Michaelis-Menten vergelijking beschrijft de kinetische eigenschappen van veel enzymen. <ul><li>1 ste  orde reactie:  V = k...
Hoeveelheid gevormt product bij verschillende substraatconcentraties <ul><li>V 0  is het aantal molen product dat gevormd ...
Afleiding formule van Michaelis Menten <ul><li>E + S  </li></ul><ul><li>E + S  </li></ul><ul><li>E + S  </li></ul><ul><li>...
Afleiding formule van Michaelis Menten <ul><li>k 1  [E].[S] = (k 2  + k -1 )[ES] </li></ul><ul><li>K M  = (k -1  + k 2  )/...
Betekenis van K M <ul><li>Wanneer [S]=K M  dan V 0 =V max /2. </li></ul><ul><li>Een lage K M  wilt dus zeggen dat bij een ...
Gevoeligheid voor alcohol <ul><li>In lever alcohol wordt omgezet in acetaldehyde door alcohol dehydrogenase. </li></ul><ul...
Bepaling van K m  en V max  Lineweaver-Burk plot. 1  K M  1  1 V 0   V max   S  V max =  ×  ×
Lineweaver-Burk plot <ul><li>Helling = K M / V max </li></ul><ul><li>Afsnijding x-as= -1/K M </li></ul><ul><li>Afsnijding ...
K M  waarden van sommige enzymen
Betekenis van K M <ul><li>Stel k -1  >> k 2 </li></ul><ul><li>K M  = k -1 /k 1 </li></ul><ul><li>K ES  = [E]. [S]/[ES] = k...
Turnover number van Enzym <ul><li>Turnover number is het aantal substraat-moleculen dat wordt omgezet in product per secon...
Turnover numbers of some enzymes. <ul><li>k 2  = k cat = V max / E T </li></ul>
f ES  fractie van het aantal enzymen dat is bezet met subtraat <ul><li>Een andere belangrijke grootheid is de fractie van ...
k cat /K M <ul><li>Wanneer de [S] veel groter is dan K M  dan is de snelheid gelijk aan V max .  </li></ul><ul><li>Onder f...
K cat /K M <ul><li>V 0  = {k cat /K M  }[E T ][S] geldt als [S]<<K M </li></ul><ul><li>Dus de snelheid onder deze conditie...
Chymotrypsine.
Meeste biochemische reacties starten met twee substraten en geven twee producten <ul><li>A + B  C + D </li></ul><ul><li>Be...
Sequential Reactions <ul><li>Alle substraten moeten binden aan enzym voordat een product is gevormd. </li></ul>Ordered seq...
random sequential mechanism
Double-Displacement reactions
Remming van enzymen <ul><li>Irreversibele remmers: dissociëren zeer langzaam, sterk gebonden aan enzym. (voorbeeld penicil...
Remming enzymen.
Remming Enzymen De oncompetitive binding site wordt gecreëerd door binding van substraat aan enzym.
Remming Enzymen.
Competitieve remmer. K m app  = Km(1 + [I]/K I )
Upcoming SlideShare
Loading in …5
×

Enzymen 2e deel

3,803 views
3,514 views

Published on

0 Comments
0 Likes
Statistics
Notes
  • Be the first to comment

  • Be the first to like this

No Downloads
Views
Total views
3,803
On SlideShare
0
From Embeds
0
Number of Embeds
0
Actions
Shares
0
Downloads
0
Comments
0
Likes
0
Embeds 0
No embeds

No notes for slide
  • V0 is gedefinieerd als de snelheid van produkt vorming bij verschillende substraat concentraties op tijdstip 0.
  • Bij zeer lage substraat concentraties. K m veel groter dan S. V0= Vmax/Km . [S] 1 ste orde. V0= vmax pseude 0 de orde.
  • Enzymen 2e deel

    1. 1.
    2. 2. Michaelis-Menten vergelijking beschrijft de kinetische eigenschappen van veel enzymen. <ul><li>1 ste orde reactie: V = k [A] k =sec -1 </li></ul><ul><li>2 de orde: V= k [A].[B] k =M -1 sec -1 </li></ul><ul><li>Indien concentratie van B veel groter is dan A dan is de snelheid alleen afhankelijk van de concentratie van A: pseudo 1 ste orde reactie. </li></ul>
    3. 3. Hoeveelheid gevormt product bij verschillende substraatconcentraties <ul><li>V 0 is het aantal molen product dat gevormd wordt per tijdseenheid in het begin van de reactie. V 0 is afhankelijk van substraat-concentratie. </li></ul>
    4. 4. Afleiding formule van Michaelis Menten <ul><li>E + S </li></ul><ul><li>E + S </li></ul><ul><li>E + S </li></ul><ul><li>E + S ES E + P </li></ul><ul><li>V 0 = k 2 [ES] </li></ul><ul><li>Steady state Snelheid van vorming ES is gelijk aan de afbraak van ES. (k -2 is bij benadering 0) </li></ul><ul><li>k 1 [E].[S] = (k 2 + k -1 )[ES] </li></ul>k -2 k 2 k -1 k 1
    5. 5. Afleiding formule van Michaelis Menten <ul><li>k 1 [E].[S] = (k 2 + k -1 )[ES] </li></ul><ul><li>K M = (k -1 + k 2 )/k 1 </li></ul><ul><li>[ES]=[E][S]/K M </li></ul><ul><li>[E] = [E] T – ES </li></ul><ul><li>V max = k 2 [E] T </li></ul><ul><li>V 0 = V max . [S] / {[S]+K M } </li></ul>
    6. 6.
    7. 7. Betekenis van K M <ul><li>Wanneer [S]=K M dan V 0 =V max /2. </li></ul><ul><li>Een lage K M wilt dus zeggen dat bij een lage substraatconcentratie al een snelheid bereikt wordt die gelijk is aan de helft van de maximale. </li></ul><ul><li>Fysiologische betekenis van K M . </li></ul>
    8. 8. Gevoeligheid voor alcohol <ul><li>In lever alcohol wordt omgezet in acetaldehyde door alcohol dehydrogenase. </li></ul><ul><li>Acetaldehyde wordt omgezet in azijnzuur door aldehyde-dehydrogenase. </li></ul><ul><li>Meeste mensen hebben twee vormen van aldehyde-dehydrogenase: </li></ul><ul><li>een lage K M (mitochondriën) en </li></ul><ul><li>een hoge K M (cytoplasma). </li></ul><ul><li>Mensen die gevoelig zijn voor alcohol is het mitochondriale enzym minder actief door verandering van een aminozuur en acetaldehyde wordt alleen afgebroken door cytoplasmatisch enzym dat een hoge K M heeft. </li></ul>
    9. 9. Bepaling van K m en V max Lineweaver-Burk plot. 1 K M 1 1 V 0 V max S V max = × ×
    10. 10. Lineweaver-Burk plot <ul><li>Helling = K M / V max </li></ul><ul><li>Afsnijding x-as= -1/K M </li></ul><ul><li>Afsnijding y-as = 1/ V max </li></ul>1 K M 1 1 V 0 V max S V max = × ×
    11. 11. K M waarden van sommige enzymen
    12. 12. Betekenis van K M <ul><li>Stel k -1 >> k 2 </li></ul><ul><li>K M = k -1 /k 1 </li></ul><ul><li>K ES = [E]. [S]/[ES] = k -1 /k 1 </li></ul><ul><li>Dus K M = K ES </li></ul><ul><li>m.a.w. K M is gelijk aan de dissociatieconstante van het ES-complex indien k -1 veel groter is dan k 2. Dus onder die condities is K M een maat voor de sterkte van ES-complex. </li></ul><ul><li>Een hoge K M geeft zwakke binding aan. </li></ul>
    13. 13. Turnover number van Enzym <ul><li>Turnover number is het aantal substraat-moleculen dat wordt omgezet in product per seconde wanneer het enzym volledig verzadigd is met substraat. </li></ul><ul><li>Turnover number is gelijk aan k 2 (ook wel k cat genoemd. </li></ul><ul><li>V max =k 2 [E] T </li></ul>
    14. 14. Turnover numbers of some enzymes. <ul><li>k 2 = k cat = V max / E T </li></ul>
    15. 15. f ES fractie van het aantal enzymen dat is bezet met subtraat <ul><li>Een andere belangrijke grootheid is de fractie van het enzym dat bezet is met substraat: </li></ul><ul><li>f ES = V / V max = [S] / {[S]+ K M } </li></ul>
    16. 16. k cat /K M <ul><li>Wanneer de [S] veel groter is dan K M dan is de snelheid gelijk aan V max . </li></ul><ul><li>Onder fysiologische omstandigheden is de verhouding van [S]/K M gelegen tussen 0.01 en 1. </li></ul><ul><li>V 0 = {k cat /K M }[E][S] </li></ul><ul><li>Als [S] <<K M dan [E]=[E T ] </li></ul><ul><li>V 0 = {k cat /K M }[E T ][S] </li></ul>
    17. 17. K cat /K M <ul><li>V 0 = {k cat /K M }[E T ][S] geldt als [S]<<K M </li></ul><ul><li>Dus de snelheid onder deze condities is afhankelijk van k cat /K M , [S] en [E T ]. </li></ul><ul><li>k cat /K M is de snelheids constante voor de interactie van E plus substaart. </li></ul>
    18. 18. Chymotrypsine.
    19. 19. Meeste biochemische reacties starten met twee substraten en geven twee producten <ul><li>A + B C + D </li></ul><ul><li>Beide substraten moeten binden aan enzym. Twee klassen: </li></ul><ul><li>Sequential reactions. </li></ul><ul><li>Double displacements reactions. </li></ul>
    20. 20. Sequential Reactions <ul><li>Alle substraten moeten binden aan enzym voordat een product is gevormd. </li></ul>Ordered sequential mechanism
    21. 21. random sequential mechanism
    22. 22. Double-Displacement reactions
    23. 23. Remming van enzymen <ul><li>Irreversibele remmers: dissociëren zeer langzaam, sterk gebonden aan enzym. (voorbeeld penicilline bindt covalent aan enzym transpeptidase) </li></ul><ul><li>Reversibele remmers: Snelle dissociatie ; </li></ul><ul><li>Competitieve; oncompetitieve en noncompetitieve </li></ul>
    24. 24. Remming enzymen.
    25. 25. Remming Enzymen De oncompetitive binding site wordt gecreëerd door binding van substraat aan enzym.
    26. 26. Remming Enzymen.
    27. 27. Competitieve remmer. K m app = Km(1 + [I]/K I )

    ×