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170      Reproduction, Fertility and Development                                                                                Artificial Insemination



         24 EFFECT OF GnRH ON FIXED-TIMED ARTIFICIAL INSEMINATION PREGNANCY RATES
                                   OF WHITE-TAILED DEER
                     J. LambeA , W. ForbesB , B. M. OlcottC , D. E. SandersB , R. A. GodkeA , and G. T. GentryA
                            A LSU   Embryo Biotechnology Center, Reproductive Biology Center, St. Gabriel, LA USA;
                            B Jones Idlewild Research Station, Louisiana State University AgCenter, Clinton, LA USA;
                                           C LSU School of Veterinary Medicine, Baton Rouge, LA USA


During the fall 2008 breeding season in Louisiana, 2 synchronization protocols for fixed-timed artificial insemination (FTAI) in White-tailed deer
were assessed. The objective was to determine if GnRH at FTAI improved pregnancy rates in White-tailed deer. White-tailed does (n = 35) with a
mean body weight of 65.8 kg (range: 54.0 to 79.8 kg) and average age of 5.9 years (range: 1.5 to 9.5 years) were stratified by weight, age, and last
fawning date into 2 groups. Treatment and control synchronization protocols were randomly assigned to each group. Does were synchronized with a
CIDR-G device for 14 d and were then subjected to either FTAI 60 h post-CIDR removal (control, n = 17) or 100 µg (i.m.) injection of GnRH at FTAI
60 h post-CIDR removal (treated, n = 18). At insemination (AI), insemination pipette placement score (IP; 0 = at cervical os to 3 = within uterine
body), mucous scores (clear/cloudy, viscous/nonviscous, or no secretions), vulva assessments (hyperemic/nonhyperemic and swollen/not swollen),
and sperm progressive motility were recorded. Does were inseminated with frozen–thawed sperm (5 × 107 progressively motile cells pre-freeze)
from 2 fertile bucks stratified across each treatment group. Starting 28 d following AI, intact bucks (ITB) were introduced into both groups for natural
mating. Pregnancy was determined via transrectal ultrasonography 73 or 80 d postinsemination. Does, confirmed pregnant via ultrasonography,
had fawns within the reported gestation range of 187 to 222 days. Placentomes were visualized and measured in AI pregnancies (range: 32.7
to 56.2 mm in length), whereas pregnancies derived from ITB presented no identifiable placentomes. However, crown-rump measurements were
obtainable from ITB pregnancies (range: 13.4 to 21.7 mm). Five does were not included in the final analyses as they were either lost to predators or
removed because of illness. IP (1.4 ± 0.24 v. 1.3 ± 0.30; P = 0.671), mucous classifications (3.0 ± 0.35 v. 2.5 ± 0.39; P = 0.311), vulva assessments
(2.1 ± 0.29, 1.7 ± 0.23; P = 0.223), and sperm motility (1.6 ± 0.16, 1.7 ± 0.22; P = 0.829) were not different for pregnant and nonpregnant AI
does, respectively. Treatment did not affect AI pregnancy rates (53 v. 27%) or fecundity rates (1.6 v. 1.3 offspring/doe) for the GnRH treated and
control groups, respectively. Addition of GnRH to a 14-day estrus synchronization protocol did not result in significantly higher pregnancy rates
compared with controls. More studies are needed to determine the effect of GnRH on White-tailed pregnancies following FTAI protocols. We have
demonstrated that differentiating pregnancies derived from AI and ITB could be accomplished by utilizing transrectal ultrasonography as early as
73 d postinsemination in White-tailed does.

        25 ADDITION OF FSH, IN CONTRAST TO eCG, DOES NOT INCREASE PREGNANCY RATES IN
         ANESTROUS NELLORE (BOS INDICUS) COWS TREATED WITH FIXED-TIME AI PROTOCOL
                                         L. A. Lima, V G. Pinheiro, J. R. Cury, and C. M. Barros
                                                      .
                                        University of São Paulo State (UNESP), Botucatu, São Paulo, Brazil

There are reports in the literature indicating that use of eCG improves pregnancy rates in Bos indicus anestrous cows treated with a progesterone-based
fixed-time AI (FTAI) protocol. More recently, replacement of eCG by FSH in FTAI protocols was reported to have beneficial effects (Bos indicus)
or no effect (Bos taurus) on pregnancy rates. In the present experiment the effects of eCG and FSH on pregnancy rates were compared in an FTAI
protocol. Primiparous lactating Nellore cows (40 to 80 days postpartum, n = 421) with a body condition score of 2.5 to 3.0 (on a 1 to 5 scale) were
randomly allocated in 3 groups: Control (CTR), eCG, and FSH. In the control group, all animals received a progesterone (P4 )-releasing intravaginal
device (1.55 g, PRID® , Ceva Sante Animale S.A., Libourne, France) and 2.5 mg of estradiol benzoate (EB, i.m. Estrogin® , Farmavet, São Paulo,
Brazil), on Day 0 (D0). Eight days later (D8), at the time of the intravaginal device withdrawal, PGF2α (150 µg, D-cloprostenol, i.m. Prolise® , ARSA
S.L.R., Buenos Aires, Argentina) was administered. Twenty-four hours after PRID removal, cows were treated with EB (1.0 mg, i.m.), and FTAI
was done 30 to 36 h later. In the eCG and FSH groups, the cows were treated with 20 mg of FSH (Folltropin-V® , i.m. Bioniche, Belleville, Canada)
or 400 IU of eCG (Novormon® , i.m. Syntex, Buenos Aires, Argentina), respectively, at the time of PGF2α administration. Ovarian ultrasonography
(Aloka SSD 500, 7.5-MHz probe, Aloka, Tokyo, Japan) was performed 10 days prior to and at the beginning of FTAI protocol to select the animals
in postpartum anestrous (absence of CL in both examinations). The pregnancy diagnosis was performed by ultrasonography 30 days after FTAI.
Data were analyzed by logistic regression (SAS Institute, Cary, NC, USA). Cows treated with eCG had a higher pregnancy rate (41.5%, 95/229;
P < 0.05) than those treated with FSH (22.7%, 22/97) or in the control group (26.3%, 25/95). Pregnancy rates of animals treated with FSH did not
differ (P > 0.05) from those in the control group. These results indicated that, in lactating primiparous anestrous Nellore cows, the use of eCG in a
FTAI protocol improves the pregnancy rate, whereas FSH has no beneficial effect.
V G. Pinheiro received a fellowship from FAPESP (São Paulo, Brazil). The authors are grateful to Ceva Animal Health for providing the intravaginal
 .
devices (PRID® ) used in this experiment.

           26    SPERM MOTILITY DECREASING AND SEMEN FERTILITY IN THE BULL EVALUATED
                                         BY BIOSPECKLE
                                   R. S. Macedo, J. B. Barreto Filho, R. A. Braga Jr, and G. F Rabelo
                                                                                              .
                                                    Lavras Federal University, Lavras, MG, Brazil

Sperm motility decreasing in a semen sample over time is an indirect approach to assess spermatozoa viability and should be related to the ejaculate
fertility. The biospeckle (BSL) is an interacting phenomenon between laser light and biological specimens that allows measurement of sperm kinetic

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  • 1. 170 Reproduction, Fertility and Development Artificial Insemination 24 EFFECT OF GnRH ON FIXED-TIMED ARTIFICIAL INSEMINATION PREGNANCY RATES OF WHITE-TAILED DEER J. LambeA , W. ForbesB , B. M. OlcottC , D. E. SandersB , R. A. GodkeA , and G. T. GentryA A LSU Embryo Biotechnology Center, Reproductive Biology Center, St. Gabriel, LA USA; B Jones Idlewild Research Station, Louisiana State University AgCenter, Clinton, LA USA; C LSU School of Veterinary Medicine, Baton Rouge, LA USA During the fall 2008 breeding season in Louisiana, 2 synchronization protocols for fixed-timed artificial insemination (FTAI) in White-tailed deer were assessed. The objective was to determine if GnRH at FTAI improved pregnancy rates in White-tailed deer. White-tailed does (n = 35) with a mean body weight of 65.8 kg (range: 54.0 to 79.8 kg) and average age of 5.9 years (range: 1.5 to 9.5 years) were stratified by weight, age, and last fawning date into 2 groups. Treatment and control synchronization protocols were randomly assigned to each group. Does were synchronized with a CIDR-G device for 14 d and were then subjected to either FTAI 60 h post-CIDR removal (control, n = 17) or 100 µg (i.m.) injection of GnRH at FTAI 60 h post-CIDR removal (treated, n = 18). At insemination (AI), insemination pipette placement score (IP; 0 = at cervical os to 3 = within uterine body), mucous scores (clear/cloudy, viscous/nonviscous, or no secretions), vulva assessments (hyperemic/nonhyperemic and swollen/not swollen), and sperm progressive motility were recorded. Does were inseminated with frozen–thawed sperm (5 × 107 progressively motile cells pre-freeze) from 2 fertile bucks stratified across each treatment group. Starting 28 d following AI, intact bucks (ITB) were introduced into both groups for natural mating. Pregnancy was determined via transrectal ultrasonography 73 or 80 d postinsemination. Does, confirmed pregnant via ultrasonography, had fawns within the reported gestation range of 187 to 222 days. Placentomes were visualized and measured in AI pregnancies (range: 32.7 to 56.2 mm in length), whereas pregnancies derived from ITB presented no identifiable placentomes. However, crown-rump measurements were obtainable from ITB pregnancies (range: 13.4 to 21.7 mm). Five does were not included in the final analyses as they were either lost to predators or removed because of illness. IP (1.4 ± 0.24 v. 1.3 ± 0.30; P = 0.671), mucous classifications (3.0 ± 0.35 v. 2.5 ± 0.39; P = 0.311), vulva assessments (2.1 ± 0.29, 1.7 ± 0.23; P = 0.223), and sperm motility (1.6 ± 0.16, 1.7 ± 0.22; P = 0.829) were not different for pregnant and nonpregnant AI does, respectively. Treatment did not affect AI pregnancy rates (53 v. 27%) or fecundity rates (1.6 v. 1.3 offspring/doe) for the GnRH treated and control groups, respectively. Addition of GnRH to a 14-day estrus synchronization protocol did not result in significantly higher pregnancy rates compared with controls. More studies are needed to determine the effect of GnRH on White-tailed pregnancies following FTAI protocols. We have demonstrated that differentiating pregnancies derived from AI and ITB could be accomplished by utilizing transrectal ultrasonography as early as 73 d postinsemination in White-tailed does. 25 ADDITION OF FSH, IN CONTRAST TO eCG, DOES NOT INCREASE PREGNANCY RATES IN ANESTROUS NELLORE (BOS INDICUS) COWS TREATED WITH FIXED-TIME AI PROTOCOL L. A. Lima, V G. Pinheiro, J. R. Cury, and C. M. Barros . University of São Paulo State (UNESP), Botucatu, São Paulo, Brazil There are reports in the literature indicating that use of eCG improves pregnancy rates in Bos indicus anestrous cows treated with a progesterone-based fixed-time AI (FTAI) protocol. More recently, replacement of eCG by FSH in FTAI protocols was reported to have beneficial effects (Bos indicus) or no effect (Bos taurus) on pregnancy rates. In the present experiment the effects of eCG and FSH on pregnancy rates were compared in an FTAI protocol. Primiparous lactating Nellore cows (40 to 80 days postpartum, n = 421) with a body condition score of 2.5 to 3.0 (on a 1 to 5 scale) were randomly allocated in 3 groups: Control (CTR), eCG, and FSH. In the control group, all animals received a progesterone (P4 )-releasing intravaginal device (1.55 g, PRID® , Ceva Sante Animale S.A., Libourne, France) and 2.5 mg of estradiol benzoate (EB, i.m. Estrogin® , Farmavet, São Paulo, Brazil), on Day 0 (D0). Eight days later (D8), at the time of the intravaginal device withdrawal, PGF2α (150 µg, D-cloprostenol, i.m. Prolise® , ARSA S.L.R., Buenos Aires, Argentina) was administered. Twenty-four hours after PRID removal, cows were treated with EB (1.0 mg, i.m.), and FTAI was done 30 to 36 h later. In the eCG and FSH groups, the cows were treated with 20 mg of FSH (Folltropin-V® , i.m. Bioniche, Belleville, Canada) or 400 IU of eCG (Novormon® , i.m. Syntex, Buenos Aires, Argentina), respectively, at the time of PGF2α administration. Ovarian ultrasonography (Aloka SSD 500, 7.5-MHz probe, Aloka, Tokyo, Japan) was performed 10 days prior to and at the beginning of FTAI protocol to select the animals in postpartum anestrous (absence of CL in both examinations). The pregnancy diagnosis was performed by ultrasonography 30 days after FTAI. Data were analyzed by logistic regression (SAS Institute, Cary, NC, USA). Cows treated with eCG had a higher pregnancy rate (41.5%, 95/229; P < 0.05) than those treated with FSH (22.7%, 22/97) or in the control group (26.3%, 25/95). Pregnancy rates of animals treated with FSH did not differ (P > 0.05) from those in the control group. These results indicated that, in lactating primiparous anestrous Nellore cows, the use of eCG in a FTAI protocol improves the pregnancy rate, whereas FSH has no beneficial effect. V G. Pinheiro received a fellowship from FAPESP (São Paulo, Brazil). The authors are grateful to Ceva Animal Health for providing the intravaginal . devices (PRID® ) used in this experiment. 26 SPERM MOTILITY DECREASING AND SEMEN FERTILITY IN THE BULL EVALUATED BY BIOSPECKLE R. S. Macedo, J. B. Barreto Filho, R. A. Braga Jr, and G. F Rabelo . Lavras Federal University, Lavras, MG, Brazil Sperm motility decreasing in a semen sample over time is an indirect approach to assess spermatozoa viability and should be related to the ejaculate fertility. The biospeckle (BSL) is an interacting phenomenon between laser light and biological specimens that allows measurement of sperm kinetic