Reporte #6 halos de inhibicion

1. Centro de Bachillerato Tecnológico Industrial y de Servicios #128
Práctica 6. Halos de Inhibición.
Submódulo #3: Ejecuta técnicas de identificación de Microorganismos con
base en las normas.
Integrantes: Chavira Ruiz Teresa Edith, Mercado Galaviz Diana Laura, Mercado Portillo Saira
Nayeli, Morales Cardona Andrea Isabel, Muños Armenta Alejandra, Nieves Flores Sergio Aarón,
Olivas Barrientos Lizbeth Tatiana, Picasso Aldair, Portillo Robles Javier Armando.
Facilitadora: Ing. Acosta Jessica.
Introducción
En esta práctica se van a realizar halos de
inhibición. Para empezar tenemos que saber
que es un halo de inhibición Halo de
inhibición que es la zona alrededor de un
disco de antibiótico en un antibiograma en el
que no se produce crecimiento bacteriano en
una placa de agar inoculada con el germen.
Es una medida de la potencia del antibiótico
frente al germen.
El antibiograma es la prueba microbiológica
que se realiza para determinar la
susceptibilidad (sensibilidad o resistencia) de
una bacteria a un grupo de antibióticos. Las
técnicas de antibiograma son las utilizadas
en el laboratorio de microbiología para
estudiar la actividad de los antimicrobianos
frente a los microorganismos responsables
de las infecciones.
Se considera como antimicrobiana cualquier
sustancia con capacidad de matar o al
menos de inhibir el crecimiento de los
microorganismos y que sea susceptible de
utilización como tratamiento en los pacientes.
Pueden ser naturales, sintéticos o
semisintéticos (modificación química de un
compuesto natural). La historia moderna de
los antibióticos comienza con el
descubrimiento de sustancias presentes en
unos microorganismos capaces de matar a
otros microorganismos. La utilización de
antibióticos supuso un avance enorme en la
esperanza de vida de las personas que
padecían procesos infecciosos, aunque
también supuso un aumento en los niveles
de resistencia antibiótica.
Y el método que se aplica en esta práctica es
el de la difusión en medio solido: Se siembra,
con el germen a estudiar, una placa de un
medio de cultivo adecuado. Sobre la
superficie del medio se colocan discos de
papel impregnados con el antibiótico o
quimioterápico a ensayar. Si el germen
estudiado es sensible, en torno al disco se
observará un halo, en el cual no hay
proliferación de bacterias. Si el germen es
resistente al antibiótico, crecerá
uniformemente y no habrá ningún halo de
inhibición en torno al disco de papel.
Resumen
Durante esta práctica nos dedicamos a
observar los halos de inhibición de diversas
muestras tales son un trapo de cocina,
muestra de manos sin lavarse, H2O de baño,
taza de baño etc. Tomamos la muestra
primeramente con cotonetes esterilizados
después de eso se preparó el agar

2. posteriormente se estrió después de eso con
papel filtro pudimos y distintos detergentes o
sustancias que impidan el crecimiento
bacteriano tales son Pinol, Jabón de cocina,
cloro y fabuloso Usas pequeños cuadritos de
papel filtro y sumergimos estos en estas
sustancias posteriormente los colocamos en
los agares nutritivos y dejamos crecer las
bacterias en la incubadora.
Al pasar el tiempo vimos que no había casi
bacterias de ningún tipo solo en unas
cuantas cajas de las cuales hicimos una
morfología colonial y la tinción de Gram y
para finalizar esterilizando
Abstract: During this practice we are
dedicated to observe inhibition halos of
various samples such as are dish clothes,
samples of hands without washing, H2O
hand washing bath, toilet etc. We took the
samples, first with cotton swabs sterilized,
afterwards the agar were prepared,
subsequently grooved and then we prepared
with filter paper different detergents or
substances that prevent the growth of
bacteria such as Pinole, kitchen Soap,
chlorine and Fabulous. We used small
squares of paper filter and immerse them in
these substances; subsequently we placed
them in nutrient agars and let bacteria grow in
the incubator. As time pass by, we saw that
there were almost no single type of bacteria
but only on a few boxes which we did
morphology staining and gram staining to
sterilize at the end.
Materiales y Métodos:
El equipo, material, reactivos y
procedimientos utilizados en la elaboración
de ésta práctica serán mencionados a
continuación:
Material:
 7 cajas petri
 4 vidrios de reloj
 1 báscula
 3 Mecheros
 1 Asa
 1 Matraz
 Portaobjetos
 Cubreobjetos
 1 microscopio
 Incubadora
 Papel filtro
 Autoclave
 Pinzas
Reactivos:
 Agar nutritivo
 Cloro
 Fabuloso
 Pinol
 Jabón de trastes
 Muestra de agua de baño
 Muestra de trapeador
 Muestra de lavabo
 Cristal violeta
 Iodo-lugol
 Alcohol-cetona
 Safranina
 Aceite de inmersión
Procedimiento No. 1
Preparación de los medios de cultivo.
1. Primeramente para tener cajas petri
completamente esterilizadas y
limpias, se envuelven las cajas con

3. papel canela y se introducen en la
autoclave.
2. Se vigila que no se pase de una
presión de 15(Lb/inˆ2).
3. Se hacen los cálculos necesarios
para preparar la cantidad deseada de
Agar Nutritivo. Para 400 ml son 14.4
g de solución.
4. Verterlo en el matraz con la cantidad
de agua destilada a utilizar.
5. Calentar la mezcla con la ayuda del
mechero y agitar continuamente para
que los rastros sólidos del Agar
desaparezcan.
6. Retirar de la llama después de que
haya hervido por dos minutos y
colocar el ``gorrito´´ para ser
esterilizado.
Procedimientos No. 2:
Realización del estriado.
1. Se realiza el vaciado
correspondiente, 20 ml de Agar
en cada caja.
2. Se espera a que cuaje; puede
tardar un día.
3. Se preparan las muestras a
inocular diluyéndolas en agua
sobre el vidrio de reloj.
4. Posteriormente se recorta el
papel filtro aproximadamente
0.5cm2, 4 cuadrados para cada
caja.
5. Con unas pizas se toman cada
uno de los cuadrados y se
sumergen en la muestra de
desinfectantes.
6. Con el asa previamente esterilizada,
se inoculan las muestras, (con una
mano tomar la caja, abrirla con la misma
aproximadamente a 45º y se hace el
estriado que mejor se maneje con la
mano contraria), de lavabo, trapeador,
etc., en una caja distinta
respectivamente.
7. Al terminar de inocular el asa se
esteriliza nuevamente y se colocan los 4
halos en el Agar.
8. Una vez terminado el estriado, las cajas
son introducidas en la incubadora.
Procedimientos No. 3:
Morfología.
1. Después de unos días, se procede a
sacar los medios de cultivo de la
incubadora, para realizar la cuenta de
colonias y la morfología de cada una.
2. Para hacer la morfología de las
bacterias se realiza la tinción de Gram
3. Se coloca una gota de agua en un
portaobjetos, previamente etiquetado con
la colonia que se trabajara sobre él.
4. Tomar muestra de una colonia y se
dispersa en la gota de agua con la ayuda
del asa.
5. Dejar secar, para proceder a fijar la
muestra (se pasa 3 veces el portaobjetos
por la llama del mechero).
6. Se agrega una gota de cristal violeta por
1 min. y se enjuaga en forma de Z.
7. Se agrega una gota de iodo-lugol por 1
min. y posteriormente se enjuaga.
8. Se agrega una gota de alcohol-cetona
por 30 segundos y se enjuaga.

4. 9. Después agregar una gota de safranina
por 30 segundos y enjuagar.
10. Finalmente se agrega aceite de
inmersión y se coloca un cubreobjetos
para después observarse en el
microscopio a 100X.
11. En seguida se hace la morfología de
cada bacteria.
12. Al final de la práctica se procede a
realizar el primer procedimiento antes
mencionado. Se esterilizan los materiales
para eliminar cualquier agente patógeno
resultando.
Resultados:
Tabla No. 1
Muestras Bacterias
Muestra de uña Cocos-positivos
Muestra de
cocina
Cocos-positivos
Muestra de
trapeador
Cocos positivos
Muestra de
baño
No se tiño
Tabla No. 2
Conclusión
Chavira Ruiz Teresa Edith:
En esta práctica se vio los halos de inhibición
realizado con jabón de trastes, fabuloso,
pinol y cloro para ver cuales tenían más
niveles de inhibición, encima del papel filtro
que tenía pinol crecieron bacterias encima
del papel, pero aquí se vio cuales productos
tienen más inhibición de bacterias.
Diana Mercado Conclusión:
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Nada No

5. La práctica realizada anteriormente pone a
prueba los halos de inhibición. Se usó para
conocer la efectividad de los limpiadores así
como: cloro, fabuloso, pinol, jabón de trastes.
Esto en superficies como la del baño, la
cocina, lavabo y objetos como un trapo, el
trapeador o hasta las manos.
Con esta práctica se logró identificar cuál de
los limpiadores usados anteriormente eran
los menos efectivos en la limpieza, estos
fueron fabuloso y pinol. Cabe mencionar que
los halos de inhibición no pudieron ser
identificados o bien encontrados.
Mercado Portillo Saira Nayeli.
En esta práctica se realizaron varios
procedimientos, principalmente se quiso
saber cuáles desinfectantes son efectivos a
algunas bacterias y cuáles no. Se entendió
que desinfectantes son más potentes con
algunas bacterias y se hizo morfología de las
que no sufrieron mucho daño al tener el
inhibidor cerca.
Al colocar los cuadrados con las muestras se
quiso obtener los resultados de cuáles eran
los mejores agentes en contra de las
bacterias patógenas; con cuales bacterias
son más fuertes y con cuales más débiles. Y
para poder saber eso se realizaron las
morfologías de las bacterias afectadas y
también de las que no.
Morales Cardona Andrea Isabel
En esta práctica volvimos a utilizar los
medios de cultivo, se hicieron cultivos a partir
de muestras de utensilios y lugares de la vida
cotidiana, aprendimos a realizar los halos
de inhibición, en este caso utilizamos 4 tipos
de limpiadores de uso comercial para ver y
comprobar que eficacia tiene frente a los
gérmenes y cuál de todos era el más eficaz,
desgraciadamente no se pudo ver
crecimiento de halos, por lo que puedo
concluir que los limpiadores que se dicen
efectivos frente a las bacterias no fueron muy
eficientes contra la mayoría de las bacterias
con las que estamos en contacto
cotidianamente y que hay otros que pueden
ser mejor como los que provienen de la
naturaleza y pueden ser más seguros.
Muños Armenta Alejandra
Y podemos concluir que es empleado para
determinar la sensibilidad de un agente
microbiano frente a un antibiótico o
quimioterápico. Este método comprende lo
que se denomina un antibiograma o prueba
de susceptibilidad bacteriana frente a drogas
específicas. Es un método solo cualitativo,
orientado al tratamiento. No es aplicable a
microorganismos de crecimiento lento ni a
microorganismos anaerobios. Antibióticos
como la polimixina o la vancomicina no
tienen buena difusión en agar.
Nieves Flores Sergio Aarón:
Al no formarse los halos concluyo que la
práctica estuvo mal hecha ya que los
desinfectantes comerciales están apegados a
normas de seguridad en donde tienen que
pasar ciertos criterios para poder vender y
distribuir el producto y al no observarse un
halo indicaría que el desinfectante no es
efectivo para inhibir el crecimiento de
colonias bacterianas, aunque también es

6. cierto que algunos desinfectantes naturales
pueden resultar más efectivos y menos
dañinos a nuestra salud.
Picasso Aguirre Aldair
Por medio de los resultados obtenidos en
esta práctica concluyo que las sustancias
usadas para crear los halos si son tan en su
mayoría efectivas contra la mayoría de las
bacterias con las que podemos estas en
contacto cotidianamente pero que hay otros
que pueden ser mejor como los que
provienen de la naturaleza. En conclusión
son efectivamente y recomendables por su
eficiencia.
Portillo Robles Javier Armando:
Mi conclusión es que en esta práctica otra
vez cultivamos otro tipo de agar y esta vez
estaríamos suciedad de manos y uñas
también parte de un trapeador y de un trapo
en eso pusimos 4 tipos de jabón antibacterial
en eso solo soy en uno creció y era en el
pinol (creo) en todos los demás no creció
nada más realmente creo que fue por el tipo
de jabones que usamos que fue pinol, jabón
de trastes, cloro y en polvo pero en fin
también hicimos lo de halos de inhibición
Discusión:
En esta práctica se realizaron distintos
cultivos a partir de muestras tomadas de
utensilios y lugares de la vida cotidiana, todo
esto con el fin de realizar la parte más
importante de esta práctica: Los halos de
inhibición. Que es una medida de la potencia
del antibiótico frente un germen.
En este caso los utilizamos con el fin de
observar que tipo de limpiador funciona
mejor frente a estas bacterias encontradas
en las muestras, de los cuales se utilizó
jabón de trastes, pinol, cloro y fabuloso, pero
desgraciadamente no pudimos observar
inhibición.
En las primeras 24 hrs al sacarlas de la
incubadora solo observamos un escaso
crecimiento de bacterias en cada uno de los
cultivos, se realizó morfología y una tinción
se observó que todas eran cocos positivos
que no son malignos para nuestra salud y
volvieron a introducirse a la incubadora.
Al día siguiente tampoco se observaron halos
de inhibición y se encontró el crecimiento de
bacterias en 2 cultivos, con esto se demostró
que los limpiadores no son tan eficientes
frente a estas bacterias, ya que no pudo
verse crecimiento de halos.
Bibliografía:
http://www.apcontinuada.com/es/el-
antibioigrama-interpretacion-del-
antibiograma/articulo/80000504/
http://www.ija.csic.es/gt/tele/TUTORIAL%20A
.I/farmaco/halos.htm
http://labmicrofarmaciaulat.blogspot.mx/p/ela
boracion-de-un-antibiograma.html
Anexo