Área de Projecto – 2008/2009
“A justiça não anda sozinha”
Visita ao Laboratório Aberto
Visita ao Laboratório Aberto – IPATIMUP
25 de Fevereiro de 2009
Relatório da actividade laboratorial:
O Código da vida: O criminoso
 Recolha e extracção de DNA
DNA fingerprinting

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Índice
1. Introdução ………………………………………………………….. 2
2. 3
Materiais ………………………………………………..……………..
3. 4
Métodos ………………………………………………………………
4. 4
Resultados …………………………………………………………..
5. 6
Discussão/Conclusão ………………………………………………..
6. 6
Bibliografia………………………………………………………….
9. 8
Anexos ………………………………………………………………
1. Introdução
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Este relatório foi realizado no âmbito de Área de Projecto – 12º ano, orientada pelo
professor Pedro Dias, no seguimento de uma visita ao Laboratório Aberto do IPATIMUP
– Instituto de Patologia e Imunologia Molecular da Universidade do Porto, realizada no
dia 25 de Fevereiro de 2009.
Esta visita teve como principais objectivos:
 Familiarização com técnicas de recolha, transporte e extracção de DNA;
 Realização de uma electroforese (exercício laboratorial acerca das utilizações
do DNA fingerprinting durante uma investigação criminal);
 Obtenção de imagens para a curta-metragem que será apresentada no final do
ano lectivo;
 Entrevista a profissionais da área da genética;
 Estabelecimento de futuros contactos para, por exemplo, esclarecimento de
possíveis dúvidas sobre a genética forense.
2. Materiais
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 Bata;
 Micropipetas (Figura 1);
 Tubos de eppendorf (Figura 2);
 10μl de amostra de DNA do suspeito n.º3: S 26, 36/37, 60 (Figura 3);
 Enzimas de restrição EcoRI/PstI: R 22; S 25, 26, 28, 36/37, 45, 60 (Figura 4);
 Corante;
 Gel de Agarose a 1%;
 Fonte de alimentação: ddp=100V – 30 min;
 Tina de electroforese (Figura 5).
Figura 1 Figura 2
Figura 1
Figura 3 Figura 5
Figura 4
3. Métodos
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 Transferiram-se 10μl da amostra de DNA do suspeito n.º3 para um tubo de
eppendorf;
 Em seguida, procedeu-se à adição de 10μl da enzima de restrição EcoRI/PstI;
 Colocaram-se as amostras numa estufa à temperatura de activação de 37ºC
(Tactivação=37ºC), durante, aproximadamente, 2 horas (t=2h). Por uma questão
de poupança de tempo, utilizaram-se outras preparações, previamente
aquecidas;
 Depois de se ter adicionado 5μl de corante e já com o gel de agarose a 1%
preparado, transferiu-se 20μl da amostra para o respectivo poço da tina de
electroforese;
 Compararam-se os resultados obtidos com aqueles provenientes do DNA da
cena de crime e concluiu-se qual dos suspeitos era o culpado.
4. Resultados
Tal como é possível observar nos esquemas abaixo representados, concluiu-se que o
suspeito 3 foi o culpado, uma vez que os fragmentos de DNA obtidos depois do processo
de electroforese correspondiam aos fragmentos da amostra encontrada no local do crime.
=
Esquema 2: Correspondência de fragmentos de DNA, após a técnica de electroforese
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-
Pólo positivo
+ Sentido do
movimento dos
fragmentos de DNA
Esquema 1: Fragmentos de DNA na tina de electroforese
Pólo negativo
Pólo negativo
Legenda:
C.C. – amostra de DNA encontrado na cena de crime
S.1 – amostra de DNA do suspeito 1
S.2 – amostra de DNA do suspeito 2
S.3 – amostra de DNA do suspeito 3
S.4 – amostra de DNA do suspeito 4
S.5 – amostra de DNA do suspeito 5
S.5 S.4 S.2
S.3 S.1 C.C.
Figura 6: Fragmentos de DNA na tina de electroforese
5. Discussão/Conclusão
Esta actividade permitiu estabelecer a ponte entre a teoria e a prática, na medida em
que foi possível aplicar os conhecimentos adquiridos noutras disciplinas resolução de um
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exercício que simula uma técnica muito utilizada no desenrolar de investigações
criminais.
Na opinião do grupo, esta visita foi bastante útil, uma vez que todos os objectivos
iniciais foram alcançados.
6. Bibliografia
 SILVA, Amparo Dias da; et al – Terra, Universo de Vida – Biologia 12º ano,
Porto Editora, 1ª edição, 3ª reimpressão, s.l., 2008;
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 OSÓRIO, Lídia Silva – Preparar os Testes, Biologia 12, Areal Editores, s.l.,
2007;
 JENKINS, Morton – Hiper Apontamentos Europa-América Explicam… A
Genética, Publicações Europa-América, dição n.º 152321-8189, Abril de 2003.
 http://www.laboratorioaberto.pt/actividades_L.php#criminoso;
 http://br.geocities.com/andbt/biofisica/Manual.PDF.
7. Anexos
7.1. Anexo A
Tabela 1: Frases de segurança da amostra de DNA
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Códigos Frases de segurança
Em caso de contacto com os olhos lavar imediata abundantemente em água e
S26
chamar um médico.
S36 Usar vestuário de protecção adequado.
S37 Usar luvas adequadas.
S60 Elimina-se o produto e o recipiente como resíduos perigosos.
Tabela 2: Frases de risco das enzimas de restrição EcoRI/PstI
Códigos Frases de Risco
R22 Nocivo por ingestão.
Tabela 3: Frases de segurança das enzimas de restrição EcoRI/PstI
Códigos Frases de segurança
S25 Evitar o contacto com os olhos.
Em caso de contacto com os olhos lavar imediata abundantemente em água e
S26
chamar um médico.
S28 Em caso de contacto com a pele lavar imediata e abundantemente com... (produto
adequado a indicar pelo fabricante).
S36 Usar vestuário de protecção adequado.
S37 Usar luvas adequadas.
S45 Em caso de acidente ou indisposição consultar imediatamente um médico (se
possível mostrar-lhe o rótulo do produto).
S60 Elimina-se o produto e o recipiente como resíduos perigosos.
7.2. Anexo B
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Agradecimentos:
Monitoras do Laboratório Aberto, por todo o apoio prestado. Obrigado!
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