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  • 1. Manual de práctica de Microbiología en formato Digital Maestra Altagracia Jiménez Díaz
  • 2. Manual de práctica de Microbiología en formato Digital <ul><li>Índice: </li></ul><ul><li>Algunos equipos utilizados en microbiología </li></ul><ul><li>Morfología y disposición de las células bacterianas </li></ul><ul><li>Distribución de microorganismos en el ambiente </li></ul><ul><li>Medios de cultivo Métodos de siembra </li></ul><ul><li>Las coloraciones </li></ul><ul><li>Acción de las bacterias sobre los hidratos de carbono Acción de las bacterias sobre las proteínas </li></ul><ul><li>Hemólisis </li></ul><ul><li>Pigmentos </li></ul><ul><li>Prueba de sensibilidad a los antimicrobianos. </li></ul><ul><li>Estudio bacteriológico del agua y otros líquidos de consumo </li></ul>01/08/11
  • 3. Manual de práctica de Microbiología Digital <ul><li>Objetivo: </li></ul><ul><li>Apropiar al estudiante que se inicia en el campo de la microbiología del conocimiento, en técnicas bacteriológicas. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 4. 01/08/11 Equipos de Laboratorio
  • 5. Equipos del Laboratorio de Microbiología <ul><li>Asas y agujas bacteriológicas </li></ul><ul><li>Placas de Petri. </li></ul><ul><li>Porta objetos. </li></ul><ul><li>Incubadora. </li></ul><ul><li>Autoclave. </li></ul><ul><li>Microscopio </li></ul><ul><li>Mechero </li></ul><ul><li>Nevera </li></ul><ul><li>Tubo de ensayo </li></ul>01/08/11
  • 6. Frasco de la Vela <ul><li>Se utiliza para Crear la atmósfera para microorganismos microaerofilicos. </li></ul><ul><li>Se obtiene un ambiente de baja tensión de oxigeno y de 10 12 % de C o 2 </li></ul><ul><li>La vela no debe colocarse sobre los medios de cultivo sino al lado, dentro de el frasco. </li></ul>01/08/11
  • 7. Placa de Petri. <ul><li>Las placas de Petri son: recipientes de vidrio, plástico u otros materiales constituidos por dos piezas; una tapa y una base, la base descansa sobre la tapa y se utilizan para colocar los medios de cultivo sólidos y se logra el desarrollo de cultivos en amplia superficie y facilitar el conteo de las colonias. </li></ul>01/08/11
  • 8. Jarra de Gas Pak <ul><li>Se utiliza para Crear la atmósfera para microorganismos anaerobios . </li></ul>01/08/11
  • 9. Porta Objetos <ul><li>Se utiliza para preparar los frotis </li></ul>01/08/11
  • 10. Asas y agujas <ul><li>Se utilizan para pescar transportar y sembrar el material bacteriológico </li></ul><ul><li>Se esterilizan en el mechero al rojo vivo antes y después de las siembras bacteriológicas. </li></ul>01/08/11
  • 11. Tubos de ensayo <ul><li>El tapón de los tubos se sostiene con el dedo meñique. </li></ul>01/08/11
  • 12. Microscopio 01/08/11
  • 13. Autoclave <ul><li>Autoclave: utiliza vapor de agua a 121 ºC durante 15'o 20'. Esta temperatura se logra si se obtiene una presión de una atmósfera relativa (dos atmósferas absolutas o sea 15 libras de presión por pulgadas al cuadrado), ya que el aumento de la presión provoca aumentos proporcionales en el punto de ebullición del agua. </li></ul><ul><li>Es el mecanismo de destrucción microbiana más efectivo, y bien utilizado asegura esterilización .( Destruye la forma de vida vegetativa y esporulada) </li></ul>01/08/11
  • 14. AUTOCLAVE <ul><li>Se utiliza para esterilizar y funciona a 121 °c </li></ul><ul><li>15 libras de presion por pulgadas cuadradas en un tiempo de 15 a 20 minutos. </li></ul>
  • 15. Incubadora <ul><li>Se utiliza para proporcionar la temperatura optima a las bacterias. </li></ul>
  • 16. Contador de colonias. <ul><li>Se utiliza para el conteo de colonias. </li></ul>
  • 17. Mechero de bunsen <ul><li>Utensilio metálico que permite calentar sustancias. Presentan una base, un tubo, una chimenea, un collarín y un vástago. Con ayuda del collarín se regula la entrada de aire. Para lograr calentamiento adecuados hay que regular la flama del mechero a modo tal que ésta se observe bien oxigenada (flama azul). </li></ul>
  • 18. Nevera <ul><li>Se utiliza para conservar a una temperatura adecuada los medios de cultivos y cepas bacterianas. </li></ul>
  • 19. Nevera: laboratorio de microbiología
  • 20. Microscopia Morfología de las bacterias <ul><li>MORFOLOGIA Y DISPOSICIÓN DE LAS CELULAS BACTERIANAS </li></ul><ul><li>Se da una gran variedad de tamaños y forma entre las bacterias. </li></ul><ul><li>La mayoría de ellas oscilan entre 0,2 y 2,0 µm de diámetro y presentan una de las tres morfologías básicas siguientes: </li></ul><ul><li>La esférica o de coco (que significa «baya»), la de bastoncillo o bacilo y la espiral. </li></ul>01/08/11
  • 21. Cocos <ul><li>Los cocos suelen ser esféricos, pero pueden ser ovalados, alargados o con un lado aplanado. Cuando los cocos se dividen para reproducirse pueden permanecer unidos uno a otro. Los cocos que permanecen en parejas tras dividirse se llaman Diplococos . </li></ul><ul><li>Aquellos que se dividen en dos planos y forman grupos de cuatro se conocen como Tétradas . </li></ul>01/08/11
  • 22. Cocos <ul><li>Los que se dividen por tres planos regulares y quedan divididos en grupos cúbicos de ocho se llaman Sarcinas </li></ul><ul><li>Aquellos que se dividen siguiendo planos al azar y forman células en paquetes irregulares son los: Estafilococos </li></ul><ul><li>y si se presentan en cadenas se denominan Estreptococos. </li></ul>01/08/11
  • 23. Disposición de los cocos 01/08/11
  • 24. Bacilos <ul><li>Disposición de los bacilos: </li></ul><ul><li>Los Diplobacilos aparecen en parejas tras la división </li></ul><ul><li>Los Estreptobacilos se presentan en cadenas. Existen aún otros que son ovalados y se parecen tanto a los cocos que se llaman Cocobacilos </li></ul><ul><li>Bacilos en letras chinas </li></ul><ul><li>Bacilos en palizada </li></ul><ul><li>Sin embargo, la mayoría de los bacilos se presentan de forma aislada. </li></ul>01/08/11
  • 25. Disposición de los bacilos 01/08/11
  • 26. Bacterias espirales <ul><li>Las bacterias espirales pueden tener una o más vueltas; nunca aparecen rectas. Los bacilos curvados en forma de coma se denominan vibrios . </li></ul><ul><li>Otros, llamados Espirilos, poseen una morfología helicoidal característica, que recuerda un sacacorchos, con un cuerpo celular bastante rígido . </li></ul><ul><li>Hay aún otro grupo de bacterias espirales llamadas Espiroquetas . </li></ul>01/08/11
  • 27. Bacterias en Espiral 01/08/11
  • 28. Hongos levaduriforme Levaduras 01/08/11
  • 29. Hongo filamentoso 01/08/11
  • 30. Hongo filamentoso
  • 31. Colonia <ul><li>Colonia agrupación de microorganismos de una misma especie. </li></ul><ul><li>Características macroscópica de las colonias: </li></ul><ul><li>Olor : del cultivo puede ser agradable o desagradable; fetal o frutal, amoniacal, nauseabundo … </li></ul><ul><li>Tamaño : Grande mediano, pequeño, pequeñísima. </li></ul><ul><li>Aspecto: Opaco, brilloso, transparente, rugoso, algodonoso, aterciopelado. </li></ul>01/08/11
  • 32. Estudio Macroscópico de las colonias <ul><li>Color : Amarillo, rojizo, blanco, cremas … </li></ul><ul><li>Forma : Redonda, alargada, irregular … </li></ul><ul><li>Bordes . Dentados festoneado filiforme, liso … </li></ul><ul><li>Altura : Plana, elevada, cóncava, convexa … </li></ul><ul><li>Tipo de cultivo : Puro, mixto y contaminado </li></ul><ul><li>Puro : Esta formado por un solo tipo de microorganismo (Para estudiar las propiedades de un organismo dado es necesario manejarlo en un cultivo puro) </li></ul><ul><li>Mixto : Es la presencia de dos o mas especies de microorganismo en el cultivo </li></ul>01/08/11
  • 33. Cultivo contaminado <ul><li>Contaminado : es cuando aparece un germen extraño fuera de la línea de siembra. </li></ul><ul><li>Cantidad de crecimiento del cultivo : Abundante, abundantisimo, escaso, y muy escaso </li></ul>01/08/11
  • 34. Esquema de colonias con su: forma,margen y elevación 01/08/11
  • 35. Colonias 01/08/11
  • 36. Consistencia de la Colonia: para determinar la consistencia debes usar una asa estéril, y tocarla cuidadosamente. <ul><li>Las colonias pueden ser: </li></ul><ul><li>duras, viscosas, mucosas, secas, muy secas, cremosas, etc. </li></ul><ul><li>En general, al mayor parte de las bacterias forman colonias de consistencia más o menos cremosa, aunque existen muchas excepciones </li></ul>01/08/11
  • 37. Cultivo mixto 01/08/11
  • 38. Medios de cultivo <ul><li>Los medios de cultivo son una mezcla equilibrada de nutrientes que en concentraciones adecuadas y con condiciones físicas óptimas permiten un buen crecimiento de los microorganismos. Contienen una base mineral; fuente de carbono, nitrógeno y azufre </li></ul><ul><li>Formula básica de los medios de cultivos : agua cloruro de sodio, peptona. Extractos de carne o de levadura. </li></ul><ul><li>El agar no se utiliza como nutriente solo para darle solidez a los medios de cultivos </li></ul><ul><li>Para el crecimiento de las bacterias hay que proporcionarles: los medios de cultivos apropiados la temperatura optima y la atmósfera requerida </li></ul>01/08/11
  • 39. Clasificación <ul><li>Medios de cultivos vivos o animado y medios de cultivos muertos o inanimado </li></ul><ul><li>De acuerdo a su consistencia o estado físico. </li></ul><ul><li>Liquido: ejemplo caldo simple </li></ul><ul><li>Semi-solidó: Agar semi sólido </li></ul><ul><li>Sólido: Agar base </li></ul><ul><li>El Liquido, Semi-solidó, Sólido depende de la cantidad del agar que contengan los medios </li></ul><ul><li>El agar no participa como nutriente (solo le proporciona solides a los medios de cultivos. </li></ul><ul><li>De acuerdo a su uso o finalidad: simple, enriquecidos, selectivos, diferenciales y especiales. </li></ul>01/08/11
  • 40. Medios de cultivos <ul><li>Medio enriquecido: medio al que se le añaden nutrientes extra y se utiliza para microorganismos que tienen exigencias nutricionales. </li></ul><ul><li>Agar sangre, Agar chocolate, agar cerebro-corazón, etc. </li></ul>01/08/11
  • 41. Medios de cultivos <ul><li>Medio selectivo: medio que sólo permite el crecimiento de un grupo de microorganismos e inhibe el de otros. Permite seleccionar y aislar microorganismos a partir de poblaciones mixtas </li></ul>01/08/11
  • 42. Medio diferencial <ul><li>Medio diferencial: medio que permite revelar características fisiológicas de los microorganismos. </li></ul><ul><li>Mac conkey: Cuando el microorganismo utiliza el azúcar lactosa se observan colonias rosadas. cuando las bacterias no utiliza la lactosa se observan colonias claras o transparentes. </li></ul><ul><li>EAM: en este medio la E coli se observa con brillo verde metálico. </li></ul>01/08/11
  • 43. Medios de cultivos <ul><li>Medio sintético: son los medios que contienen una composición química definida cuali y cuantitativamente. </li></ul><ul><li>Se utilizan para el estudio de requerimientos nutricionales y para obtener resultados reproducibles. </li></ul><ul><li>Medio simple: son los medios que presentan la mínima cantidad de nutrientes capaz de permitir el desarrollo de los microorganismos no exigentes, contienen la formula básica de los medios de cultivo. </li></ul>01/08/11
  • 44. Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante: <ul><li>Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante: se utiliza en el tubo de Durham. </li></ul><ul><li>Si las bacterias fermentan la lactosa aparece gas en el tubo invertido (gas +) </li></ul><ul><li>Esta reacción es producida por el grupo coliforme. O colibacilos. </li></ul><ul><li>Si no es fermentada la lactosa presenta </li></ul><ul><li>(gas -). </li></ul><ul><li>Este medio de cultivo es selectivo para bacterias gram. negativas. </li></ul><ul><li>El verde brillante y la bilis inhiben el crecimiento de bacterias Gram. positivas. </li></ul>01/08/11
  • 45. Agar sangre: contiene sangre de carnero desfibrinada al 5 % Es un medio enriquecido . 01/08/11
  • 46. Medio de Mac Conkey: <ul><li>Contiene el azúcar lactosa y un indicador que es el rojo neutro, este medio es selectivo para microorganismos Gram. negativos. </li></ul><ul><li>Si la lactosa es fermentada las colonias se observaran de color rosado </li></ul><ul><li>Si no las colonias se observaran transparentes. </li></ul>01/08/11
  • 47. Eosina Azul de metileno <ul><li>Es un medio selectivo y diferencial </li></ul><ul><li>Es selectivo para bacterias Gram. Negativas </li></ul><ul><li>La E. coli crece con brillo verde metálico </li></ul>01/08/11
  • 48. Manitol salado: <ul><li>Es un medio utilizado para los Estafilococos. </li></ul><ul><li>El indicador de PH es rojo fenol. </li></ul><ul><li>Si el microorganismo fermenta el manitol se tornará el medio amarillo. </li></ul><ul><li>Si no lo fermenta, se tornará color rojo cereza. </li></ul><ul><li>Es fermentado por el S. aureus. </li></ul>01/08/11
  • 49. Métodos de Siembra <ul><li>Sembrar una bacteria es el acto de colocarla en un medio de cultivo apropiado para promover su crecimiento y desarrollo </li></ul><ul><li>Para desarrollar una bacteria invitro hay que proporcionarle : </li></ul><ul><li>1-Nutrientes con los medios de cultivos que requieran. </li></ul><ul><li>2-La atmósfera apropiada </li></ul><ul><li>3- La temperatura optima, entre otros. </li></ul><ul><li>El resultado de la siembra es el cultivo </li></ul>01/08/11
  • 50. Métodos de Siembra <ul><li>Medio: Líquidos o caldos </li></ul><ul><li>Instrumento: Asa </li></ul><ul><li>Método: Dilución </li></ul><ul><li>Finalidad: poner la bacteria en suspensión </li></ul>01/08/11
  • 51. Métodos de Siembra <ul><li>Medio: Semisólido </li></ul><ul><li>Instrumento: Aguja </li></ul><ul><li>Método: Punción o </li></ul><ul><li>Picadura </li></ul><ul><li>Finalidad: observar la Movilidad. </li></ul><ul><li>Si crece en la línea de siembra es inmóvil. </li></ul><ul><li>Si crece fuera de la línea de siembra es móvil </li></ul>01/08/11
  • 52. Métodos de Siembra <ul><li>Medio: Sólido en tubo </li></ul><ul><li>Inclinado. </li></ul><ul><li>Instrumento: Asa o aguja </li></ul><ul><li>Método: Estría en superficie </li></ul>01/08/11
  • 53. Métodos de Siembra <ul><li>Medio de cultivo: TSI </li></ul><ul><li>Método: Punción y </li></ul><ul><li>estrías en superficie. </li></ul><ul><li>Instrumento : Aguja </li></ul><ul><li>Finalidad: </li></ul><ul><li>Observar los reacciones </li></ul><ul><li>(cambios) que ocurren en </li></ul><ul><li>la superficie y la </li></ul><ul><li>Profundidad. </li></ul>01/08/11
  • 54. Interpretación: Lectura de TSI <ul><li>Amarillo (A): ácido (fermentó el azúcar) </li></ul><ul><li>* Rojo (K): alcalino (no fermentó el azúcar) </li></ul><ul><li>* Negro: presencia de H2S (H2S+) </li></ul><ul><li>* Burbujas o vacíos, con levantamiento del medio : </li></ul><ul><li>presencia de H2 + CO2 </li></ul><ul><li>H2 + CO2+ </li></ul><ul><li>Precipitado negro = H2S </li></ul>01/08/11
  • 55. Métodos de Siembra <ul><li>Medio: Sólido en placa </li></ul><ul><li>de Petri </li></ul><ul><li>Método: Estrías por </li></ul><ul><li>Agotamiento. </li></ul><ul><li>Instrumento: Asa </li></ul><ul><li>Finalidad: Aislar </li></ul><ul><li>colonias </li></ul>01/08/11
  • 56. Métodos de Siembra <ul><li>Medio: Sólido en placa </li></ul><ul><li>de Petri </li></ul><ul><li>Método: Embadurnamiento </li></ul><ul><li>Instrumento: Hisopo </li></ul><ul><li>Finalidad: Obtener colonias confluentes. </li></ul>01/08/11
  • 57. Pasos previos a toda coloración <ul><li>Hacer un frotis dejar secar y fijar. </li></ul><ul><li>Frotis: Dispersar el material bacteriológico en un porta objetos </li></ul><ul><li>Secar: Dejar expuesto al aire </li></ul><ul><li>Fijar: pasar tres veces por el calor del la llama del mechero ( para evitar que se desprenda durante los lavados). </li></ul><ul><li>También se puede utilizar licor de Hoffman. </li></ul>01/08/11
  • 58. Frotis: Dispersar el material bacteriológico en un porta objetos 01/08/11
  • 59. Preparación de un frotis <ul><li>Sobre un portaobjetos de vidrio, limpio y seco, se coloca una gota del material bacteriológico que se va a teñir (si es líquido) y se extiende o dispersa sobre el porta objetos. </li></ul><ul><li>Si es de un medio de cultivo sólido, se coloca una gota de diluyente y el material bacteriológico se homogeniza y se dispersa en el porta objeto. </li></ul><ul><li>Si es directo de la muestra se hace rodar el hisopo con que se tomó la muestra en el porta objeto. </li></ul>01/08/11
  • 60. Preparación de un frotis <ul><li>El material se frota directamente sobre el portaobjetos, donde puede visualizarse con facilidad ( de los cultivos en los medios líquidos) </li></ul><ul><li>El material colocado en el portaobjetos se deja secar al aire. </li></ul><ul><li>Y se fija al calor del mechero. </li></ul>01/08/11
  • 61. Las coloraciones <ul><li>Los colorantes son sustancias capaces de ceder o transmitir su color a otras. </li></ul><ul><li>Los colorantes pueden ser según su estructura química : </li></ul><ul><li>1-Ácidos, básicos y neutros </li></ul><ul><li>Colorantes ácidos son los que la propiedad colorante radica en el ion con carga negativa, por lo que se llaman aniónicos </li></ul><ul><li>En los básicos ,por el contrario , el Ion coloreado es el positivo , siendo llamado cationico. </li></ul><ul><li>Los colorantes neutros son una sales complejas de un colorante ácido y un básico </li></ul>01/08/11
  • 62. Los colorantes <ul><li>De acuerdo con la estructura molecular, existen en cada colorante dos grupos químicamente activos: el grupo auxocromico, que le da a la molécula su habilidad para reaccionar con el sustrato correspondiente, y el grupo cromóforo </li></ul><ul><li>( ion coloreado) que es el lugar donde se verifica la absorción o no de las distintas longitudes de ondas luminosa en la producción del color. </li></ul><ul><li>El proceso de coloración de las bacterias es un intercambio iónico entre estas y el colorante </li></ul>01/08/11
  • 63. <ul><li>Las células bacteriana se pueden observar con el microscopio óptico. </li></ul><ul><li>La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste, es la utilización de colorantes. </li></ul><ul><li>Estos pueden emplearse para distinguir entre tipos diferentes de células o para revelar la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos esporas, cápsulas, paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc. </li></ul>01/08/11
  • 64. <ul><li>Las células generalmente son tratadas para coagular el protoplasma antes de teñirlas, proceso llamado fijación. </li></ul><ul><li>Para bacterias, la fijación por el calor es lo más corriente, aunque también puede fijarse con sustancias químicas como formaldehído, ácidos y alcoholes. </li></ul><ul><li>Después de la fijación, si se añade el colorante, no se producen ulteriores cambios estructurales en el protoplasma. </li></ul>01/08/11
  • 65. <ul><li>La fijación se realiza habitualmente en células que han sido fijadas sobre un portaobjetos, tratando después éste con el agente fijador, y siguiendo inmediatamente el proceso de tinción. </li></ul><ul><li>La fijación produce habitualmente el encogimiento de las células; la tinción, por el contrario, hace que las células aparezcan mas grande que como son realmente, de manera que las medidas de las células que han sido fijadas o teñidas no pueden realizarse con mucha precisión. </li></ul>01/08/11
  • 66. Los colorantes <ul><li>La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. </li></ul><ul><li>Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. </li></ul><ul><li>Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen la eosina, la fucsina ácida y el rojo Congo </li></ul>01/08/11
  • 67. Los colorantes <ul><li>Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. </li></ul><ul><li>Esta sustancia se denomina mordiente; un mordiente habitual es el ácido tánico, el lugol. </li></ul><ul><li>El mordiente se combina con un constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora sí podrá reaccionar con el colorante. </li></ul>01/08/11
  • 68. La tinción negativa <ul><li>Es el reverso del procedimiento de tinción usual: la cápsula se dejan sin teñir, pero se colorea en cambio el medio que las rodea. </li></ul><ul><li>Lo que se ve, por tanto, es el perfil de las células. La sustancia utilizada para la tinción negativa es un material opaco que no tiene afinidad por los constituyentes celulares y que simplemente rodea las células, tal como la tinta china (que es una suspensión de partículas de carbono coloidal) o la nigrosina (un colorante negro insoluble en agua). </li></ul><ul><li>La tinción negativa es un modo satisfactorio de aumentar el contraste de las células en la microscopia óptica, pero su máxima utilidad está en revelar la presencia de cápsulas alrededor de las células bacterianas. </li></ul>01/08/11
  • 69. Coloración de Gram Ideada en 1884 por Hans Christian Joachim Gram (1853-1938), un médico danés con estudios en bacteriología y farmacología. <ul><li>La coloración de Gram. tiene interés taxonómico ya que divide las bacterias en dos grandes grupos, bacterias Gram positivas que se tiñen de morado y bacterias gram negativas que se tiñen de rojo </li></ul><ul><li>La coloración de Gram es positiva compuesta y diferencial. </li></ul>01/08/11
  • 70. Coloración de Gram <ul><li>La técnica revela diferencias constitutivas de la pared celular entre bacterias Gram positivas y Gram negativas. </li></ul><ul><li>La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa capa de peptidoglicano, la cuál impide que escape el complejo cristal violeta-lugol. </li></ul><ul><li>Por el contrario, la capa de peptidoglicano de las Gram negativas es delgada y se encuentra unida a una membrana externa lipídica, susceptible a la decoloración con el alcohol-acetona, el que actúa como un solvente orgánico. </li></ul><ul><li>Los lípidos se disgregan con el alcohol acetona y el decolorante penetra a la célula bacteriana decolorándola. </li></ul>01/08/11
  • 71. Pared celular de las bacterias Gram positivas: <ul><li>El peptidoglicano se dispone en varias capas lo que le otorga grosor a la pared. </li></ul><ul><li>Atraviesan el peptidoglicano polisacáridos ácidos, denominados ácidos teicoicos . </li></ul><ul><li>Los ácidos teicoicos son de dos clases: poliglicerol fosfato y poliribitol fosfato. </li></ul><ul><li>Las funciones primarias de estos polímeros son la estabilización del peptidoglicano y la captura de Mg++. </li></ul>01/08/11
  • 72. Pared celular en bacterias Gram negativas <ul><li>Su pared celular es más delgada, pero más compleja que la de los Gram positivas. </li></ul><ul><li>El peptidoglicano se dispone en una sola capa, pero por fuera de ella se encuentra una segunda membrana denominada membrana externa . </li></ul><ul><li>La membrana externa es una membrana asimétrica, porque si bien la monocapa interna está formada por fosfolípidos, la monocapa exterior está formada por un tipo especial de lípido, denominado lipopolisacárido (LPS). </li></ul>01/08/11
  • 73. Pared celular en bacterias Gram negativas <ul><li>El LPS es una molécula que contiene tres regiones diferentes: el lípido A, el core y el antígeno O. </li></ul><ul><li>El LPS constituye una endotoxina, que se libera cuando la bacteria se divide o muere. </li></ul><ul><li>Es un potente estimulador de los macrófagos, lo que causa la activa liberación de citoquinas, responsables de las manifestaciones clínicas de las infecciones por bacterias Gram negativas y que varían desde una fiebre hasta el shock séptico. </li></ul><ul><li>En esta membrana externa se encuentran las porinas. </li></ul>01/08/11
  • 74. <ul><li>Entre la membrana externa y la membrana celular se crea un compartimiento virtual, llamado espacio periplásmico. </li></ul><ul><li>El espacio periplásmico es una matriz que incluye al peptidoglicano, enzimas, proteínas captadoras de nutrientes y sustancias de secreción. </li></ul><ul><li>La membrana externa contiene numerosas proteínas, siendo las porinas las más abundantes. </li></ul><ul><li>Se denominan así, porque forman poros que comunican el exterior con el espacio periplásmico. </li></ul>01/08/11
  • 75. Pared celular en bacterias Gram negativas 01/08/11
  • 76. Pared celular en bacterias Gram negativas <ul><li>La membrana externa de las bacterias Gram negativas poseen porinas que son canales cargados de agua y que permiten la entrada y salida de sustancias de la célula al exterior y del interior de la célula. </li></ul>01/08/11
  • 77. Coloración de Gram. <ul><li>Protocolo </li></ul><ul><li>Hacer un frotis </li></ul><ul><li>Dejar secar al aire </li></ul><ul><li>Fijar la muestra con calor a la llama de una lámpara de alcohol o con el licor de Hoffman. </li></ul>01/08/11
  • 78. Coloración de Gram. <ul><li>Cristal violeta </li></ul><ul><li>El lugol entra en las células y forma un complejo insoluble con el cristal violeta. </li></ul><ul><li>La mezcla de alcohol-acetona sirve para realizar la decoloración. Las bacterias Gram. positivas no se decoloran, mientras que los Gram. negativas sí lo hacen. </li></ul><ul><li>Para poner de manifiesto las bacterias Gram. negativas se utiliza una coloración de contraste de color rojo; safranina. </li></ul><ul><li>Después de la coloración de contraste las células Gram. negativas se observan de color rojo , mientras que las Gram. positivas se observan de color Morado. </li></ul>01/08/11
  • 79. Interpretación Gram negativas Gram positivas 01/08/11
  • 80. Tinción Bacteriológica de Gram. <ul><li>El equipo para realizar la tinción de Gram. consta de:          Colorantes y reactivos : </li></ul><ul><li>Cristal Violeta, Yodo-Lugol y Safranina.          Solvente: Alcohol-Cetona.          Bandeja de tinción.          Asa bacteriológica o hisopo.          Frasco lavador.          Muestra bacteriana sólida (agar), líquida (caldo) o espécimen clínico. </li></ul>01/08/11
  • 81. Coloración de Gram. Paso 1.- <ul><li>Paso 1.- Cubrir la preparación con Cristal Violeta por 60 seg. </li></ul><ul><li>y lavar suavemente con agua . </li></ul>01/08/11
  • 82. Coloración de Gram. <ul><li>Paso 2.- Cubrir la preparación con Yodo-Lugol por 60 seg y lavar suavemente con agua. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 83. Coloración de Gram. <ul><li>Paso 3.- Cubrir la preparación con Alcohol-Cetona durante algunos segundos (5-10) y lavar suavemente con agua. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 84. Coloración de Gram. <ul><li>Paso 4.- Cubrir la preparación con Safranina por 60 seg y lavar suavemente con agua. </li></ul><ul><li>Secar y Observar con lente de 100x (inmersión). </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 85. Coloración de Gram. preparándonos para la observación al microscopio 01/08/11
  • 86. Resultados de la coloración de Gram. Bacterias teñidas de morado: Gram positivas Teñidas de rojo: Gram negativas Podemos observarle la forma, la disposición y la propiedad tintorial. 01/08/11
  • 87. Coloración de Ziehl Neelsen <ul><li>La coloración de Ziehl Neelsen al igual que la de Gram es positiva, compuesta y diferencial. </li></ul><ul><li>Reactivos : fucsina básica fenicada - solución de alcohol-ácido (3% de HCl en etanol de 95°) - azul de metileno Esta tinción permite diferenciar a los microorganismos que son ácido alcohol resistentes, de color rojo , de los que no lo son, de color azul . Se utiliza en la identificación de mycobacterias. </li></ul>01/08/11
  • 88. Ziehl Neelsen <ul><li>La coloración ácido-resistente es otra coloración muy usada para el examen microscópico de las mycobacterias, y las nocardias. </li></ul><ul><li>Debido al crecimiento lento de la mayoría de las mycobacterias, los extendidos para identificar bacilos alcohol-ácido resistente juegan un papel importante en el diagnóstico temprano de la infección por mycobacterias. </li></ul><ul><li>El método clásico de coloración ácido-resistente es el descubierto por Ziehl y Neelsen en el año 1882 y ampliamente usado hasta la fecha para </li></ul><ul><li>el diagnóstico de Mycobacterium </li></ul><ul><li>Tuberculosis y Mycobacterium leprae. </li></ul>01/08/11
  • 89. <ul><li>Es una coloración específica para colorear bacterias cuyas paredes celulares contienen largas cadenas de ácidos grasos. </li></ul><ul><li>Por su alto contenido de acido micolico (cera no saponificable) tienen la capacidad de unir el colorante fucsina a su pared de manera que hacen a la célula resistente a la decoloración con alcohol ácido. </li></ul><ul><li>Son bacilos ácido-alcohol resistente (BAAR), las mycobacterias, y las nocardias. </li></ul>01/08/11
  • 90. Coloración de Ziehl Neelsen <ul><li>REALIZACIÓN </li></ul><ul><li>Preparar un frotis bacteriano. </li></ul><ul><li>Se deja secar al aire y se fija al calor. </li></ul><ul><li>Cubrir la preparación con carbofucsina. </li></ul><ul><li>Calentar la preparación con una lámpara de alcohol durante 5 min. No debe hervir. </li></ul><ul><li>Si se evapora, se añade más carbofucsina para que no se seque en ningún momento. </li></ul><ul><li>Lavar con agua el resto de colorante. </li></ul><ul><li>Decolorar con la mezcla alcohol-ácido por tres minutos </li></ul><ul><li>Lavar con agua . </li></ul><ul><li>Teñir con azul de metileno 1 min. </li></ul><ul><li>Lavar con agua el resto de colorante. </li></ul><ul><li>Secar la preparación. </li></ul><ul><li>Examinar al microscopio. </li></ul>01/08/11
  • 91. Resultados de la coloración de Z iehl Neelsen BAAR 01/08/11
  • 92. Resultados de la coloración de Z iehl Neelsen 01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 93. Coloración de Cápsula <ul><li>La tinta china o la nigrosina dan un fondo oscuro sobre el cual la cápsula de terminados microorganismos como el Cryptococcus neoformans se observará como un halo claro alrededor del microorganismo. </li></ul>01/08/11
  • 94. Coloración de Cápsula <ul><li>Método con tinta china (Método de Gin) </li></ul><ul><li>Técnica </li></ul><ul><li>Colocar unas gota de la sol. De dextrosa en un tubo. </li></ul><ul><li>Tomar una pequeña cantidad del material bacteriológico del cultivo y mezclar con las gotas de dextrosa. </li></ul><ul><li>Colocar una gota de tinta china en un porta objetos y añadir una gota de la mezclar anterior y con el extremo de un portaobjetos , hacer un frotis delgado y secar al aire, fijar con alcohol metílico por un minuto. </li></ul><ul><li>Teñir por 2 minutos con Cristal violeta. </li></ul><ul><li>Lavar con abundante agua, secar y observar al microscopio. </li></ul>01/08/11
  • 95. Coloración de Cápsula Resultado 01/08/11
  • 96. LAS EXIGENCIAS RESPIRATORIAS (Respiración – Fermentación ) <ul><li>El termino respiración se refiere a todas las reacciones que ocurren dentro de las células de liberación de energía (oxidaciones) </li></ul><ul><li>Es posible hacer una distinción entre las oxidaciones que utilizan oxigeno molecular y aquella que no lo hacen como sigue: </li></ul><ul><li>Respiración es la oxidación que utiliza oxigeno molecular como aceptor primario de hidrogeno AEROBIA y la oxidación que tiene lugar en ausencia de oxigeno molecular ANAEROBIA. </li></ul>01/08/11
  • 97. LAS EXIGENCIAS RESPIRATORIAS <ul><li>La respiración y la fermentación son los dos mecanismos de que dispone la célula viva para proveerse de energía; ambos llevan a cabo la oxidación del sustrato. </li></ul><ul><li>La condición de aerobio o anaerobio puede ser estricta. Es decir ser una necesidad especifica, en tal caso recibe el nombre de anaerobio obligatorioas o aerobios obligatorios, posiblemente este ultimo grupo posee enzimas esenciales, las cuales funcionan únicamente en el estado reducido y son particularmente sensibles a la inactivación del oxigeno . </li></ul>01/08/11
  • 98. LAS EXIGENCIAS RESPIRATORIAS <ul><li>Otras son facultativas y son capaces de vivir aeróbica o anaerobicamente. </li></ul><ul><li>Microaerofilicos : han sido llamados aquellos organismos que requieren oxigeno libre en menor concentración que la existente en la atmósfera. </li></ul><ul><li>Medio de cultivo para el estudio de la respiración bacteriana es el Caldo de Thioglicolato </li></ul>01/08/11
  • 99. Tipos de respiración bacteriana <ul><li>Aerobia: crece en la superficie del tubo Anaerobia: crece en la profundidad del tubo de caldo de thioglicolato de sodio </li></ul><ul><li>Microaerofilica:crece debajo de la zona oxigenada del tubo de caldo de thioglicolato de sodio </li></ul><ul><li>Facultativa: crece en todo el tubo de caldo de thioglicolato de sodio </li></ul>01/08/11
  • 100. La respiración bacteriana Medio de cultivo Caldo de thioglicolato de sodio y el indicador de oxigeno resazurina, azul metileno y otros 01/08/11
  • 101. ACCIÓN DE LAS BACTERIAS SOBRE LOS HIDRATOS DE CARBONO 01/08/11 Durante el proceso del metabolismo algunas bacterias son capaces de reducir a los carbohidratos a compuestos menos complejos que pueden penetrar en el interior de las células. Para que se den estas reacciones es preciso que los microorganismos sean capaces de elaborar enzimas .
  • 102. ACCIÓN DE LAS BACTERIAS SOBRE LOS HIDRATOS DE CARBONO <ul><li>La mayoría de las bacterias heterótrofas metabolizan la glucosa, pero la degradación sigue distintas direcciones, según la constitución enzimática de las diversas especies de bacterias. </li></ul>01/08/11
  • 103. ACCIÓN DE LAS BACTERIAS SOBRE LOS HIDRATOS DE CARBONO <ul><li>Para realizar esta práctica se requiere de medios de cultivo que contengan azucares </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 104. TSI <ul><li>contiene tres azúcares que son: glucosa, lactosa y sacarosa contiene también sulfato amínico ferroso, que reacciona con el acido sulfhídrico, con el cual se determina la formación de H 2 S (sulfuro de hidrogeno)un precipitado de color negro. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 105. <ul><li>Interpretación: </li></ul><ul><li>Se verifican varias reacciones, </li></ul><ul><li>Ninguna reacción, alcalino superficie/alcalino fondo (K/K). El medio se queda inerte, no cambia de color por tanto es un “No Fermentador” y se descarta Enterobacteriaceae. </li></ul><ul><li>Alcalino superficie/Acido fondo (K/A), significa solo fermentación de la glucosa, por tanto, es un “No fermentador de lactosa” (o sacarosa ). </li></ul><ul><li>Acido superficie/Acido fondo (A/A), significa que se trata de un fermentador de lactosa (o sacarosa en TSI). </li></ul><ul><li>Alcalino superficie/Acido fondo con precipitado negro, se reporta como H2S positivo. </li></ul><ul><li>Además de las características anteriores se pueden observar burbujas o rompimiento del medio debido a la producción de gas en el medio. </li></ul>01/08/11
  • 106. Interpretación: TSI 01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 107. MAC-CONKEY: <ul><li>Es un medio de cultivo selectivo y diferencial </li></ul><ul><li>Es un medio de cultivo selectivo para bacterias Gram. negativas </li></ul><ul><li>Este medio contiene el azúcar lactosa y un indicador de PH( rojo neutro), entre otros componentes. </li></ul><ul><li>Si la bacteria fermenta el azúcar </li></ul><ul><li>las colonias se tornan rosadas. </li></ul><ul><li>Si no la fermenta las colonias se observan transparentes. </li></ul>01/08/11
  • 108. Mac Conkey se observan Colonias Rosadas. Resultado: Lactosa Positivo <ul><li>* </li></ul>01/08/11
  • 109. Mac Conkey: Colonias Claras o Transparentes Resultado: Lactosa Negativo 01/08/11
  • 110. Interpretación: <ul><li>Se verifican dos reacciones </li></ul><ul><li>Colonias rosadas la bacteria fermento la lactosa </li></ul><ul><li>Colonias transparentes la bacteria no fermento la lactosa </li></ul>01/08/11
  • 111. CALDO LACTOSADO BILIS VERDE BRILLANTE (CLBVB ): <ul><li>Es un medio de cultivo selectivo para Gram. negativos. En tubos de Durham cuando hay gas en el tubito invertido nos indica que hay presencia de gas por tanto ha ocurrido la fermentación de la lactosa </li></ul><ul><li>Esta reacción es producida por los coliformes . </li></ul>01/08/11
  • 112. CALDO LACTOSADO BILIS VERDE BRILLANTE (CLBVB): <ul><li>Interpretación: </li></ul><ul><li>Si se observa un desplazamiento en el tubito invertido se reporta: </li></ul><ul><li>gas + </li></ul><ul><li>Si el tubito invertido permanece lleno del liquido se reporta: gas - </li></ul>01/08/11
  • 113. CALDO LACTOSADO BILIS VERDE BRILLANTE. GAS NEGATIVO GAS POSITIVO
  • 114. Prueba de la Coagulasa <ul><li>cepa de Staphylococcus </li></ul><ul><li>La coagulasa actúa como una enzima termoestable que permite diferenciar el Staphylococcus aureus del resto de los Estafilococos coagulasa negativos. </li></ul><ul><li>Se producen dos tipos de coagulasa, la unida a la pared celular y la liberada por la célula como coagulasa libre y es la detectada por la técnica en tubo. </li></ul><ul><li>La coagulasa actúa sobre la protrombina para producir trombina que actúa sobre el fibrinógeno para formar el coagulo. </li></ul>01/08/11
  • 115. Interpretación: <ul><li>Si se forma un coagulo la prueba es: positiva </li></ul><ul><li>Si no se forma el coagulo la prueba es: negativa. </li></ul><ul><li>Staphylococcus aureus forma un coagulo, es coagulasa + </li></ul><ul><li>Staphylococcus que no forman coagulo son: coagulasa – </li></ul>01/08/11
  • 116. Interpretación: <ul><li>Coagulasa + </li></ul><ul><li>Coagulasa - </li></ul>01/08/11
  • 117. Prueba de oxidasa <ul><li>Fundamento: </li></ul><ul><li>La Prueba de la Oxidasa hace una diferenciación inicial de las bacterias Gram. negativas. </li></ul><ul><li>Se basa en que determinadas bacterias poseen las enzimas citocromo oxidasa o indofenol oxidasa, que catalizan el transporte de electrones. </li></ul><ul><li>En esta prueba, un tinte incoloro, como el dihidrocloruro de p-fenilendiamina sirve como un aceptor artificial de electrones para la enzima oxidasa. </li></ul><ul><li>El tinte es oxidado y forma el compuesto coloreado, azul de indofenol. </li></ul>01/08/11
  • 118. Prueba de oxidasa 01/08/11
  • 119. La prueba de la Catalasa <ul><li>Esta prueba permite diferenciar los microorganismos aerobias y facultativas Catalasa POSITIVA de las anaeróbicas y de las Microaerofilicas las cuales son Catalasa negativa </li></ul><ul><li>La catalasa es una enzima respiratoria, es una porfirina de hierro cuya funcion es desdoblar los peroxidos en H 2 O y O 2 </li></ul><ul><li>Se utiliza en el laboratorio para diferenciar el Estafilococos de Estreptococos </li></ul>01/08/11
  • 120. Prueba de la Catalasa+ 01/08/11
  • 121. ACCIÓN DE LAS BACTERIAS SOBRE LAS PROTEINAS Proteólisis <ul><li>La proteólisis es la degradación de las proteínas. </li></ul><ul><li>El resultado final de la acción proteolítica es la producción de aminoácidos. </li></ul>01/08/11 Durante su metabolismo las bacterias que poseen enzimas proteolíticas son capaces de desdoblar las proteínas que son moléculas demasiado grandes para poder penetrar en las células bacterianas razón por la cual tienen que ser desarticuladas en compuestos más sencillos para que las células puedan utilizarla como elemento nutritivo.
  • 122. INDOL <ul><li>El Indol es uno de los productos de degradación metabólica del aminoácido triptofano. </li></ul><ul><li>Las bacterias que poseen la triptofanasa son capaces de hidrolizar el triptofano con producción de indol. </li></ul><ul><li>La producción de indol es una característica importante para la identificación de muchas especies de microorganismos. </li></ul><ul><li>La prueba de indol está basada en la formación de un anillo rojo cuando el indol reacciona con el grupo aldehído del p-dimetilaminobenzaldehído. </li></ul><ul><li>(reactivo de Kovacs ) </li></ul><ul><li>Este es el principio activo de los reactivos de Kovacs y Ehrlich. El medio de cultivo utilizado debe ser rico en triptofano. </li></ul>01/08/11 Anillo rojo + Anillo amarillo -
  • 123. UREA <ul><li>Es una prueba que se realiza para determinar si la bacteria posee la enzima ureasa (esta enzima descompone la urea en amoniaco). </li></ul><ul><li>El medio de cultivo es un caldo rico en urea el cual posee un indicador de PH el cual se torna (fucsia) en medios alcalinos. </li></ul><ul><li>Resultados: el desarrollo de un color fucsia indica que la prueba es positiva. </li></ul><ul><li>Si no hay el desarrollo de un color fucsia indica que la prueba es negativa </li></ul>01/08/11
  • 124. Gelatina <ul><li>Es una prueba que se realiza para determinar si la bacteria es capaz de licuar la gelatina por la presencia de la enzima Gelatinasa. </li></ul><ul><li>El medio de cultivo es gelatina. </li></ul><ul><li>El fundamento de la prueba es la licuación irreversible de la gelatina </li></ul><ul><li>Esta prueba hay que llevarla a la nevera por una o dos horas después de sacarla de la incubadora. </li></ul><ul><li>Resultados: </li></ul><ul><li>NEGATIVA </li></ul><ul><li>Al sacar la prueba de gelatina de la nevera está gelificada </li></ul><ul><li>POSITIVA </li></ul><ul><li>Al sacar la prueba de gelatina de la nevera está </li></ul><ul><li>liquida (licuación irreversible) </li></ul>01/08/11
  • 125. ACCIÓN DE LAS BACTERIAS SOBRE LAS PROTEINAS 01/08/11 prueba Sustrato Enzima Producto final Interpretación urea Caldo de Urea ureasa Amoniaco Fucsia+ Limoncillo- indol Caldo triptonado o peptonado Triptofanasa Indol Añadir Kovacs Anillo rojo+ Anillo amarillo- Gelatina Gelatina gelatinasa Licuación Irreversible Refrigerar Liquida + Gelifica - Lisina Lisina Iron Agar (LIA) Descarboxilasa Desaminasa Cadaverina Ácido alfa ceto carbónico Fondo morado+ Fondo amarillo- Superficie rojo con fondo amarillo+ Sin cambio- Precipitado negro H2S
  • 126. HEMOLISIS <ul><li>Es la destrucción de los glóbulos rojos. Muchos organismos producen sustancias que disuelven los glóbulos rojos, estas sustancias se denominan Hemolisinas. </li></ul><ul><li>La Hemólisis se puede observar en medio de cultivo de agar sangre. </li></ul><ul><li>Cuando las bacterias producen hemolisinas solubles que dan por resultado la aparición de una zona clara transparente alrededor del crecimiento de la colonia, se ha producido una Hemólisis tipo Beta . </li></ul>01/08/11
  • 127. HEMOLISIS <ul><li>Otros microorganismos producen otro tipo de hemolisinas que originan cambios en la hemoglobina de los glóbulos rojos (transformación a meta hemoglobina) la cual se hace visible por una coloración verde alrededor de las colonias. Entonces se dicen que han producido una Hemólisis tipo Alfa. </li></ul><ul><li>Cuando no se produce ningún cambio se le denomina Hemólisis tipo Gamma. </li></ul>01/08/11
  • 128. HEMOLISIS: Alfa, Beta y Gamma <ul><li> </li></ul><ul><li>No Hemolitica Beta Alfa </li></ul>01/08/11
  • 129. Pigmentos <ul><li>LOS PIGMENTOS </li></ul><ul><li>Son sustancias coloreadas metabolizadas por microbios. </li></ul><ul><li>Uno de los caracteres más llamativos de los cultivos es la pigmentación o cromo génesis. </li></ul><ul><li>Se denomina endopigmento cuando el pigmento no se segrega al exterior sino que queda en el interior de la célula bacteriana </li></ul><ul><li>Se denomina exopigmento (Pseudomonas) cuando el pigmento se segrega además de las colonias al medio exterior. </li></ul>01/08/11
  • 130. Exopigmento <ul><li>Exopigmento (Pseudomonas) cuando el pigmento se segrega además de las colonias al medio exterior. </li></ul><ul><li>Es de color verde </li></ul>01/08/11
  • 131. Endopigmento <ul><li>Se denomina endopigmento cuando el pigmento no se segrega al exterior si no que queda en el interior de la célula bacteriana </li></ul><ul><li>Staphylococcus aureus </li></ul><ul><li>Endo pigmento de color amarillo dorado </li></ul>01/08/11
  • 132. Endopigmento 01/08/11
  • 133. PRUEBA DE SENSIBILIDAD A LOS QUIMIOTERAPEUTICOS . Antibiograma <ul><li>La determinación de la sensibilidad antimicrobiana a los aislamientos bacterianos que tienen significado clínico es una de las principales funciones del laboratorio de microbiología. </li></ul><ul><li>El objetivo principal de las pruebas de sensibilidad es predecir el éxito del tratamiento con los antimicrobianos ensayados. </li></ul><ul><li>Esto significa que un resultado “sensible” implica una alta probabilidad de que el paciente va a responder al tratamiento con ese determinado antimicrobiano. Y un resultado dado como “resistente” es casi seguro que falle con ese tratamiento. </li></ul><ul><li>La prueba de sensibilidad mas usada es el método Estandarizado de Disco-Difusión (Kirby-Bauer) </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 134. Antibiograma <ul><li>Método de la prueba: Difusión –Kirby Bauer </li></ul><ul><li>Método de la siembra : Embadurnamiento </li></ul><ul><li>Medio de cultivo: MH </li></ul><ul><li>Instrumento de siembra : Hisopo </li></ul><ul><li>Resultados: Sensible, resistente e intermedio </li></ul><ul><li>Sensible: si al rededor del disco de sensibilidad el microorganismo no crece y se forma un halo claro de inhibición. </li></ul><ul><li>Resistente: si al rededor del disco de sensibilidad el microorganismo crece y NO se forma un halo claro de inhibición. </li></ul><ul><li>Intermedio :si alrededor del disco de sensibilidad se forma un pequeño halo o si el halo es grande pero aparecen colonias de bacterias mutantes </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 135. Antibiograma 01/08/11 Resistente Sensible
  • 136. Antibiograma <ul><li>SENSIBLE: Si alrededor del disco se forma un halo de inhibición que corresponda a los puntos de corte establecidos (CLSI) para cada combinación de microorganismo/antimicrobiano </li></ul><ul><li>Esta categoría implica que una infección dada por la cepa en estudio puede ser tratada apropiadamente con dosis de antibiótico recomendada para el tipo de infección y la especie infectante a menos que hubieran contraindicaciones. </li></ul>01/08/11
  • 137. Antibiograma <ul><li>RESISTENTE: No se forma un halo claro alrededor del disco de sensibilidad. </li></ul><ul><li>La bacteria crece alrededor del disco. </li></ul>01/08/11
  • 138. Producción de ß-lactamasas.
  • 139. Las enzimas son codificadas por: <ul><li>Genes de los cromosomas. </li></ul><ul><li>Plásmidos extracromosomales. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 140. Su producción puede ser : <ul><li>Constitutiva (cuando se hace de manera constante). </li></ul><ul><li>Inducible, es decir, luego de la exposición de la bacteria al antibiótico. </li></ul>01/08/11
  • 141. Las ß-lactamasas rompen el anillo lactámico de penicilinas. 01/08/11
  • 142. 01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 143. Sustancias más estables frente a la acción de las ß-lactamasas . <ul><li>Las cefalosporinas de espectro extendido (ceftazidima, cefotaxima y ceftriaxona). </li></ul><ul><li>Los antibióticos monobactámicos como aztreonam. </li></ul>01/08/11
  • 144. Estadísticas <ul><li>En 1994, fue reportado que 1.3% a 8.6% de los aislados clínicos de E. coli y Klebsiella pneumoniae eran resistentes parcial o totalmente a ceftazidima y hasta en 50% de los casos, tal propiedad estaba relacionada con la síntesis de ß-lactamasas de espectro extendido. </li></ul>01/08/11
  • 145. RESISTENCIA A ANTIBIÓTICOS ß-LACTÁMICOS.
  • 146. Compuestos B- Lactamicos. <ul><li>Penicilinas. </li></ul><ul><li>Cefalosporinas. </li></ul><ul><li>Monobactámicos. </li></ul><ul><li>Carbapenems. </li></ul>01/08/11
  • 147. Principales mecanismos de resistencia a los ß-lactámicos <ul><li>Cambios en las proteínas fijadoras de penicilina. </li></ul><ul><li>Alteraciones en las porinas de la membrana externa. </li></ul><ul><li>Producción de ß-lactamasa que inactivan al antimicrobiano. </li></ul>01/08/11
  • 148. Modificación de las proteínas fijadoras de penicilina. <ul><li>Mutación de los genes que codifican para estos péptido. </li></ul><ul><li>Adquisición de genes extraños que codifican para nuevas proteínas fijadoras de penicilina. </li></ul>01/08/11
  • 149. Composición de la envoltura de las bacterias Gram. positivas (A) y Gram. negativas (B). 01/08/11
  • 150. Impermeabilidad de la pared. 01/08/11
  • 151. Bacterias que modifican las porinas de su cápsula externa . <ul><li>E. coli. </li></ul><ul><li>Pseudomonas aeruginosa . </li></ul><ul><li>Serratia marcescens. </li></ul>01/08/11
  • 152. IMPORTANCIA CLÍNICA DE LA RESISTENCIA BACTERIANA .
  • 153. MEDIDAS PARA MODIFICAR LA VELOCIDAD CON QUE SE DESARROLLA LA RESISTENCIA. <ul><li>El uso racional de estos medicamentos. </li></ul><ul><li>La educación de los pacientes. </li></ul><ul><li>La selección adecuada del régimen antibiótico. </li></ul>01/08/11
  • 154. BACTERIAS QUE SON RESISTENTES POR LA ACTIVIDAD DE ß-LACTAMASAS DEL GRUPO 2. <ul><li>Escherichia coli. </li></ul><ul><li>Klebsiella spp. </li></ul><ul><li>Proteus spp. </li></ul>01/08/11
  • 155. <ul><li>El enterococo es un microorganismo patógeno que actualmente presenta insensibilidad intrínseca a varios antibacterianos comunes y a ciertos compuestos como vancomicina y otros antibióticos glicopéptidos de reciente desarrollo. </li></ul>01/08/11
  • 156. <ul><li>De acuerdo con los reportes más recientes, emitidos por los Centros para el Control de Enfermedades de Atlanta, en Estados Unidos la prevalecía de cepas nosocomiales de neumococo resistente a vancomicina es de 10% a 12% y dicha cifra va en aumento. </li></ul>01/08/11
  • 157. <ul><li>La resistencia a vancomicina es, en estos momentos, un motivo de creciente preocupación para la comunidad médica, ya que tal antibiótico era considerado como la última herramienta para combatir las infecciones causadas por gérmenes multirresistentes, en particular estafilococo coagulasa negativo y S. aureus resistente a meticilina. </li></ul>01/08/11
  • 158. ACCIÓN DE LOS AGENTES QUÍMICOS: ANTISÉPTICOS Y DESINFECTANTES SOBRE LOS MICROORGANISMOS <ul><li>Determinar la acción de los agentes químicos: antisépticos y desinfectantes sobre los microorganismos e interpretar los resultados tiene importancia para el área de salud </li></ul>01/08/11
  • 159. <ul><li>El antiséptico o el desinfectante en el disco difunde a través del agar. </li></ul><ul><li>En la medida que aumenta la distancia al disco, disminuye logarítmicamente la concentración del antiséptico o el desinfectante, produciéndose en el agar un gradiente de concentración del antiséptico o el desinfectante alrededor de cada disco. </li></ul><ul><li>Continua----- </li></ul>01/08/11
  • 160. <ul><li>Concomitantemente con la difusión del antiséptico o el desinfectante, la bacteria que fue inoculada en la superficie y que no es inhibida por el antiséptico o el desinfectante continúa su multiplicación hasta tener un crecimiento visible. </li></ul><ul><li>En las áreas donde el antiséptico o el desinfectante inhibió la bacteria, se produce una zona de inhibición del crecimiento alrededor de cada disco. </li></ul>01/08/11
  • 161. Antiséptico / Desinfectante 01/08/11
  • 162. Resultados <ul><li>Eficaz : Si el microorganismo no crece alrededor del disco impregnado de antiséptico o desinfectante </li></ul><ul><li>Ligero Eficaz : Si el microorganismo crece ligeramente alrededor del disco impregnado de antiséptico o desinfectante </li></ul><ul><li>No Eficaz : Si el microorganismo crece alrededor del disco impregnado de antiséptico o desinfectante </li></ul>01/08/11
  • 163. <ul><li>ESTUDIO BACTERIOLOGICO DEL AGUA Y OTROS LIQUIDOS DE CONSUMO </li></ul>01/08/11
  • 164. Estudio bacteriológico del agua y otros líquidos de consumo <ul><li>Para determinar la presencia de coliformes y contaminación fecal se realizan dos pruebas: </li></ul><ul><li>La prueba preliminar _estadística y la prueba confirmatoria. </li></ul>01/08/11
  • 165. Prueba Preliminar <ul><li>Para hacer la prueba preliminar se utilizan 5 tubos de caldo lactosado Bilis Verde Brillante a los cuales se les añade 5 ml. De la muestra en estudio. </li></ul><ul><li>Se lleva a la incubadora. </li></ul><ul><li>a las 24 horas se lee cuantos tubos hay positivos y cuantos tubos negativos, utilizando una tabla ESTÁNDAR. </li></ul><ul><li>Se obtiene el numero mas probable de coliformes presentes en la muestra. </li></ul>01/08/11
  • 166. Tabla para obtener el No. Mas probable de coliformes en el liquido estudiado <ul><li>Tubos de C.L.B.V.B. </li></ul>01/08/11 NEGATIVOS POSITIVOS No. Mas probable de coliformes en el liquido estudiado 5 0 0 4 1 200 3 2 510 2 3 920 1 4 1,610 0 5 Mas 1610
  • 167. IMViC <ul><li>El IMVIC esta conformado por 4 pruebas: </li></ul><ul><li>Indol, Rojo de metilo, Vogues-proskawer y Citrato. </li></ul>01/08/11
  • 168. IMViC <ul><li>Resultados: </li></ul><ul><li>++-- E. coli </li></ul>01/08/11
  • 169. IMViC <ul><li>Resultados: </li></ul><ul><li>- - + + </li></ul><ul><li>Klebsiella </li></ul><ul><li>o Enterobacter </li></ul>01/08/11
  • 170. La prueba del IMViC puede ser sustituida por una prueba de movilidad en semisolido y una prueba de indol <ul><li>La E. coli: indol positivo </li></ul><ul><li>Es una bacteria móvil </li></ul><ul><li>Brillo metálico en EAM </li></ul><ul><li>Klebsiella es inmóvil </li></ul><ul><li>Indol negativo </li></ul><ul><li>o Enterobacter </li></ul><ul><li>Indol negativo </li></ul><ul><li>Es móvil </li></ul>01/08/11
  • 171. <ul><li>sembrando en Eosina azul de metileno(EAM). </li></ul><ul><li>La E. coli crece con brillo verde metálico. </li></ul><ul><li>La E. coli es la bacteria que se toma como índice de contaminación fecal </li></ul>01/08/11
  • 172. Eosina Azul de Metileno EAM con brillo 01/08/11
  • 173. PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN EN EL LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA <ul><li>Cándida albicans </li></ul><ul><li>Tubo germinativo positivo </li></ul>01/08/11
  • 174. Test de Camp <ul><li>Para diferenciar a los estreptococos grupo B </li></ul>01/08/11
  • 175. Sensibilidad a la optoquina / Streptococcus pneumoniae (en agar sangre 01/08/11
  • 176. <ul><li>Bacilos gram. Negativos Fermentadores de Glucosa </li></ul><ul><li>Haemophilus influenzae </li></ul><ul><li>Coloración de Gram. </li></ul><ul><li>Forma: Coco Bacilos </li></ul><ul><li>Propiedad tintorial. Gram. Negativo </li></ul>01/08/11
  • 177. 01/08/11
  • 178. 01/08/11
  • 179. PRUEBAS DE IDENTIFICACIÓN EN EL LABORATORIO DE BACTERIOLOGÍA <ul><li>Diplococos gram. Negativos </li></ul><ul><li>Neisseria gonorroheae </li></ul><ul><li>Coloración de Gram. </li></ul><ul><li>Forma. Cocos </li></ul><ul><li>Disposición : diplococos arriñonados intracelulares </li></ul><ul><li>Propiedad tintorial . Gram. negativo </li></ul><ul><li>( Cocos teñidos de rojo de rojo) </li></ul>01/08/11
  • 180. Prueba de oxidasa <ul><li>Prueba de oxidasa + en la N. gonorroheae </li></ul><ul><li>igual que N. meningitidis </li></ul>01/08/11
  • 181. Control de Microorganismos <ul><li>1.- De qué métodos se vale el hombre para el control de los microorganismos? </li></ul><ul><li>De agentes físicos, químicos y quimioterapeuticos. </li></ul><ul><li>2.- Define los siguientes términos: </li></ul><ul><li>Esterilización: Es el proceso de destruir todas las formas de vida microbiana. </li></ul><ul><li>Estéril: Libre de vida de cualquier clase. </li></ul><ul><li>Desinfectante: Es un agente que tiene la propiedad de matar las formas de desarrollo, pero no necesariamente las esporas resistentes de microorganismos patógenos. </li></ul><ul><li>Se aplica en superficies inanimadas (pisos, mesas, paredes). </li></ul>01/08/11
  • 182. <ul><li>Desinfección : Es la operación de destruir agentes infecciosos. </li></ul><ul><li>Antiséptico: Sustancia que impide el desarrollo de microorganismos por destrucción o inhibición de su crecimiento o actividad. Contrario al desinfectante se aplica sobre el cuerpo. </li></ul><ul><li>Séptico: Caracterizado por la presencia de microorganismos perjudiciales en el tejido vivo. </li></ul><ul><li>Bactericida: Agente que mata a las bacterias (Acción irreversible). </li></ul><ul><li>Bacteriostático: Agente que inhibe la multiplicación bacteriana (Acción reversible). </li></ul><ul><li>Germicida: Agente que mata microbios. </li></ul><ul><li>Desgerminación: Procedimiento encaminado a disminuir el numero de gérmenes en un área, tal es el caso de aseos de pisos y descontaminación de paredes y techos. </li></ul>01/08/11
  • 183. Agentes antimicrobianos <ul><li>Agentes antimicrobianos: son los que interfieren en el crecimiento y la actividad de los microbios y se denominan terapéutico (se utilizan en el tratamiento de las infecciones). </li></ul><ul><li>3.- Cuáles son los factores que influyen sobre la esterilización y la desinfección? La hidratación, el tiempo, la temperatura, concentración, materia orgánica extraña, pH. </li></ul><ul><li>4.- Cuál es el modo de acción de los agentes antimicrobianos? </li></ul><ul><li>Daños a la pared celular. </li></ul><ul><li>Alteración de la permeabilidad celular. </li></ul><ul><li>Alteración o coagulación de las moléculas de proteínas y de los ácidos nucleicos. </li></ul><ul><li>Inhibición de la acción enzimática. </li></ul><ul><li>Mecanismos genéticos. </li></ul>01/08/11
  • 184. <ul><li>5.- Control por agentes físicos. </li></ul><ul><li>Cuáles son los agentes físicos más usados? </li></ul><ul><li>La temperatura. </li></ul><ul><li>Radiaciones. </li></ul><ul><li>Filtración. </li></ul><ul><li>Gases. </li></ul><ul><li>Presión osmótica. </li></ul><ul><li>6.- Por qué mata el calor seco a las bacterias? Porque les coagula las proteínas y las deshidrata. </li></ul><ul><li>Por qué mata el calor húmedo a las bacterias? </li></ul><ul><li>Por hidrólisis y coagulación de las proteínas </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 185. <ul><li>7.- Mencione los medios mas usados para matar bacterias por calor húmedo: el autoclave, la ebullición, la tindalización, Pasteurización. </li></ul><ul><li>8.- Entre los agentes químicos capaces de matar bacterias, cuáles son los más usados? Alcoholes, fenol y compuestos fenolicos, metales pesados y sus compuestos, agentes oxidantes, colorantes, detergentes, gases. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 186. <ul><li>10.- Cuál es el mecanismo de acción de los antibióticos? </li></ul><ul><li>Inhibición de la formación de la pared celular. Ej.: Penicilina, cesfalosporina, vancomicina. </li></ul><ul><li>Efecto sobre la membrana celular. Ej.:Polimicina, nistatina, anfotericina, etc. </li></ul><ul><li>Inhibición de la síntesis proteica. Ej.: tetraciclina, cloranfenicol, gentamicina, neomicina. </li></ul><ul><li>Acción sobre los ácidos nucleicos. Ej.: griceofulcina, antinomicina. </li></ul><ul><li>inhibición de metabolitos esenciales, los sulfas que compiten con el paba. </li></ul>01/08/11
  • 187. <ul><li>1.- En qué consiste cultivar una bacteria? Es el procedimiento por el cual promovemos el crecimiento de los microorganismos in vitro y el medio por el cual estudiamos su fisiología. </li></ul><ul><li>2.- Cuál es la formula básica de los medios de cultivo? </li></ul><ul><li>Agua </li></ul><ul><li>Na Cl </li></ul><ul><li>Peptona </li></ul><ul><li>Extracto(levadura o carne) </li></ul><ul><li>3.- Cómo se clasifican los cultivos según su estado físico? </li></ul><ul><li>Líquidos </li></ul><ul><li>Semi-solidó </li></ul><ul><li>solidó </li></ul>01/08/11
  • 188. <ul><li>4.- Cómo se clasifican los cultivos según su uso y finalidad? </li></ul><ul><li>Enriquecidos </li></ul><ul><li>Diferenciales </li></ul><ul><li>Selectivos </li></ul><ul><li>Especiales </li></ul><ul><li>Simples </li></ul><ul><li>5.-Define: </li></ul><ul><li>Medio de cultivo simple: crecen en ellos microorganismos no exigentes. </li></ul><ul><li>Medio de cultivo enriquecido: contienen nutrientes extra como el agar sangre y agar chocolate </li></ul><ul><li>Medio de cultivo selectivo: medios en los que se favorece el desarrollo de determinado microorganismo, al contener sustancias inhibidoras para los demás gérmenes. MC, EAM etc </li></ul><ul><li>Medio de cultivo diferencial: medios generalmente sólidos, que le imparten algunas características especiales a las colonias de determinado microorganismo, por medio de cual podemos fácilmente identificarlo. MC y EAM </li></ul>01/08/11
  • 189. <ul><li>6.- Cómo se le llama a la sustancia que proporciona solidez a los medios de cultivo? agar </li></ul><ul><li>7.- Qué son los pigmentos bacterianos y como se clasifican? son sustancias coloreadas elaboradas por las bacterias </li></ul><ul><li>Exopigmento </li></ul><ul><li>Endopigmento. </li></ul>01/08/11
  • 190. Bioseguridad <ul><li>La Bioseguridad no solo esta limitada a un mero listado de normas de trabajo sino que requiere de participación. </li></ul><ul><li>Es el conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la salud de los trabajadores, los usuarios del servicio y la preservación del medio ambiente frente a riesgos de agentes biológicos, físicos o químicos. </li></ul><ul><li>agentes físicos, químicos y biológicos en sus áreas de trabajo, a los usuarios del servicio y preservar el ambiente. </li></ul><ul><li>La Bioseguridad se concibe hoy como: </li></ul><ul><li>Un derecho de la población (que exige la protección de las personas y del ambiente) </li></ul><ul><li>Derecho de los pacientes </li></ul><ul><li>Derecho de quienes trabajan en ellos. Se relaciona así con la higiene hospitalaria y el control de las infecciones nosocomiales y con la higiene y la seguridad en el trabajo </li></ul>01/08/11
  • 191. Objetivos de las normas de Bioseguridad <ul><li>Reducir el riesgo de accidentes en el personal que labora en los laboratorios de microbiología provocado por las acciones que estos realizan. </li></ul><ul><li>Reducir la contaminación ambiental producto de los desechos emanados de los laboratorios </li></ul><ul><li>Asegurar la integridad de las muestras bacteriológicas contra la degradación o contaminación de las mismas que pueda poner en peligro la validez de los resultados. </li></ul><ul><li>Proteger la salud del personal que labora en laboratorios frente a riesgos asociados con </li></ul>01/08/11
  • 192. Bioseguridad <ul><li>Normas generales de bioseguridad </li></ul><ul><ul><ul><li>Colocar la señal de Riesgo Biológico. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Utilizará bata de trabajo. Evitar su uso fuera de los ambientes del laboratorio. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Utilizar guantes, mascarillas, lentes y/o cubreboca para todos los trabajos, que obliguen el contacto de material infeccioso del nivel 4 </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Evitar entrada del personal ajeno al laboratorio durante la jornada de trabajo </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Durante el trabajo deberá mantenerse las puertas cerradas </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>No comer, beber, fumar, aplicarse cosméticos dentro del ambiente de laboratorio </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Lavarse las manos antes y después de manipular el material biológico con jabón líquido. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Usar toallas desechables para el secado de las manos. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>No utilizar las neveras para almacenar alimentos. </li></ul></ul></ul>01/08/11
  • 193. Bioseguridad <ul><ul><ul><li>No conservar alimentos en el área de trabajo del No manipular material infeccioso en el área de papelería. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>No reencapuchar las agujas, pues es una fuente importante de accidentes corto punzantes. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>En caso de ruptura de material de vidrio, no recoger vidrios rotos con los dedos. </li></ul></ul></ul>01/08/11
  • 194. Bioseguridad <ul><ul><ul><li>Descartar agujas u otros materiales punzocortante en recipientes de paredes gruesas, NUNCA EN LA BASURA COMÚN </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Descontaminación de los desechos contaminados antes de su eliminación según tipo </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Disponer de manual de procedimientos para toma de muestras variadas </li></ul></ul></ul>01/08/11
  • 195. Bioseguridad <ul><ul><ul><li>Todo el personal del laboratorio deberá ser sometido a un examen médico completo, que debe comprender una historia clínica detallada al momento de su incorporación a la institución, este debe ser repetido una vez al año </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Todo el personal del laboratorio recibirá inmunización protectora según área específica en que labore, bajo supervisión médica y según criterio epidemiológico </li></ul></ul></ul>01/08/11
  • 196. Bioseguridad <ul><ul><ul><li>Las personas que usan pelo por debajo de los hombros deben protegerse con gorro o mantener amarrado el cabello hacia atrás. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>No usar durante la jornada de trabajo brazaletes o collares largos. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Usar zapatos que cubran completamente los pies </li></ul></ul></ul>01/08/11
  • 197. Bioseguridad <ul><li>Normas de Bioseguridad para evitar riesgos físicos </li></ul><ul><ul><ul><li>Tener totalmente libres las zonas de circulación. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Mantener orden en el laboratorio. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Tener estantes seguros. </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Evitar sobrecarga en las conexiones eléctricas </li></ul></ul></ul><ul><ul><ul><li>Utilice, siempre que sea posible, ayudas mecánicas para manipular cargas pesadas. </li></ul></ul></ul>01/08/11
  • 198. Señal de Riesgo Biológico. 01/08/11
  • 199. Debes recordar: <ul><li>1-Cuales son las formas fundamentales de las bacterias? cocos, bacilos y helicoidal </li></ul><ul><li>2-Cuales son las formas fundamentales de los hongos? </li></ul><ul><li>Levaduriforme y filamentosa </li></ul>01/08/11
  • 200. Hongos filamentosos 01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 201. Levaduras 01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 202. <ul><li>5.- Esquematice una célula bacteriana y póngale sus nombres a las diferentes partes. </li></ul><ul><li>Diagrama de un Corte Axial de una Bacteria </li></ul><ul><li>Fimbrias   </li></ul><ul><li>Membrana Citoplasmática </li></ul><ul><li>Sustancias Nuclear </li></ul><ul><li>Gránulos </li></ul><ul><li>Flagelos </li></ul><ul><li>Cápsulas </li></ul><ul><li>Pared celular </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 203. Célula bacteriana 01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 204. <ul><li>6.- Mencione las partes fundamentales de las bacterias. </li></ul><ul><li>Partes fundamentales: </li></ul><ul><li>Membrana citoplásmica. </li></ul><ul><li>Pared celular </li></ul><ul><li>Citoplasma material nuclear. </li></ul><ul><li>Mesosoma. </li></ul><ul><li>Ribosomas. </li></ul><ul><li>Partes especiales. </li></ul><ul><li>Fimbrias </li></ul><ul><li>Flagelos </li></ul><ul><li>Espora </li></ul><ul><li>Cápsula </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 205. <ul><li>7.- Esquematice y póngale sus nombres a los diferentes tipos de flagelos. </li></ul><ul><li>Los flagelos son apéndices muy delgados que sobresalen a través de la pared celular y se originan en el citoplasma. </li></ul><ul><li>8.- De qué sustancia están químicamente compuestos los flagelos de la bacterias? Por una proteína llamada flagelina. </li></ul><ul><li>9.- Los flagelos les proporcionan a las bacterias: movilidad. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 206. Flagelos 01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 207. Bacteria con flagelos 01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 208. Fimbrias o Pilis: <ul><li>Fimbrias o Pilis: Son apédices filamentosos que no son flagelos. </li></ul><ul><li>Son más pequeños y no tienen función en la movilidad. Hay varios tipos como la F que funciona en la cópula sexual de transmisión de material genético que se llama conjugación. </li></ul><ul><li>Las fimbrias facilitan la adherencia a las células epiteliales, como ocurre en pacientes con fibrosis quística, en los cuales la infección por pseudomonas esta relacionada con la presencia de fimbrias y otros factores. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 209. Esporas <ul><li>10.- Defina espora bacteriana : se denomina también endoesporas, pues se produce intracelularmente, y son formas resistentes que adquieren los microorganismos en determinadas condiciones. </li></ul><ul><li>Contienen acido dipicolinico + calcio </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 210. <ul><li>11.- De qué sustancia están químicamente compuestas las esporas bacterianas? De ácido dipicolinico y calcio. </li></ul><ul><li>12.- Qué le proporcionan las esporas a las bacterias? Resistencia </li></ul><ul><li>13.- Define cápsula bacteriana: cubierta mucilaginosa que cubre toda la célula. </li></ul><ul><li>Aumenta la capacidad infecciosa de la bacteria. </li></ul><ul><li>Son las causantes de algunas molestias en procesos industriales porque producen material viscoso. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 211. <ul><li>14.-Que le proporcionan las cápsulas a las bacterias? Una cubierta protectora. </li></ul><ul><li>15.- De qué sustancia están químicamente compuestas las cápsulas bacterianas? De polisacáridos como : dextran, dextrin, levan y celulosa. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 212. Cápsulas 01/08/11 La capsula es un Factor de virulencia Esta es una coloración negativa porque no se tiño la cápsula se observa REFRINGENTE
  • 213. Bibliografía <ul><li>Alvarez FE et al. Confección del Manual de Procedimientos y las Pruebas de Competencia. Encuentro de Inmunohematología y Medicina Trasnfusional. Houston, 12-14 de Junio 1998. </li></ul><ul><li>Alvarez MV, Boquete E, De Fez I. Manual de Técnicas en Microbiología Clínica. 2da.Edición. Asociación Española de Farmacéuticos Analíticos. Madrid 1990. </li></ul><ul><li>Bantar C, Lopardo H. Urocultivo: Procesamiento, Criterios de Interpretación e Informe. www.britanialab.com.ar/apuntes/01_01 . 01/01/2000. </li></ul><ul><li>Caballero E. Manual de Control de Calidad en Microbiología. www.monografías.com/trabajos/mmbiologia. 9/05/2002 . </li></ul><ul><li>Echániz-Avilés IG, Velásquez-Mesa ME, Carnalla MN, Soto Noguerón A. Manual de Laboratorio para el Aislamiento e Identificación de Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Enterococcus y Staphylococcus spp. Instituto Nacional de Salud Pública. Cuernavaca, Morelos. </li></ul><ul><li>Gabastou JM, Cruz López JR. Sistema de Garantía de Calidad. Conceptos Generales para los laboratorios de Salud Pública en la Región de Américas. Organización Panamericana de la Salud. Washington,D.C. Enero 2001. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 214. Bibliografía <ul><li>García M,E. Atlas Electronico de Microbiologia y Enfermedades Infecciosas. www.movieandinfection.com </li></ul><ul><li>Instituto Nacional de Salud. Taller sobre la Identificación Bioquímica y Serológica de Haemophilus influenzae y Streptococcus pneumoniae. Santa Fe de Bogotá, Colombia. Mayo 1998. </li></ul><ul><li>Instituto Nacional de Salud. Manual de Procedimientos Bacteriológicos en Infecciones Intrahospitalarias. Serie de Normas Técnicas No.28. p.6. Lima, Perú. 2001. </li></ul><ul><li>Lynch B, N. Seguridad e Higiene en los Laboratorios de Salud. Riesgos, Prevención y Normas. p.76-83. Maracaibo, Venezuela. 2002. </li></ul><ul><li>Lopardo H, Hernández C, Soloaga R. Diagnóstico Microbiológico de las Infecciones Respiratorias Bacterianas. www.britanialab.com.ar/apuntes/22_03 . 01/01/2000. </li></ul><ul><li>Llop A, Valdés-Dapena MM, Zuazo JL. Microbiología y Parasitología Médicas. Tomo III, Cap. 4, 146 y 147. Editorial Ciencias Médicas. La Habana.2001. </li></ul><ul><li>Maldonado B A, Lepe L R, Prat M MS. Mantención y control de equipos y accesorios. Manual de Control de Calidad en el Laboratorio Clínico. Instituto de Salud Pública de Chile. 1998. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 215. Bibliografía <ul><li>Maldonado B A, Prat M MS, Carmona C. y col. Control de calidad en bacteriología. Manual de Control de Calidad en el Laboratorio Clínico. Instituto de Salud Pública de Chile. 1998. </li></ul><ul><li>Organización Mundial de la Salud (OMS). Manual de técnicas básicas para un laboratorio de salud. Serie de publicaciones científicas No. 439. Ginebra, Suiza. 1983. </li></ul><ul><li>Piédrola de Angulo,G, et.al. Procedimientos en Microbiología Clínica No. 1. </li></ul><ul><li>Recogida, transporte y conservación de muestras. Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. Madrid, España. 1993. </li></ul><ul><li>Prescott. Harley. Klein. Microbiologia . Mcgraw-Hill. Interamericana, Cuarta edicion. 2000 </li></ul><ul><li>Romero Vivas J, y col. Procedimientos en Microbiología Clínica No.3 Hemocultivos. Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica. Madrid,España. 1993. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 216. Bibliografía <ul><li>Secretaría de Estado de Salud Pública y Asistencia Social. Dirección Nacional de Laboratorios. Manual de Normas de Bioseguridad para Laboratorios. Santo Domingo. Enero 2003. </li></ul><ul><li>Secretaría de Estado de Salud Pública y Asistencia Social. Programa Nacional de la Tuberculosis. Módulo de capacitación en la aplicación de la estrategia DOTS/TAES en República Dominicana.Módulo 2: Detección, diagnóstico y tratamiento. P35. Santo Domingo, Julio 2002. </li></ul><ul><li>Secretaría de Estado de Salud Pública y Asistencia Social. Dirección Nacional de Laboratorios. Manual de Normas y procedimientos bacteriológicos para Laboratorios. Santo Domingo. </li></ul><ul><li>Departamento de Laboratorio clínico _Microbiológica </li></ul><ul><li>Hospital de Clínicas Facultad de Medicina Monte video Uruguay. </li></ul><ul><li>Manual de toma de muestras para estudio Bacteriológico, </li></ul><ul><li>Parasitológico y Micológico 2004 </li></ul><ul><li>Joaquín Hiciano Francisca. Manual de microbiología Universidad </li></ul><ul><li>Autónoma de Santo Domingo. </li></ul>01/08/11
  • 217. Bibliografía <ul><li>Enciclopedia Cumbre, novena ediccion. Madrid: España </li></ul><ul><li>Biblioteca de Consulta Microsoft ® Encarta ® 2005. © 1993-2004 Microsoft Corporation. Reservados todos los derechos. </li></ul><ul><li>http://es.wikipedia.org/wiki/Protozoo&quot; </li></ul><ul><li>www.primer.ru/std/gallery_std/mycoplasmaceae.htm </li></ul><ul><li>http://es.wikipedia.org/wiki/Protozoo </li></ul><ul><li>www.dp-c.nl/artikel_11.htm </li></ul><ul><li>www.homeoint.org/.../infinitesimal.htm </li></ul><ul><li>iws.ccccd.edu/.../media_SD_list_page.htm </li></ul><ul><li>www.google.com </li></ul><ul><li>Warrem E.Levimson Ernest Jawetz, Microbiología e inmunológica </li></ul><ul><li>Jawetz. Melnich Adelberg: Microbiología Médica </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 218. <ul><li>Es un recurso didáctico fácil de elaborar, económico se puede enviar por correo electrónico , lo puedes colocar en una pagina Web y permite a los usuarios aprender, a su medida según el tiempo disponible en su hogar cómodamente y compartirlo con sus compañeros, estudiar a distancia y se ha comprobado que el aprendizaje con su uso es eficaz, eficiente y efectivo. </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA
  • 219. <ul><li>Se le debe hacer revisiones permanentes y actualizarlo </li></ul><ul><li>Se entregará a la cátedra de microbiología a la cual pertenezco para que le hagan las revisiones y correcciones pertinentes. </li></ul><ul><li>Agradezco las sugerencias a la siguiente </li></ul><ul><li>Dirección electrónica </li></ul><ul><li>A Jiménez 16@ hot mail. com </li></ul>01/08/11 Altagracia Jimenez Diaz MA Manual de práctica de Microbiología Digital

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