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  • 1.  
  • 2. CITOESQUELETO Formado por: actina (6 nm) 1.-Microfilamentos (6 nm) miosina (14 nm) 2.-Filamentos Intermedios (8-10 nm) = 7 clases 3.-Microtúbulos (22-24 nm) = tubulina Retículo Microtrabecular Función: Movimiento celular Soporta el volumen de la célula Maquinaria de los movimientos intracitoplásmicos: Transporte de proteínas y señales, Transporte de organelos, Segregación de cromosomas, Contracción celular, Separación de células hijas en la división celular Morfogénesis embrionaria
  • 3.  
  • 4.  
  • 5. Microtrabécula 1970 Porter, Buckely, Wolosewick  Retículo microtrabecular (ME alto voltaje)
  • 6.
    • Microfilamentos:
      • Participan directamente en los movimientos celulares
      • microfilamentos delgados ( actina ) + microfilamentos gruesos ( miosina) + proteínas asociadas
      • Actina 6-7 nm de diámetro y 2-3 µm de largo
      • Miosina participa con la actina en la contractilidad celular  14 nm.
    • Identificación:
    • -Microscopía electrónica -Inmunohistoquímica -Inmunofluorescencia
    MICROFILAMENTOS
  • 7. Microfilamento Actina G (globular) 5 nm Actina F  doble hélicoide de moléculas de actina G  6 nm diámetro Tipos de actina=  β γ LOCALIZACIÓN: Todas las células eucarióticas Células especializadas y regiones con abundantes microfilamentos: Fibras musculares (sarcómera) Céls. absorbentes (microvellosidades) Células sensoriales auditivas (estereocilios) Células epiteliales (uniones intercelulares) Células en división (anillo contráctil) Amibas (pseudópodos)
  • 8. MICROFILAMENTOS (+) (-) Son estructuras polarizadas, en extremo + crecen 10 veces mas rápido que en extremo (-) Filamento de actina + Fragmento S 1 de miosina
  • 9.
    • Miosina:
    • Participa en la motilidad celular junto con la actina
    • agrupa formando filamentos gruesos de 14 nm
    • Representa el 44% de la proteína muscular total
    • Cada molécula comprende 2 cadenas pesadas (HC) de 225 kDa c/u y 4 cadenas ligeras (LC)
  • 10.
    • Miosina:
    • Mediante digestión con enzima Tripsina, la molécula de miosina se divide en dos partes:
    • Meromiosina ligera (la mayor parte de la porción recta
    • Meromiosina pesada (parte de la porción recta y la porción globular)
    • Con la digestión de la enzima Papaína, la Meromiosina pesada se divide en dos:
    • Sub unidad globular (S1): Cabeza de la molécula y contiene ATP (une a actina)
    • Sub unidad globular (S2): porción recta
    +
  • 11.
    • MICROFILAMENTOS
    • Distribución
    • Células no musculares  háces paralelos
    • Células. Musculares  Sarcómera
  • 12. Los microfilamentos en músculo =miofilamentos Miofilamentos  SARCOMERA 2.4 μm X 1μm Tipos de miofilamentos: Delgados : ACTINA 6 nm, forman las bandas I y parte de las A Gruesos : MIOSINA 14 nm, bandas A y M Proteínas asociadas a microfilamentos en sarcómera: Titina: une miosina a banda Z Nebulina: fija a la actina Cap Z: une filamento de actina a línea Z
  • 13. MICROFILAMENTOS
    • PROTEÍNAS FIJADORAS DE ACTINA
    • Células Musculares estriadas:
    • Tropomiosina: Mantienen rectilíneos los filamentos
    • Troponina T, I y C: Contracción muscular
    • Miosina I y II: motoras
  • 14. Células no Musculares: Timosina y Profilina: Secuestran la actina en su forma monomérica Fimbrina, α-actinina, y villina: unión transversal entre Microfilamentos Fodrina: une haces de Microfilamentos Gelsolina: Fragmentan filamentos largos de actina Filamina: Forman enlaces en sitios de entrecruzamiento de filamentos y estabilizan redes tridimensionales gelificadas PROTEÍNAS FIJADORAS DE ACTINA
  • 15.  
  • 16.  
  • 17.
    • Inmunofluorescencia con triple marcaje, los MF en verde, mitocondrias en amarillo y núcleos en azul
    • b) y c) Demostración de actina y miosina en espermatogonias, Sertoli y células peritubulares
  • 18. Músculo Liso
    • Representación de las unidades de contracción
    • Organización de los microfilamentos delgados
    • Mecanismo molecular de la activación de la miosina en la contracción
  • 19.  
  • 20. FILAMENTOS INTERMEDIOS Función: Dar soporte a las células cuando son sometidas a estrés mecánico (función arquitectónica) Diámetro: 8 – 10 nm Localización: Casi todos los tipos de células animales Citoplasma  Forman una red citoplásmica, se anclan en la membrana plasmática de uniones célula-célula Núcleo  Lámina nuclear Tipos de filamentos intermedios (FI): 1.- Filamentos de queratina: células epiteliales 2.- Neurofilamentos: neuronas 3.- Gliofilamentos: Células gliales 4.- Desmina: Músculo liso y estriado 5.- Vimentina: Células mesenquimáticas 6.- Láminas nucleares: bajo la envoltura nuclear 7.- Otros: Nestina, periferina, gefiltina y platicina: neuronas
  • 21. A) Micrografía de fluorescencia de células epidérmicas teñidas para filamentos intermedios, conectados a los FI de otras células por los desmosomas. B) Dibujo representativo de la imagen A FILAMENTOS INTERMEDIOS CITOPLASMICO NUCLEAR Queratinas Vimentinas y relacionadas Neurofilamentos Lámina nuclear En epitelios En tejido conectivo, músculo y células de la neuróglia En células nerviosas En todas las células nucleadas
  • 22. Modelo de estructura de Filamento Intermedio Composición de FI: Proteínas fibrosas elongadas y extremos globulares. El dominio central es una región α hélice que facilita la formación de dímeros  tetrameros  8 tetrámeros = FI
  • 23. A) Céls. de carcinoma hepático humano. Triple marcaje: Queratina = rojo, desmoplaquinas (desmosomas) = verde, y núcleo = azul. B) Demostración de queratina en conductos deferentes humanos.
  • 24. MICROTUBULOS
    • - Participan en la organización citoplásmica de las células eucarióticas
    • - Tubos largos de proteína (tubulina) que pueden rápidamente desensamblarse y ensamblarse en otro sitio
    • Crecen a partir del centrosoma . Extendiéndose hacia la periferia celular
    • - Crean un sistema de vías donde pueden ser desplazados: vesículas, vacuolas, organelos y otros compuestos celulares
  • 25.
    • Funciones de los Microtúbulos
      • Participan en la división celular  Huso mitótico
      • Organización de los organelos celulares
      • Transporte intracitiplásmico de vesículas, vacuolas, etc
      • Forman parte de los organelos microtubulares (cilios y flagelos)
  • 26.
    • -Compuestos de sub unidades de tubulina
    • Tubulina = dímero de tubulina- α y tubulina-β c/u 55 kDa y 500 aa
    • (unidas no covalentemente)
    • Los dímeros se unen a otros dímeros para formar las paredes de los microtúbulos
    • El MT aparecen como un cilindro hueco de 13 protofilamentos paralelos
    • Los MT son estructuras polarizadas, tienen un extremo (+) y un extremo (-)
    • El diámetro de un microtúbulo es de 24 nm
    • La pared del tubo es de aprox. 4-5 nm
    ESTRUCTURA DE LOS MICROTUBULOS (MT)
  • 27.  
  • 28.
    • Cualquier célula tiene una mezcla de tubulina libre y microtúbulos = Concentración crítica
    • Factores que favorecen la Formación de Microtúbulos:
    • Proteínas Asociadas a los Microtúbulos (MAP)
    • cAMP
    • Ca ++
    • Centros Organizadores de Microtúbulos (MTOC)
    • Centriolos
    • Cuerpos Basales
    • Cinetocoros
    • Poros de la envoltura nuclear
    • Laminillas anilladas
    • Fragmentos de microtubulos
    • Otros factores: Policationes, RNAasa, Insulina, y Factor de crecimiento nervioso (NGF)
    Cuando la tubulina se incorpora a un microtúbulo se requiere de la fosforilación de GDP a GTP
  • 29. FORMACION DE MICROTUBULOS IN VITRO
  • 30. gdp gdp gdp gdp gdp gdp gdp P gtp + -
  • 31.
    • Químicos
    • Colchicina (Colchicum autumnale): Se fija con gran afinidad a la tubulina = evita la polimerización de MT
    • Vincristina y Vinblastina: se unen a los dímeros de tubulina en los sitios de unión a GTP
    • Podofilotoxina (resina Podophyllum peltatum)
    • Griseofulvina (Penicillium griseofulvum)
    • Cacodilato, derivados arsénicos y sulfhidrilos, narcóticos como halotano, etc
    INHIBIDORES DE LA FORMACION DE MICROTUBULOS
  • 32. Físicos Presión hidrostática elevada Frío (menos de 4 °C) Calor (más de 40°C) -Taxol -Agua Pesada ESTABILIZADORES DE LOS MICROTUBULOS
  • 33. CENTROSOMA Y ORGANIZACIÓN DE LOS MICROTÚBULOS CENTROSOMA: Región de donde originan los microtúbulos -situación: cerca del núcleo - Constituidos por un par de centríolos perpendiculares entre si
  • 34. PROTEINAS ASOCIADAS A LOS MICROTUBULOS MAP
    • Facilitan la tubulogénesis, estabilización del MT y la relación entre MT adyacentes
    • Se clasifican en grupos de acuerdo al peso molecular:
    • MAP de alto peso molecular (200-1000 kDa): MAP-1 al 4,
    • MAP-1 (C) se llama también dineína citoplásmica – Transporte retrógrado de vesículas
    • MAP-2 se encuentra en el cuerpo celular y dendritas de células nerviosas
    • -MAP de bajo peso molecular (55-62 kDa) o Proteínas τ (tau) recubren la superficie del MT
    • Quinesina : transporte anterógrado
    • Enzimas : GTPasa, tranfosforilasa de GTP,
    • ATPasa
  • 35.  
  • 36.  
  • 37.  

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