.6 fl Seg-N 93 %
• MCH 24.3 pg Lymphocyte 3 %
• MCHC 33.0 % Monocyte 2 %
• Bl. Morphology : Nomal
Eosiniphil 2 %
• Platelets 79,000 per µL
• Blood Paracite : Not Found N-RBC - /100WBC
SGPT (ALT) 198.5 IU/L
BUN 11.9 mg/dL
Creatinine 0.7 mg/dL
Alk.Phos. 177.1 IU/L

12. ผลการตรวจเลือด (27/4/2551) กอนผาตัด
• RBC 5,190,000 cell s/µL WBC 60,000 per µL
• HB 13.4 g/dL
• Hct 38.2 % Band-N 0 %
• MCV 73.7 fl Seg-N 94 %
• MCH 25.9 pg
Lymphocyte 4 %
• MCHC 35.1 %
• Bl. Morphology : Anisocytosis some Monocyte 2 %
Polychromasia some Eosiniphil 0 %
• Platelets 317,000 per µL
N-RBC - /100WBC
SGPT (ALT) 222.2 IU/L
BUN 12.7 mg/dL
Creatinine 1.1 mg/dL
Alk.Phos. 289.8 IU/L

13. การรักษาเบื้องตน (วันที่ 18-19 เมษายน 2551)
• แพทยใหยาปฏิชีวนะ ยาลดการอักเสบแบบสเตียรอยด ยาบํารุงเลือด ยาบํารุงตับ
• แพทยทานแรกแนะนําดูอาการ และคาดวาอาจจะไมสามารถทําการผาตัดได
เนื่องจากสุนัขมีขนาดใหญ
• สงเคสตอไปยังอาจารยผูเชี่ยวชาญตอไป

14. การรักษาตอมา
• 22/4/2551 : ทําการเอกซเรยเพิ่มเติมในทานอนหงาย เพื่อประเมินสภาพ
ของกระดูกสันหลังที่หัก และเพื่อ วางแผนการรักษา
• 23/4/2551 : ประสานงานกับอาจารยคณะสัตวแพทยศาสตร จุฬา ใน
สวนของภาควิชาศัลยกรรม สัตวบาล และ พยาธิวิทยา เพื่อทําการรักษา
โดยการผาตัดแกไข รวมกับการทําสเต็มเซลล
• 24/4/51 : พบ ผศ.น.สพ.ดร.กัมปนาท สุนทรวิภาต เพื่อวางแนว
ทางการรักษา และนัดทําการผาตัดและฉีดสเต็มเซลลในวันอาทิตยที่
27/4/51

15. แผนการรักษา
• ผาตัดแกไขสวนของกระดูกสันหลังที่หัก เพื่อลดการกดทับบริเวณ
เสนประสาทไขสันหลัง
• ฉีดสเต็มเซลลที่แยกไดจากไขกระดูกของสุนัข ที่น้ําไขสันหลัง เพื่อฟนฟู
ระบบประสาทสวนที่เสียหาย

16. การแบงทีมการรักษา
• ทีมผาตัด (ผศ.น.สพ.ดร. กัมปนาท สุนทรวิภาต, ภาควิชาศัลยศาสตร คณะ
สัตวแพทยศาสตร จุฬาลงกรณมหาวิทยาลัย)
• ทีมพยาธิวิทยา (รศ.สพ.ญ.ดร. อัจฉริยา ไศละสูต, ภาควิชาพยาธิวิทยา คณะ
สัตวแพทยศาสตร จุฬาลงกรณมหาวิทยาลัย)
• ทีมดูแลหลังการผาตัด (ผศ.สพ.ญ.ดร. อุตรา จามีกร, ภาควิชาสัตวบาล คณะ
สัตวแพทยศาสตร จุฬาลงกรณมหาวิทยาลัย)
• ทีมคัดแยกสเต็มเซลล (น.สพ. ศุภเสกข ศรจิตติ, บริษัท มิราเซล เมดิซีน
จํากัด)
• ทีมที่ปรึกษา : น.พ. จอน ยังพิชิต
รศ.น.พ. ไพโรจน วิทูรพณิช

17. การคัดแยกสเต็มเซลล
Density Gradient based processing
• ไดมาจากไขกระดูก ปริมาณเบื้องตน 50 ml
• ใชเทคนิค Density Gradient Based Processing
ชวยในการแยกเซลล
• แยกภายใตระบบปด (Closed system)
• ควบคุมการปลอดเชื้อ (Sterile system)

18. คุณสมบัตสเต็มเซลลทใชรักษา
ิ ี่
• เปนสเต็มเซลลททาใหบริสุทธิ์ในระดับ 2 ชนิด (Mononuclear Cells)
ี่ ํ
• จัดเปน Cocktail Stem Cells เพราะวาประกอบไปดวยสเต็มเซลลหลากหลายชนิด
• ยังคงมีคณสมบัติของสเต็มเซลลพนฐาน เชน Homing, Differentiation, Anti-
ุ ื้
Inframmation, Anti-Apoptosis, Neo-Vascularization and
Throphic support

19. ตารางการรักษา (เริม ศุกรที่ 25/4/51)
่
• Day 1 : ตรวจเลือดเบื้องตน, ฉีดยากระตุน G-CSF
• Day 2 : ฉีดยากระตุน G-CSF
• Day 3 : ผาตัด ฉีดสเต็มเซลล และเก็บตัวอยางไขกระดูก
• Day 4-17 : ฉีด Low dose G-CSF ติดตามผลการรักษา ในวันที่
14,30,60 และ 90 วัน หลังการรักษา
หมายเหตุ การรักษาจะเปลี่ยนแปลงโดยการพิจารณาจากคาเลือด

20. South Korea, Park et al. (2005)
ไดมีการศึกษาการรักษาผูปวยที่เปนอัมพาตจํานวน 6 คน โดยการใชส
เต็มเซลลที่ไดมาจากไขกระดูกของผูปวยเอง รวมกับการฉีดยา GM-
CSF และติดตามผลการรักษา 6-18 เดือน พบวา 4 ใน 6 ปวยมี
การทํางานของระบบประสาทดีขึ้น 2 ระดับ (ASIA grade)
In South Korea, Park et al. (2005) evaluated the
therapeutic efficacy of combining autologous
BMSC transplantation, administered directly into
the spinal cord lesion site, with granulocyte macrophage-
colony stimulating factor (GM-CSF),
given subcutaneously, in six patients with complete
SCIs. At the 6- and 18-month follow-up periods,
four of the six patients showed neurological
improvements by two ASIA grade (from ASIA A
to ASIA C)
Progress in Brain Research, Vol. 161,2007

21. G-CSF
“Cocktail Stem Cells”
แผนผังแสดงแนวความคิดในการรักษา

22. ผลการรักษาเปรียบเทียบการใชสเต็มเซลล รักษาอัมพาตในสุนข, ประเทศเกาหลี
ั
J. Vet. Sci. (2007), 8(3), 275–282

23. Mean conduction velocities calculated from the
somatosensory evoked potentials at week 0, 4 and 8
J. Vet. Sci. (2007), 8(3), 275–282

24. Basso, Beattie and Bresnahan (BBB) locomotor rating scale scores plotted against time. There
was no statistical significance in BBB scores from 1 to 3 weeks. Groups IV, III, and II scored
higher than those in group I from 4 to 7 weeks. From 8 to 9 weeks, there was significant
differences between groups IV > III and either III or II > I, but no significant difference between II
and III. From 10 to 12 weeks, there was a difference for group IV > III, III > II, and II > I. Sham = gap
filled with fibrin glue (group I); G = fibrin glue + subcutaneous granulocyte colony-stimulating
factor (G-CSF) injection (group II); N = fibrin glue + neuronal stem cells (group III); G+N = fibrin
glue + neuronal stem cells + subcutaneous G-CSF injection (group IV).
J Clin Neurosci (2008),

25. Hind limb functional assessment with the hind limb
motor function scale (Farooque et al., 2001; Table 1). Time
course of hind limb functional recovery

26. ความคาดหวังที่จะไดรับหลังการปลูกถายสเต็มเซลล
• มีความสามารถในการควบคุมระบบขับถายได
• ฟนฟูระบบประสาทสวนกลาง (ไขสันหลัง) ใหสามารถทํางานได
ดีขึ้น
• ลดการอักเสบ บวม ของระบบประสาท
• เพิ่มเสนเลือดไปเลี้ยงระบบประสาทบริเวณที่เสียหายใหมากขึ้น
• ลดการทําลายเซลลบริเวณรอยโรค

27. ขั้นตอนการเจาะไขกระดูก

28. ขั้นตอนในหองปฏิบัติการณ

29. ผล LAB Hematology (BM) กอนและหลังการ Purify
PRE POST
• WBC 34,300 per µL • WBC 13,500 per µL
• Neutrophil 69 % • Neutrophil 67 %
• Lymphocyte 4 % • Lymphocyte 23 %
• Monocyte 4 % • Monocyte 2 %
• Eosinophil 0 % • Eosinophil 0 %
• Basophil 0 % • Basophil 0 %
• Atypical Lymphocyte 1 % • Atypical Lymphocyte 0 %
• Band 22 % • Band 7 %
• RBC 3,350,000 per µL • RBC 50,000 per µL
• Hb 9.8 g/dL • Hb 0.1 g/dL
• Hct 24.3 % • Hct 0.4 %
• MCV 72.6 fl • MCV 0 fl
• MCH 29.2 pg • MCH 0 pg
• MCHC 40.3 g/dL • MCHC 0 g/dL
• Platelets Ct. 172,000 per µL • Platelets Ct. 39,000 per µL
• RBC Morphology : Polychromasia few, • Blast Cells 1 %
Microcyte 1+, Creanated cell seen, • NRBC 6 Cells/100WBC
NRBC 12 cell/100 WBC
• Correctted WBC 12,736 per µL
• Corrected WBC 30,625 per µL

30. Blood Processing
• Volume of blood pre processing 43 ml.
• Nucleated cell count pre processing 34.3 × 106 cells/ml.
• Total nucleated cell count pre processing 14.75 × 108 cells/ml.
• Volume of blood post processing 45 ml.
• Nucleated cell count post processing 13.5 × 106 cells/ml.
• Total nucleated cell count post processing 6.08 × 108 cells/ml.
• % Recovery 41.22 %
• % Viability Pre processing 95 %
• % Viability Post processing 85 %
• Sterility Test No contamination

31. Pre & Post Purify
Pre Post
Viability 95% 88%
Deplete RBC 98.5%

32. รูปขันตอนการฉีดกลับ
้

33. ผลการตรวจเลือด (2/5/2551)
• RBC 3,450,000 cell s/µL WBC 19,200 per µL
• HB 8.4 g/dL
Band-N 0 %
• Hct 26.4 %
Seg-N 85 %
• MCV 76.5 fl
• MCH 24.4 pg Lymphocyte 11 %
• MCHC 31.9 % Monocyte 4 %
• Bl. Morphology : Aniso 1+,Sherocyte some,
Eosiniphil 0 %
Polychromasia 1+
• Platelets 210,000 per µL N-RBC 2 cell /100WBC
• Blood Paracite : Not Found
SGPT (ALT) 62.3 IU/L
BUN 18.0 mg/dL
Creatinine 0.9 mg/dL
Alk.Phos. 888.6 IU/L

35. ผลหลังการปลูกถายสเต็มเซลล 5 วัน
• RBC ลดลง
• WBC กลับสูปกติ

• SGPT ลดลง
• ALK. Phos. สูงขึน้
• Creatinine และ BUN ไมมีความแตกตาง
• ขาหลังขวาพบวามี Deep pain reflex เล็กนอย
• ขาหลังซายเกร็งเมื่อทําการกระตุน Deep pain

• โคนหางมีการขยับไดเล็กนอย
• เริ่มสามารถควบคุมการขับถาย และรองเรียก
เมื่อตองการขับถาย
• คาตับลดลงอยางเห็นไดชัด

36. • คา MNCs ที่ไดหลังผานการคัดแยกอยูที่ 149 Mil.cells (45 ml.)
• กรณีคาเม็ดเลือดแดงที่พบต่ําลงเปนผลมาจากการดูดเลือดออกจากไขกระดูกเพื่อทีจะนําไปคัดแยกส
่
เต็มเซลล และคาดวาจะกลับสูระดับปกติภายใน 21-30 หลังจากการปลูกถานสเต็มเซลล
• คาเม็ดเลือดขาวที่ลดลงสอดคลองกับขอมูลวิชาการที่ผานมา ซึ่งจะพบวาคาของเม็ดเลือดขาวจะกลับ
สูสภาวะปกติภายใน 3-7 วันหลังจากการหยุดฉีดยา G-CSF

• กรณีคาตับลดลงนาจะเปนผลมาจากการฉีดสเต็มเซลลเขาในหลอดเลือดดํา ซึ่งจะชวยลดคาตับทีสง ่ ู
ผิดปกติได
• กรณีคา Alkaline Phosphatase มีคาสูงขึ้นนาจะเปนผลมาจากการซอมแซมกระดูกในสวนทีถูกเจาะ
่
รูเพื่อทําการดูดเลือดจากไขกระดูก
• จากการใชคีมหนีบตามสวนตางๆของขาสุนขโดยไลจากสะโพกลงไป พบวาสุนขเริ่มตอบสนองตอ
ั ั
ความเจ็บปวดอยางเห็นไดชัด แตปฏิกิริยานี้จะลดลงในสวนบริเวณของปลายเทา
• หางของสุนัขสามารถรับความรูสึกได และเมื่อเจ็บสามารถที่จะเลื่อนหางหนีได
• สุนัขเริ่มมีความสามารถในการควบคุมระบบขับถายไดดีขึ้น และสามารถสงเสียงรองเรียกเมื่อ
ตองการขับถาย

37. ผลการตรวจเลือด (15/5/2551)
• RBC 4,440,000 cell s/µL WBC 17,300 per µL
• HB 11.9 g/dL
Band-N 0 %
• Hct 34.9 %
Seg-N 75 %
• MCV 78.6 fl
• MCH 26.8 pg Lymphocyte 17 %
• MCHC 34.1 % Monocyte 5 %
• Bl. Morphology : Aniso some
Eosiniphil 3 %
• Platelets 375,000 per µL
N-RBC 0 cell /100WBC
• Blood Paracite : Not Found
SGPT (ALT) 39.5 IU/L
BUN 10.3 mg/dL
Creatinine 0.8 mg/dL
Alk.Phos. 361.9 IU/L
Plasmalipidimia 1+

38. ผลการตรวจเลือด (27/5/2551)
• RBC 4,710,000 cell s/µL WBC 10,800 per µL
• HB 11.5 g/dL
Band-N 0 %
• Hct 36.3 %
Seg-N 95 %
• MCV 77.1 fl
• MCH 24.4 pg Lymphocyte 4 %
• MCHC 31.6 % Monocyte 1 %
• Bl. Morphology : Aniso some
Eosiniphil 0 %
• Platelets 375,000 per µL
N-RBC 0 cell /100WBC
• Blood Paracite : Not Found
SGPT (ALT) 67.5 IU/L
BUN ไมไดตรวจ mg/dL
Creatinine 0.8 mg/dL
Alk.Phos. 237.6 IU/L

39. ภาพวีดีโอ 30 วัน หลังการปลูกถายสเต็มเซลล

46. สรุปผลการรักษา 30 วันหลังการปลูกถายสเต็มเซลล
• สุนัขมีการพัฒนาของระบบประสาทอยางเห็นไดชัดเจนในสวนของการใชโคนขา
หลัง มีการเคลื่อนไหวของขอสะโพกที่ชัดเจน และการกระดิกหางมีชัดเจนมากขึ้น
อยางเห็นไดชัด
• สุนัขมีคาการทํางานของตับ (ALT) ดีขึ้น และสามารถรักษาระดับคานี้ไดดีถึงแมวา
จะผานไป 30 วัน รวมถึงคา Alk. Phos. ที่ดีขึ้นเชนกัน
• สุนัขมีการควบคุมการขับถายอุจจาระ ปสสาวะไดดีกวา 5 วันแรกหลังการปลูก
ถายสเต็มเซลล
• Sensory Pain Reflex ยังคงมีพัฒนาการที่มากขึ้นกวาชวง 5 วันแรกที่ทําการปลูก
ถายสเต็มเซลล
• Deep pain พบไดบาง แตจะตองกระตุนรุนแรงถึงจะเห็นปฏิกิริยาตอบสนอง

47. บทวิจารณ
การรักษาสุนัขที่เปนอัมพาตดวยการใชสเต็มเซลลเสริมจากการรักษาดวยวิธีมาตรฐานในปจจุบัน
พบวา ใหการตอบสนองตอการรักษาที่ดี และเห็นผลการรักษาในระยะเวลาที่ไมนานนัก สิ่งที่ตอง
คํานึงของการปลูกถายสเต็มเซลลในเคสนี้ที่สําคัญก็คือ การเลือกตําแหนงบริเวณทีจะทําการปลูก
่
ถาย และปริมาณสเต็มเซลลที่ตองใช และควรทําภายใน 48 ชั่วโมง
การทํากายภาพบําบัดนับเปนสวนสําคัญมากหลังการผาตัดรวมกับการปลูกถายสเต็มเซลล และ
จําเปนตองไดรับการดูแลที่ถูกตองอยางสม่ําเสมอ เพื่อใหผลการรักษาดียิ่งขึ้น
ปญหาที่พบไดและควรระวังเปนอยางยิงคือการเกิดเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน และแผลเปน บริเวณโดยรอบ
่
ของแผลผาตัด จะมีผลทําใหเกิดการฟนฟูของเสนประสาทชาลง หรืออาจไมดีขึ้นได นอกจากนี้
แลวหลังการผาตัดควรจะดูแลไมใหสุนัขเคลื่อนไหวที่รบกวนบริเวณแผลที่ผาตัดดวย

48. ขอขอบคุณ
• ทีมสัตวแพทย คณะสัตวแพทยศาสตร จุฬาลงกรณมหาวิทยาลัย
• บริษัทสโมสรคนรักมา จํากัด
• บริษัทสยามฟารมาซูติคอล จํากัด
• บริษัทกันตนา กรุป จํากัด (มหาชน)
• บริษัทฟอรด ดอรด แอนนิมอล เฮลท จํากัด
• โรงพยาบาลสัตวประดิพัทธิ์
• ด็อกฮารท เวท คลินิก

49. “Live longer healthier life”
MIRACELE MEDICINE Co.,Ltd.
3 rd Floor, Ratchakru Medical Center
71 Phaholyothin 5, Samsennai ,Phyathai ,Bangkok 10400,
Thailand
Tel/fax: (+66) (2) 619 5307 , (+66) (2) 619 6122